全部

lsdcfhyj 向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题，两者的区别我基本清楚了，只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒（分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因）呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因？还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话，是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因，还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调 ...

zhubest 我正在克隆一个八百多bp的基因，换了很多载体，表达条件换了不少，可始终不能得到可溶的蛋白表达，哪位大师能够支招，可以提供一些表达条件，谢谢了freecell 可以尝试真核表达系统，例如杆状病毒系统或者毕赤酵母。vbvbvbfgiw 先得确定连接转化都成功了吧，换一种裂解细胞的方法试试（溶剂），使你的蛋白溶解。版主freecell留言:您误解楼主的意思了。zhubest 谢谢版主啦，不明白为什么包涵体始终不能通过变 ...

cell100 最近用ly294002处理2种细胞系，添加浓度为20uM处理2-12小时，wb检测p-Akt的量发现不但没减少，反而增加，很奇怪的！百思不得其解，不知是何原因？用50uM处理时也是这样?看来只有向高手求助了。cell100 用50uM处理后的结果也差不多，请高手帮忙分析一下原因，呵呵shutaozheng_824 其实，我也出现过类似的情况啊！当时我在用MAPK/ERK1/2 特异性抑制剂U0126预处理食管癌细胞 ...

kaige88 今天看到"转基因玉米惹祸 "文章，想就此对转基因食品安全的问题从专业角度分析其真伪，望大家积极讨论参与。附带转发"转基因玉米惹祸 "报道一篇，希望有些专业人士意见。http://news.sina.com.cn/c/2010-09-22/100318149161s.shtml转基因玉米惹祸http://www.sina.com.cn 2010年09月22日10:03 大众网-齐鲁晚报　　大老鼠消失、母猪爱生死胎、狗肚子里都是水，此外，羊 ...

andyjiang_007 请问在培养基名称后面的W/O是什么意思呢？比如：LM|MEM/ALPH W/OMEM-Eagle Earle's Salts with L-Glutamine, w/o Sodium Bicarbonate等等xdb86 withoutylhuang0502 补充一下，W/O是美国人常用的简写方式，但是正规发表的文章，一般没有人这么写（目前还有看到二般的），相应的， w/自然就是with啦。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前 ...

dengjie19841217 各位高手们求助老板让我做地方病的基因组学，不知如何下手，拜托各路高手给我点思路吧:Is_dxding 同求，不知道怎么下手freecell 这个明天比较广泛。建议缩小范围。http://www.baigoogledu.com/s.php?hl=zh-CN&q=%B5%D8%B7%BD%B2%A1++AND+%BB%F9%D2%F2%D7%E9%D1%A7&n=2本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯 ...

janhic11 我做TNF处理HepG2细胞，然后测定细胞通路的变化。问题是，细胞如何处理哦？1、细胞加TNF前，一般需要饥饿多少小时才能消除血清对细胞的影响？2、细胞饥饿后（我选的8h），而且加TNF的时候又不能加血清（因为血清含细胞因子，而且好像血清对信号通路有影响），细胞处理时间最长是24h。这样的花8h+24h=32h。细胞好像撑不住。。。。这问题如何解决哦?请高手指教！不盛感激wangyuanjing1004 关注中， ...

sunchangzheng 我打算用此抗体通过流式检测细胞表面P糖蛋白的表达量差异。说明书中说是多抗，这种抗体有单抗的吧？用于FCM： 1：20-100，这是说用于流式的稀释倍数，是不是稀释倍数越小越好呢？同型对照抗体是不是必须要做的？如何选择阴型同型对照抗体呢！我用的抗体是FITC标记的P-糖蛋白抗体谢谢交流与帮助！freecell 抗体的稀释倍数是需要优化的。sunchangzheng freecell wrote:抗体的稀释 ...

wxf09211230016 准备做microRNA，请问各位高手，microRNA提取、标记到定量PCR哪个公司的试剂比较好呀？刚刚接触，请大家多多指教,先谢过了。zhujoker ABI的，做实验之前自己查查好吗？wxf09211230016 恩，谢谢了bluesteven NOVLAND的你可以咨询下，价格上比较有优势，也有全套的提取和检测本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都 ...

qinbingsx 各位大侠，本人想让目标microRNA在细胞中过表达，以前看到的好像大都是用mimic，看到有帖子说表达前体实验效果较好，我想请问一下质粒过表达的microRNA前体是转入细胞内后再生成成熟的目的microRNA吗？这种microRNA前体那一家公司可以买到啊？请赐教，非常感谢！freecell 可以咨询ambion公司，专门做RNA的。willion1985 锐博生物本文由丁香园论坛提供，想了解更 ...

xiaonichi 想考博了，要考医学分子生物学，看了有好多人写的。请问有经验的同志觉得谁编的医学分子生物学比较好一点呢。lingyuyuxin 医学分子生物学（供研究生用）——全国高等学校教材、全国高等医药教材建设研究会规划教材、研究生规划教材作 者： 刘德培 主审 查锡良 主编 药立波 副主编出版社： 人民卫生出版社挺好的freecell 这个问题，版内已经讨论多次。建议参考高等教育出版社出版的《医学分子生物学原理》，王琳芳院士主编。这本书的特色是语言通 ...

liuer2000 求助大家一下，我在SIGMA公司买的粉剂药物，用来做细胞处理的，由于量少，我只能一次性全部溶解配成一定浓度的储存液，现在要带去另一个地方（两地约四五个小时的路程），怎样处理才能尽量保持药物的药效？放在冰袋中运输不知是否可以？:)liuer2000 大家有遇到这方面的问题吗？怎么解决的？给点意见啊:)ylhuang0502 这个LZ要查该粉剂药物的稳定性，先在Sigma网站查，如果没有, 就google一下，一般要 ...

lingwu 酪氨酸激酶抑制剂PP1和PP2有什么区别？如何选择，急切想知道，谢谢！ylhuang0502 首先纠正一下， PP1和PP2都不是酪氨酸激酶的通用抑制剂，两者均为Src family kinase的选择性抑制剂。其中PP2更常用些，两者的差异很小，化学结构非常相似，两者均不是Src family kinase 特异性抑制剂，两者均可抑制别的激酶的活性，，比如：The Src-selective Kinase Inhibitor PP1 Also Inh ...

lope 用WB检测beta-catenin的活性，应该是一种检测磷酸化水平，一种检测核内水平。用前一种方法可以省下一个核内参，需要同时检测非磷酸化水平的吗？而我看到的文献似乎还是检测核beta-catenin更多，请问前辈们是不是检测核蛋白更容易出结果呢？ylhuang0502 如检测磷酸化水平，LZ还需要检测总的catenin （磷酸化和非磷酸化都识别），将p-beta-catenin/total beta-catenin处 ...

KingXY 如题，看文献cross-presentation of cell,是指哪类细胞，和APCs（抗原提呈细胞）是什么关系？谢谢ylhuang0502 The term cross-presentation denotes the ability of certain antigen-presenting cells to take up, process and present extracellular antigens with MHC class I molecules to CD8 T cells (cytot ...

zgdlxy 想问一下大家，有没有哪个蛋白在一个细胞系中起正调控作用，在另一种细胞中则起负调控作用？比如在正常细胞中诱导凋亡，而在癌细胞中抑制凋亡。chuckdouble 很多~~~~~~~ylhuang0502 chuckdouble wrote:很多~~~~~~~例如...??期待ing!chuckdouble ..............................ylhuang0502 LS的搜索结果显然不是LZ所言的某个蛋白在一个细胞系中起正调控作用，在另一种细 ...

myskite 如何提取血清中的miR？提取前血清如何保存？freecell http://www.google.com/#sclient=psy&num=10&hl=en&q=serum+microrna&aq=f&aqi=g2&aql=&oq=serum+microrna&gs_rfai=&pbx=1&fp=280187d6f0589da0happyli85 做测序的话建议TRIZOL，做PCR的话建议用过滤柱的方法。TRIZOL 用INVI ...

月下独见 哪位高手知道蛋白质入核抑制剂有哪些？？哪个公司有卖的？zhujoker 我不是很清楚你问题的来源，但是有一点你要清楚，没有一个试剂能够抑制所有蛋白质的入核，所以你问问题事最好说清楚一点月下独见 目前我正在研究一个基因，它表达的蛋白是要入核起作用，老板让我去找抑制这个蛋白进入细胞核的试剂（当时老板说的是核质穿梭抑制剂），可是我找了很久都没找到。老板说原来有师姐用过，可是我去问过那个师姐用的是出核转运抑制剂Lept ...

2004seedfive 各位仁兄！提取植物的miRNA哪家公司的试剂盒提取的质量好谢谢freecell 做核酸提取，Qiagen比较专业；其中做RNA的话，Ambion自称RNA技术公司，相对比较可靠。艾博思 2004seedfive wrote:各位仁兄！提取植物的miRNA哪家公司的试剂盒提取的质量好谢谢Ambion现在的ABI,invitrogen。Qiagen的在纯化这块不错，但是miRNA的认可度不高。blues ...

lsdcfhyj 将报告基因质粒转染到癌细胞中，是否都要共转染一个带有抗性基因的质粒来筛选阳性克隆？很多文献是这样做的，可是我认为报告基因质粒本身就带有抗生素标记基因，为什么还要共转染另一个抗性质粒？一直对着个问题很困惑，请懂这方面知识的前辈指点指点？还有就是质粒使用量的问题，我不清楚到底质粒用量与转染细胞之间到底是个什么样的比例合适，看了很多操作步骤，有的一个六孔板一孔就要用1到2微克，可是商家产品就有1微克 ...