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        【求助】克隆100个已知序列的基因于带有绿色荧光蛋白的载体中需要多少时间和经费?

        丁香园论坛

        2749
        克隆100个已知序列的基因于带有绿色荧光蛋白的载体中需要多少时间和经费?

        非常感谢
        方法:
        在NCBI中搜索下面的关键词,能在《methods in molecular biology》系列丛书中找到很多文章。
        high throughput cloning methods in molecular biology

        时间估计不会太长。关键花时间的是克隆以后的工作,表达,活性分析。

        钱,不知道,多多益善。
        版主freecell留言:
        新年新气象,加分奖励!
        绝大多数不需要自己去克隆,完全可以考虑购买商业化的产品,这样时间肯定省极多,经费估计也要比自己去克隆要少,自己做需要提取模板、PCR、克隆鉴定、测序验证、有突变还要重来等等。
        我想这个还是要考虑到你后面的实验如何进行来考虑。比如仅仅只是克隆估计应该不会花太多时间和经费,但是如果要保真度高,稳定表达等估计是花费些时间。构建时间应该不太需要多少,但是费用就很难说了,毕竟不是一对一的关系。你可以将你所需要耗费的材料统计起来,计算总额后乘以1.5作为参考。当然这还不 包括人工费用。
        非常感谢各位的建议,但是不知道那些公司可以承接这样的工作?
        全长cDNA克隆:
        TrueORF cDNA克隆:人及小鼠ORF克隆分别为25,000 个和12,000个,其中11,000个克隆的表达已经通过Western Blot的验证。这些克隆以2种形式提供:一种是在表达的蛋白C末端带Myc-DDK(即FLAG)标签,一种是带GFP标签。这些cDNA克隆均构建于pCMV6入门载体上,可方便转换至其他目的载体。

        按照其网页上的促销价:900RMB/clone × 100 = 9万RMB, 直接买,不用等时间,就可搞定,批量买估计还可以讲价,关键的是品质有保证。

        注:非公司托儿,因前段时间帮朋友筹划项目专门研究过该公司产品。
        雪中梅 wrote:
        北京傲锐东源公司:
        http://www.cdna.com/newEbiz1/EbizPortalFG/portal/html/cDNA.html?GeneralContentShow_DocID=c373e913e2400b208f7ebd191dbffbe8

        全长cDNA克隆:
        TrueORF cDNA克隆:人及小鼠ORF克隆分别为25,000 个和12,000个,其中11,000个克隆的表达已经通过Western Blot的验证。这些克隆以2种形式提供:一种是在表达的蛋白C末端带Myc-DDK(即FLAG)标签,一种是带GFP标签。这些cDNA克隆均构建于pCMV6入门载体上,可方便转换至其他目的载体。

        按照其网页上的促销价:900RMB/clone × 100 = 9万RMB, 直接买,不用等时间,就可搞定,批量买估计还可以讲价,关键的是品质有保证。

        注:非公司托儿,因前段时间帮朋友筹划项目专门研究过该公司产品。

        1、雪中梅网友说的就是国外的Origene公司,但900RMB/clone的促销价格,是普通的基因克隆至pCMV6入门载体上的价格,即125美金。
        2、而携带GFP或FLAG标签的表达载体的价格又分两种,经过WB验证和没有经过验证的。但都远远高于克隆至pCMV6入门载体上的价格。备注:我前段时间计划购置的两个表达克隆的价格分别是720美金和2700美金。绝对不会是900RMB,我估计国内公司的报价也至少是3000RMB起步。
        buyqcn wrote:
        1、雪中梅网友说的就是国外的Origene公司,但900RMB/clone的促销价格,是普通的基因克隆至pCMV6入门载体上的价格,即125美金。
        2、而携带GFP或FLAG标签的表达载体的价格又分两种,经过WB验证和没有经过验证的。但都远远高于克隆至pCMV6入门载体上的价格。备注:我前段时间计划购置的两个表达克隆的价格分别是720美金和2700美金。绝对不会是900RMB,我估计国内公司的报价也至少是3000RMB起步。


        多谢buyqcn网友提供的进一步信息!
        实在太感谢楼上各位的重要信息了,给各位拜个晚年了

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

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