【求助】为什么我构建转录因子载体只在胞质中表达？
丁香园论坛
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我构建了一个转录因子表达载体，用了pcDNA3.1(+)基础载体，转染进入293T后免疫荧光检测，发现只在胞质中有表达，不知道为什么，请达人指点！谢谢了
pcDNA3.1(+)上没有任何标签，你的荧光是什么荧光呢？GFP？如何连接上去的？
如果是融合表达很多时候会有GFP的单体泄露表达，而GFP单体大部分就位于胞浆中。所以不如用WB检测一下你的蛋白是否有表达，表达状态如何，最好能用GFP抗体检测一下。
如果是融合表达很多时候会有GFP的单体泄露表达，而GFP单体大部分就位于胞浆中。所以不如用WB检测一下你的蛋白是否有表达，表达状态如何，最好能用GFP抗体检测一下。
一抗目的蛋白，二抗是GFP
你是瞬转的吗？你的转录因子应该有NLS，一般瞬转的大部分在细胞质中，NLS也是一少部分能进入核内。你做confocal吧。
是瞬转的，confocal显示几乎全部在胞质表达
你可以提取细胞核蛋白质，用WB鉴定之。
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