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基因克隆的流程

研究某个 gene 的功能通常要做相关的功能实验,常用的手段有 gain-of-function,涉及 gene 的过表达,在下文中即将讲述;还有 loss-of-function, 通常涉及 gene 的 knock-out 或 konck-down,暂且不提。今天准备跟大家分享一下如何成功地用传统酶切酶连的方法克隆某 gene 的经验,虽然现在同源重组的方法已经越来越广泛地应用到科研中,属于 technology based innovation,给实验带来极大便利。但是传统 ...

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在 Science 这样的顶级期刊发文,能拿 100 万奖金?

今年 6 月,四川农业大学对陈学伟和李伟滔的研究团队进行了表彰,发出共计 1 350 万元的奖励和支持经费(其实奖金不多,只有 50 万是给团队的奖励)。随后,媒体对此进行报道,网络上也掀起了一篇《 Cell 》论文值不值 1 350 万的讨论。诚然,中国会给在顶级期刊发表文章的科学家一定的奖励,相信大家早已习以为常。然而,Science《新闻》在此前的报道显示,奖励顶级期刊发文的科研工作者不是中国的专利,其实很多国家或地区都会有相似的激励政策。图 1 Science《新 ...

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大龄生物女博士的求职攻略

「二十一世纪是生物的世纪」,应该很多人都是被这句话骗进了生物这个巨坑。生物作为一个劳动密集型行业,注定了是需要大批生物民工来干活的,而当大批生物学子们到了毕业求职之际,发现寻找一份合适的工作成为一个困难的事情。所以才有人说在任何一行都能见到学生物专业的学生,这在某种程度上也算是符合了那句「二十一世纪是生物的世纪」。作为一个国内生物土博,本科学校非 985、211,研究方向偏基础,而且是女的,手头上也没有几篇重量级大文 ...

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实验时间|大肠杆菌转化实验

大肠杆菌转化实验有热击法、CaCI2 转化法、一步法、高效率电转化法,今天主要来讲下热击法。1 原理质粒 DNA 或重组 DNA 粘附在细菌细胞表面,经过 42°C 短时间的热击处理,促进吸收 DNA. 然后在非选择培养基中培养一代,待质粒上所带的抗菌素基因表达,就可以在含抗菌素的培养基中生长。2 实验步骤☞ 实验材料准备1. 器材旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,1.5 ml 微量离心管,双面微量离心管架,干式恒温气浴(或恒温水浴锅),制冰机,恒温摇床,培养皿(已铺好固体 LB ...

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谁给女博士的就业挖了坑?

此前,有关女博士就业的问题在科学网上引起了热议,细品各方评论,总结起来就是女性就业存在某种程度的性别歧视,部分人士觉得不公,部分人士认为合理而已。图 1 科学网上对女博士就业问题的热烈讨论诚然,相比于男博士,女博士在就业过程中会更加经常地受到不公正的待遇。同样的论文水平、同样的学习经历,用人单位有较大可能会优先留下男生,缘何如此?原因一般有如下两条。1 生育歧视图 2 女博士在求职过程中的生育歧视用人单位常常会将女性的婚育情况作为 ...

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临床医生论文中最常犯的 5 个统计学错误

编者按:临床医生并非科研出身,论文上经常会出现多多少少的「小问题」。丁丁班主任今天带来一篇大盘点,指出临床医生论文中出现的常见错误。1 忽略了样本纳入量的计算和说明对于一个研究而言,一般而言先要计算样本纳入量,否则做出来的研究极有可能没意义。笔者曾经接到过一位麻醉学博士的求助电话,叙述他在预答辩环节,被问「为什么你的研究 A、B 两组选择这么多例老鼠」时,他答不上来的焦虑。而当这个问题被临床流行病学方面的专家问到时,基本上文章 ...

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最全的 MTT 实验经验大汇总

做 MTT 走了不少弯路,后来看了很多的资料,再做的时候结果好了很多。因此特别将有用的内容整理出来,分享给大家。可以点击阅读原文查看完整版。实验前应明确的问题1. 选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96 孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有 100000 个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定实验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样, ...

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EndNote 标注不这么做,导师修改时怕是要气哭

辛辛苦苦完成的论文,自己认为「不能增减一字」后,让导师修改。论文中必然带有文献标注,最常见的是 EndNote。不过导师电脑上没有你的 EndNote 库,那么他在修改时,只要有文献位置发生变化,EndNote 就会出现各种错误提示,会使你的导师修改兴致大减,或者直接把你的 EndNote 论文标注给删了,自己加个括号,叫你以后自己添加。如果你的文献数量在 30 篇以上,论文又有大改动,估计你会校对得发疯。What?你想叫导师在他的电脑上也装上你的 ...

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震惊:原来诺贝尔生理学或医学奖的幕后推手是他们……

众所周知,2017 年诺贝尔生理学或医学奖授予了杰弗理・霍尔(Jeffrey C. Hall)、迈克尔・罗斯巴殊(Michael Rosbash)和迈克尔・杨(Michael W. Young),以表彰他们发现了控制昼夜节律的分子机制。俗话说,默默做出贡献的「生物」有很多,但是,站上诺贝尔生理或医学奖领奖台的,终究只有三个「高等生物」而已。成功男人背后总是站着一位默默支持他的女人,而获得诺奖的学界大佬背后却飞舞着一群聒噪的果蝇~可能是完整的,哦,也 ...

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看到这个神插图,我笑了

一篇好的论文通常少不了「优质」的图片。一张好的图片胜过千言万语。当然如果图片是在摘要的位置,图片的选取则更加关键。研究生阶段相信大家的文献阅读量都是相当巨大的。但是总有一些文章剑走偏锋,不按套路出牌。当然,这种文章的插图也是着实精彩,给人眼前一亮的感觉。举个例子:有些论文的摘要图片很像海报,类似上图(类似论文插图可查看 The global rise ofzero liquid discharge for wastewater management: ...

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养猫还是养狗?听听 Nature 怎么说

今天和妹妹去逛街,路过宠物店突发奇想要买一只小金毛,然而妹妹好像更喜欢角落里那只小猫呢?So,养猫还是养狗,这是个问题。他们说,养猫和养狗的区别是自我认知的区别小祖宗和小棉袄的区别(图 2)它催着你出门和你求着它出门的区别言归正传,想必大家更关心的是:养猫还是养狗更利于家人健康吧!养猫的人对刚地弓形虫一定不陌生。哪里有猫它就待在哪里,当然待在人类身上也可以。孕妇要是被它缠住,肚子里的宝宝可就遭殃了,同时它也是导致感染 ...

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组会要汇报?这款神器帮你做出高逼格的 PPT

初学者做 PPT 汇报是不是经常被嫌弃,一定会有老师说你文字太多,怎么没有图片,又或者说你图片不清晰。做 PPT 的时候除了使用 QQ 截屏还能用啥?如果需要演示某些数据库的使用或者软件如 DNAMAN、Origin 等软件怎么录制视频?QQ 截图、Print Screen SysRq 或者浏览器所带的截图功能均只能截取当前窗口,功能完全跟不上节奏。接下来要给大家介绍一款体积小巧但功能强悍的截屏录屏工具 faststone capture 软件。它只是一款截图软件吗? ...

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这些医学牛作都不知道?你可能搞了个伪科研

2017 年各大期刊影响因子更新,四大医学期刊均再创新高,NEMJ-New England Journal of Medicine 继续领跑,达到 72.406。The Lancet 位居第二,达到 47.831。JAMA-Journal of the American Medical Association 紧随其后,为 44.405。BMJ-British Medical Journal 稳步提升至 20.785。四大医刊对于很多学者来说是可望不可及,发表一篇基本就走遍天涯都不怕了。接下来我们 ...

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当科研汪遇上喵式爱情......

先不聊科研,我们来分享一段追女生的经历。严肃脸!这是个凄美的爱情故事!有一天,某男生喜欢上了一个爱猫的女生。该男生发现这个女生经常会在宿舍的花园里喂猫,但是粗心的女生经常会忘记带猫粮。所以,这个男生便决定在花园的草坪里留下猫粮,方便女生喂猫。由于男生是个穷小子,所以他每天都通过抛硬币决定是否留下猫粮。粗心的女生发现花园里不定期会出现猫粮,但是不知道何时会出现,心里产生了莫大的好奇。终于,女生按捺不住好奇心,在花园埋 ...

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如何分析免疫组化图片?

一张完美的免疫组化的片子,该如何分析?最传统的办法,简单定义阳性组,阴性组,但假如只是这样,显然不是我今天所介绍的重点,向大家推荐一个软件:Image pro-Plus(IPP)。图像分析前要准备的东西1. 能拍照的显微镜:这个当然需要实验室的支持,一般拍照的软件也会配套有,无需自己准备。2. IPP 的安装软件,下面我将介绍安装,文末我也会提供破解版的软件链接安装好后进入如下界面。选择 Complete 点 OK。进入软件后的界面。File – open ...

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搞科研不可错过的大事件有哪些?

有人质疑小编,你们作为一个专业的科研公众号,为什么没有紧跟热点?开玩笑,紧跟热点算什么,我们学霸君从来都是走在热点的最前面。学霸君为大家细心统计了每年生物医学领域的一些比较重要的奖项和事件的节点,希望大家多申项目、多拿基金、多发论文、多领大奖(更希望大家在撩妹和撩汉的时候,可以增加尬聊的谈资,毕竟科研党中单身狗太多了~这种事情我会说?)哈哈哈哈哈,走过路过不要错过!科研党人手一本学霸日历,还怕实验太认真,忘了关键时间 ...

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实验 Q&A:如何用慢病毒转染构建稳转细胞系

这里说的稳转细胞系的构建是指慢病毒转染构建的稳转细胞系,可以构建表达细胞系,也能构建敲降细胞系,经常有人问我什么叫稳转和顺转的区别。瞬转细胞系,一般情况下能够稳定表达最多长一周左右,而稳转细胞系,只要构建成功就能稳定表达,没有时间限制,但是也不是肯定的,一般实验构建的细胞系超过 10 代以后,这个细胞系就有可能不靠谱了。接下来,咱们讲讲稳转细胞系的构建。一般来讲 shRNA 用的是 HIV 病毒,虽然已经经过处理,但是一听这名字也觉得渗 ...

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搞科研的你是否也曾是一枚小鲜肉?

什么称得上实验室的小鲜肉,是这些颜值高又有料、满脸几乎能能掐得出胶原蛋白、新鲜出炉的师弟师妹吗?(✧◡✧)想想都觉得小激动呢,但是,呵呵,你想多了,大家好,给大家介绍一下,这是我们实验室的一群小鲜肉 @ 什么都不会、做实验蹑手蹑脚、还老向师兄师姐问怎么办的一群愣头青!!!小鲜肉的日常就是提问师兄师姐、求助师兄师姐、气死师姐师姐,别无其他,你看:这群小鲜肉非但没有激起我的少女心,反而把我整得像个灭绝师太,每天都是像吃了火药,被气得要炸 ...

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如何用 EndNote 轻松搞定杂志要求的文献格式?

EndNote 软件是使用频率比较高的文献管理软件,它可以帮助科研达人节省不少时间;当我们写的文章投稿进入返修时,各位高深的编辑就会要求按照他们杂志社出版要求进行格式修改,对于引用文献的格式修改有时难免头大。如何快速高效的用 EndNote 把格式改好?下面让我们来实际操作一遍。01 选择格式首先,你要知道你修改的引文格式是怎样的。根据所要求的格式,在 EndNote 软件中找出最接近的引文格式。先打开 Endnote 软件进行编辑;点击 Ed ...

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写给细胞小白的实用手册

转眼间这学期已经快过去一半了,该是时候进入实验室学习实验技能,初来乍到的你会不会因为「笨手笨脚」被师兄师姐嫌弃呢。不要担心,本文为各位细胞小白带来细胞实验步骤和细节讲解,希望你看过之后能对细胞实验有个清晰的了解,只要你足够的细心,看完之后完全有能力自己独立操作哦……基本准备工作灭菌、消毒1. 无菌室和操作区消毒实验前用 70% 乙醇擦净洁净台,再将实验器材放入超净工作台,打开紫外线灭菌灯,40 分钟后消毒完毕,关闭紫外线灯,打开吹风 ...

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