全部

苏小燕 18S rRNA是组成核糖体的一部分，想请教一下，在细胞核里有没有转录合成18S rRNA的DNA存在？slytjiaofei 这位战友，这种基础问题有空可以好好看看教科书，答案是当然有，而且是多个拷贝的！！！苏小燕 呵呵，让您见笑了，以前学临床，对这个不是很清楚，望多多指教！一维阿布 18S rRNA是真核生物的核糖体RNA，由DNA转录而来，真核生物的DNA除了线粒体DNA外都存在于细胞核，所以18S rRNA苏小燕 线粒体DNA指导合 ...

langtu 最近在找一个micrRNA的靶基因，种子序列并不完全互补，但是mRNA水平是有变化的，百思不得其解，偶然发现一篇综述写道“ 最近的一些发现表明，miRNAs 与它们的靶基因只有部分互补的情形也会导致mRNA 的降解，但是目前还不清楚，翻译抑制是否发生在mRNA 的降解之前”，大家有碰到这样的情况吗？有相关的文献可否分享一下holywater 互补导致翻译受阻也会造成翻译水平下降互补导致降解也会下降不完全配对也会可能互 ...

翩pian1 现在想用毒胡萝卜素诱导肝L02细胞内质网应激，但是没看到合适的文献怎样诱导，怎样评估，有没有高手，指点一下啊，感激不尽……yuanyu 我也在做这方面的研究，希望多多交流，互相提高。我的E-mail:fdliang0104@163.combatiwangna Tg不是内质网应激的阳性药吗？直接加进去好了，时间不要太长。因为它会降低GAPDH的表达hongfunv1984 我也是做这方面的，我做的是毒胡萝卜素的类似物， ...

小小学药者 因为实验室以前没做过干扰试验，所以对这块不是很懂。请大家帮我推荐下 哪家合成的比较好，价格也适当的 谢谢哈！另外甲基化的siRNA适用于哪类干扰呢？呵呵 不太懂问题如果很幼稚 不要笑话哦。。。。呵呵 谢谢bioenw 百恩维生物 www.biowit.combaby_susan 甲基化的siRNA，你是指2‘甲氧化学修饰吗，这个主要是保证siRNA转染进细胞或注射动物体内比较稳定小小学药者 baby_susan wrote:甲基化的siRNA，你 ...

leileicui 在看文献是发现这些问题：miR-23a RT GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACggaaatPCR sense GCGatcacattgccagggThe same antisense primer was used for all miRNA PCR : GTGCAGGGTCCGAGGT（问题，1所有的miRNA序列可以用同一个反义序列吗？问题2：这里的正义和反义引物是不是就是其他文章中提及 ...

tank1978 请问有人知道什么叫immunoslot blot（ISB）技术吗？ freecell ISB就是狭缝杂交，就是把反应物加到一个长方形的孔内，然后进行混合及显色。通常96孔板上的孔，都是圆的，或者你点个样在滤纸上，叫做点杂交，即dot blot；这种长方形的反应孔内进行的杂交，就叫slot blot。tank1978 学习了。。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙 ...

悬崖上的牛仔 请教各位，这个microRNA 在该细胞内本身就有，只是表达不稳定，有什么方法可以让这个microRNA 持续表达呢？holywater 表达不稳定也是一种机制，我觉得去研究为啥不稳定更好一些，只是个人意见俄！yz2003can 将microRNA克隆到慢病毒载体，包装病毒，构建稳转microRNA细胞系。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号 ...

sophia1842 哪位好心人，能不能提供一下鼠源的SRY基因（Y染色体上的一个基因，可以区分性别），普通PCR的引物，我找了好几对都不行啊，感谢啊freecell 在google scholar内搜索nature、 cell上面的引物。sophia1842 我找的引物，基本都是08年以后，影响因子7以上的啊woxingwosu 呵呵，那是不是你的系统有问题呢？不可能这么多影响因子7以上的文章的引物都不行吧？本文由丁香园论坛提供，想 ...

huangdde 如血管内皮生长因子（VEGF）与其受体（VEGFR）结合后，会刺激细胞增殖，如下现象是否可以出现：某种物质与VEGFR结合后，该物质会通过VEGFR而抑制细胞增殖？谢谢。holywater 一般来说受体结合是比较特异的，但是可能和结构类似的东西结合而促进或者抑制受体的活性，这也是竞争性抑制剂的来由。不过抑制剂不是“配体”，所以我说楼主的定义可能有些错误。huangdde 谢谢。哪请问：同一种物质，是否可以与不同 ...

jasedm 看到文献好多都说，某蛋白被磷酸化，其活性增高，继而磷酸化下游的信号分子。AKT激酶活性测定和Western blot检测其磷酸化水平两者都能说明AKT的活性吗？有什么不同吗？两者有没有可能测定出来的结果不同？例如说AKT磷酸化水平没变化，但是激酶活性检测结果是活性降低？AKT磷酸化就代表它有活性吗？谢谢高手指点xiaoxiao53 很有价值的问题，AKT磷酸化就应该是有活性吧阿兰梦 测活性和测磷酸化的蛋白表达 ...

leileicui 如题，因为新手没有做过实验，所以请高手详细指点，如果有比较好的文章可以推荐给我，谢谢。为了方便讲解，以mir127为例，逐步讲解，谢谢leileicui 自己顶一下。freecell 这个你可以在google scholar里面搜索这个miRNA的qPCR引物，太多了。可以借鉴nature、science等文章中的引物和探针。其次可以自己设计，例如： http://www.exiqon.com/miRNA-qpcr-d ...

琼琼qiongqiong 各位高人：大家好！我是新手，要开始做实验了，请问大家哈，葡萄糖转运蛋白-1的引物和探针要怎么设计啊？有知道的麻烦给我回复哦，急需，非常感谢！阿修罗axuro 先去NCBI里找到你要的基因核酸序列，然后用引物设计软件设计引物。弱弱的问一句：都没人带的么 ？琼琼qiongqiong 没人，就靠自己，好可怜的琼琼qiongqiong 忘记说了谢谢你啊本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫 ...

bettytj 本人正在研究一个蛋白在信号通路中的作用，这个蛋白的磷酸化状态是激活通路的主要因素，目前用WB检测了这个磷酸化蛋白的浓度，同时又用抗体检测的野生蛋白的浓度，请教这两者在细胞内的共存的么?能否用磷酸化蛋白的增多 来预测野生蛋白减少呢？kern6549 1、可以共存。2、不能预测。磷酸化和非磷酸化同时增加也是可能的。bettytj kern6549 wrote:1、可以共存。2、不能预测。磷酸化和非磷酸化同时增加也是可能的 ...

lamper 请问大家有会用GenePix 4100A Microarray Scanner这个仪器（http://www.moleculardevices.com/Products/Instruments/Microarray-Scanners/GenePix-4100A.html）的么？因为要做抗体芯片要用到扫描这一步骤，我想请教些问题。很急用，要毕业了，不抓紧毕不了业了。感谢好心人帮忙！请懂这个一起和相关软件的兄弟姐妹联系我，Q ...

星雪qq 大家好，我目前需要做转染细胞的实验，我的目的是构建重组蛋白，重组基因已克隆至表达载体pCEP4,目前需要提取质粒做转染，知道要用HEK293细胞，但是查到293细胞有多种，293，293A，293T，不知道到底用哪一种，大家帮忙出出主意吧，谢谢freecell ATCC上HEK-293，只有一种吧。woxingwosu HEK293T和HEK293A 均为HEK293细胞的派生。HEK: Human Embryonic Kidne ...

kaoyanbaihe M13mp18的全基因图谱在哪里才能查到呢，我只查到了多克隆位点的序列，另外需要它的全基因图谱。大家帮帮忙啊baby_susan 你找的是这个网址吗http://www.fermentas.com/en/support/technical-reference/phage-plasmid-dna/m13mp18-m13mp19woxingwosu http://www.cardiff.ac.uk/biosi/st ...

张振中 众所周知，端粒DNA是细胞分裂的“计数器”，随着细胞分裂次数的增加，端粒逐渐缩短，细胞走向凋亡。而端粒酶具有修复端粒DNA，延长端粒DNA长度的作用。在众多恶性肿瘤细胞中，端粒酶呈现高表达。然而有新的研究表明，在过氧化应激的条件下，端粒酶从细胞核中迁移出来并进入线粒体。端粒酶必须在细胞核中才能发挥修复端粒DNA的作用，所以端粒酶必然存在着某些尚未知晓的“细胞核外功能”。进一步的研究发现，线粒体损伤是人体衰老的重 ...

hsclgw 用人重组胰岛素来造HepG2细胞的胰岛素抵抗模型好做吗？做完以后仅仅测量用葡萄糖氧化酶法来测量葡萄糖消耗量，就可以判断模型成功了吗?有没有相关的方法比较全的文献借鉴一下？或者用葡萄糖、游离脂肪酸来诱导胰岛素抵抗的文献哪位大侠有吗？看了国内外参差不齐的文献，还是有点晕~先感谢了！！zhuimenzzhiyn 我目前也在做这方面课题，希望可以交流下，我的qq是：330820896，谢谢！小土豆丁 我也要构建胰岛素 ...

美丽小鸟 我现在用肝窦内皮细胞做冷缺血再灌注方面的实验，即模拟肝移植过程对肝窦内皮的损伤。现在建模过程：把肝窦内皮细胞种于96孔板（10%DMEM高糖培养基），待36小时细胞完全贴壁后，把96孔板置于4摄氏度有机玻璃箱中通氮缺氧。问题：此过程只模拟了缺氧、温度（4度），但培养基没有更换。真实肝移植过程是用UW液浸泡器官，而不是10%DMEM培养基。所以我的实验细胞低温缺氧24小时后仍未出现明显细胞死亡，而在肝移植器官冷 ...

will99_04 小弟想用pGL3-vector basic作为载体装载一个启动子片段，该启动子片段需要经PCR克隆，故要设计引物，在引物的5‘端加入内切酶位点。经过查询后发现可以用一下三种内切酶：KpnI，NheI，MluI查TAKARA的产品目录后发现，这三种酶的反应温度均为37°，但所用缓冲液不同。提问：有没有适合两种酶（从上述三种同时反应的universal buffer（通用缓冲液）？devil19840 查看taka ...