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yhggqg 我对分子生物学基本理论的认识很混乱，恳请各位网友不吝赐教，给予帮助：1.DNA复制、RNA转录、蛋白质翻译与细胞分裂周期的关系？DNA复制与蛋白质生物合成是否存在时空上的先后顺序？2.DNA复制时端粒是否变化，对DNA复制的影响？3.蛋白质生物合成过程中，是否细胞内所有mRNA、tRNA、rRNA都参与了RNA转录、蛋白质翻译过程？若答案是否定，则没有参与RNA转录、蛋白质翻译过程的这三种RNA的去向？4. ...

summer848822 大家好请问如何验证两条信号通路在传递某种信号过程中能有相互作用？协同或者拮抗？着急求问 谢谢~:Idream82 楼主的问题太大了，两条信号通路的crosstalk有多种形式。有的是同一个legand可以同时激活两条通路，有的则是一条通路中的重要蛋白可以调控另一条通路（这种方式居多），还有的一条通路激活的下游基因表达的蛋白可以调控另一条通路。举一个简单的例子：JAK－STAT通路和NF-kB通路的 ...

magichunter 我现在发现我的药物可以促进细胞死亡，但是不知道是通过什么途径作用的。因此进行了以下实验：（1）空白对照（2）药物给予组（3）药物+caspase抑制剂（4）药物+自噬抑制剂（3MA）结果如下：（存活率MTT）（1）100%（2）50%（3）80%（4）20%请问这个结果是不是说明：药物在诱导细胞死亡的过程中，自噬可以保护细胞损伤，而caspase依赖性的凋亡可以诱导细胞损伤。如果是的话，怎么进行下面的研究呢？da ...

conanthird Hi there,any idea about how long should I deprivate the serum for BMDC used for cell signaling?It takes about 16 hours for the cell line, but I have no idea for the primary cells likeBMDC and BMDM.Thanks a lot!fanchuandong Maybe you had to arrange a time course, such as 12, 24, 36, and 48 h, to observe the depr ...

bingo816 芯片的结果，信息量很大，而且表达谱很复杂，哪位仁兄有没有什么关于分析基因芯片结果的好方法啊。 非常感谢！！！freecell http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19763933bingo816 非常感谢您，能不能 上传一下 文章Bioinformatics analysis of microarray data版主freecell留言:请移步到“新会员友情检索求助版”，求助文献。本文由丁香园论坛提供，想了 ...

fanjingol 请教一下各位前辈：关于JNK的抑制剂，我查阅了相关文献，只看到了SP600125(Calbiochem, San Diego, CA USA)这一种。请问有做过相关实验的前辈们，能否告知我JNK的抑制剂到底有几种？因为JNK蛋白激酶由3个基因编码,那么此抑制剂是否均抑制jnk 1和jnk 2以及JNK3，还是只针对某一个JNK基因编码的JNK蛋白激酶？换而言之，就是此种JNK抑制剂的特异性如何？请前辈们解答！谢谢了dre ...

flowriver 新生，第一次来发帖，请教：PCR做出加药后上调的趋势，但是Western却是下调。应该怎么解释呢？如果能附上相关文献的检索就更好了。谢谢！！！freecell 在回答这个问题前，请楼主回答几个问题：1、你的“PCR和Western的结果不相符”这个结论，是重复几次试验后，观察到的结果？2、你的PCR样品和WB样品来自体外还是来自体内？3、你的PCR是常规PCR，还是定量PCR，还是定量RT-PCR？4、你的PC ...

kiki_1998 请教如何查找KRAS 12 13 突变位点的两端序列？在NCBI的SNP中好象没找到外显子2的12，13密码子的SNP两端序列。不知应该如何查找它NCBI的序列号？zhujoker NCBI Reference Sequence: NM_004985.3http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NM_004985.3以及http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrezkiki ...

topicare 做细胞信号转导实验，研究了一个抑制剂的说明书（ICI182780），说明书中提供了一个IC50值，在某些已经报道的文献中使用的浓度跟说明书提供的IC50值相差甚多。===============================请问各位站友：1.说明书提供的IC50值有何参考意义？2.如果要得到自己的IC50值，是不是参考说明书提供的IC50值并在其附近设置多个不同梯度的浓度？===============================先谢了！topica ...

chaoyueyzc 如题，在测序结果中见到完好的剪切后的某癌基因的mRNA序列，但是在样品准备过程中早已排除了mRNA的污染，请问这种现象应该怎么解释呢，那剪切完好的mRNA又怎么会反转录并插入基因组序列中呢？比较困惑，请各位高手指点，这一现象是否正常，有谁见过类似的报道。zhujoker 请问一下你是怎么排除了mRNA的污染？如果你的基因在你的肿瘤中处于高表达时，应该可能会出现这种情况。个人观点，希望大家支招！ch ...

gyr2009 最近做凋亡，这是拍的电镜照片，很怪异，细胞核内染色质浓缩，但细胞膜裂解，细胞质内一片混乱，细胞这是怎么了，是凋亡吗？canyang112 是凋亡，染色质边聚，很典型。细胞膜本来就应分离，不然以后怎么形成凋亡小体，细胞核内深染色的可能是染料杂质。另外，细胞质内好好像是自噬泡，许多致凋亡因素可同时引起自噬。xiongfeitcm 目前正在研究自噬，和我们实验室结果很像，像是自噬geduodou85 有点像自噬小泡 建议做染 ...

keanu21797409 请问 用什么方法判断 一个病毒的基因组 是否发生重组？谢谢各位。。。freecell 1、生物信息学方法分析： 例如http://www.chinagene.cn/yc/qikan/manage/wenzhang/2005-32%281%29-7.pdf2、PCR结合测序分析： 例如http://www.virologyj.com/content/5/1/143http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/781 ...

PCR352 请教：本人想利用特异性抗体结合CDNA法筛选某蛋白的膜受体，这种方法是否可行？cDNA文库构建工作量大不大？如果构建膜蛋白的cDNA文库，是否就是提取膜蛋白的RNA，然后反转录成CDNA，然后转化就可以了？本人不是生化专业，理论知识欠缺，还请高手指教。zhujoker 为什么用抗体呢？biogenesci 膜蛋白酵母双杂交有专门的试剂盒的，可以找公司问问，这个试剂盒是illumina的，有公司可以代做的，上海海 ...

yysghyy 请问各位高手，1）除了质谱分析还有什么办法可以确定某个蛋白的磷酸化位点；2）还有如果知道了这个磷酸化位点怎样可以抑制其磷酸化(研究其下游信号通路）？3）我研究的某个受体具有酪氨酸激酶区域，也知道了几个磷酸化位点，但是研究发现其酪氨酸激酶活性并不高，这是什么意思？是说其磷酸化位点不易被磷酸化，还是可以磷酸化，但激活了另外的信号通路？非常感谢！narcissus27 回答问题2，可以将这个位点突变成其他氨基酸， ...

lantianshi 如题：isoform和transcript variant有什么区别和联系？lantianshi isoform is encoded by transcript variant 。那transcript variant 是什么？基础太差了。:Pxx(zjubell 同工体是由转录差异所引起（编码）的。就与‘同分异构体’是分子式相同，但结构不同的化学物质，一个道理。或者说cDNA是由RNA反转录而来的那你说‘cDNA’ 跟‘RNA反转录’是什么 ...

hanyoujin 有谁用流式细胞术检测过蛋白磷酸化吗？我现在做信号通路研究，要用PE标记的单抗检测细胞内的信号分子磷酸化状态，涉及到透膜处理，具体的标记的实验步骤以及用什么buffer有谁知道吗？magichunter 蛋白磷酸化为什么不用western检测？conanthird hanyoujin wrote:有谁用流式细胞术检测过蛋白磷酸化吗？我现在做信号通路研究，要用PE标记的单抗检测细胞内的信号分子磷酸化状态，涉 ...

lantianshi 我的目的基因的5‘端几个外显子转录但是不翻译，怎么解释呢？是因为被剪切掉了吗？目前为止还没人报道说有剪切型zjubell （如果排除你说的可变剪接。）因为被microRNA给沉默掉了，呵呵。miRNA是一类多细胞动物或植物基因组的前体mRNA内含子，miRNA独立转录单位或miRNA基因簇编码的19-25个核苷酸大小的内源性单链RNA，他们在转录后水平沉默特定基因从而对生物体基因表达起到精细调 ...

sschen 各位老师：今天遇到一个问题，发现NCBI中下载的LEPREL2基因的plus strand序列与dbSNP数据库中该基因中rs4963516多态提示为forward strand的序列不同，哪位老师帮我解释一下为什么？zjubell 建议把原始的两个链接都粘上来，否则别人还得去找一下，比较麻烦，更不知找到的，是否就是你所说的。sschen 谢谢您的提醒，下次提问时一定注意。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有 ...

tenalp 各位，我查了文献以及试剂公司的相关资料，STAT3的抑制剂种类很多，不知道该怎么选了。想希望高手指点。我想做的是研究JAK2下游的信号通路，所以需要的STAT3抑制剂要特异性越高越好。看了文献候鸟觉得AG490可能特异性不是很高，所以想请教高手，还有没有什么好的选择？:)zfyyzz00 可以使用siRNA干扰技术对STAT3进行抑制呀，这个比较的公认的最为可靠的方法呀eeflying S31-201 (NSC 74 ...

太阳星辰 谈到癌基因修饰时，是指那些甲基化、磷酸化？还是指用某种基因去修饰癌细胞？我对这个概念不太清楚，请各位老师赐教！太阳星辰 帮帮忙，老师要求查文献写综述，可我查了一下午好像也没弄明白。开始理解的是表观遗传学，后来感觉又觉得不对。我检索时应该用什么关键词呢？zhujoker 其实癌基因很多，你老板这样跟你说是不负责任的，不过在很大程度上也是为了锻炼你。让你尽可能的搜索更多的文献来充实你。而癌基因的修饰也是可以从不同层面来 ...