银染
互联网
12715
一、材料与试剂
1. 99.5%乙醇
2. 100%乙酸
3. 亚硫酸氢钠
4. 硝酸银
5. 甲醛溶液（37%）
6. 碳酸钠
7. 硫代硫酸钠
8. EDTA
二、配方
1. 固定液：30%乙醇1：10%乙酸（160 ml：50 ml：290 ml H2O）。
2. 30%乙醇。
3. 感光液：硫代硫酸钠25 mg/100 ml（通常现用现配）。
4. 染色液：0.2%AgNO3（需20%AgNO3母液400 ul/40 ml）。（注意，染色液是很强的氧化剂）+3 ul/40 ml甲醛溶液（36-38%，必须现用现配）。
5. 显影液：6%碳酸钠（3 g/50 ml），4 ug/ml 硫代硫酸钠（Na2S2O3，需4 mg/ml 母液50 ul，在冰箱中可保存几周）+甲醛溶液25 ul/50 ml，必须现用现配。
溶液中不要加入过多的甲醛，否则会产生过深的背景。使用新配的硫代硫酸钠溶液（4 mg/ml），可以得到更好的结果。
三、仪器设备
1. 摇床
四、实验步骤
1. 将胶在固定液中孵育过夜，或在摇床上慢摇2小时。
2. 在摇床上用30%乙醇洗涤胶，3×10 min。
3. 用纯水洗涤胶，2×10 min。
4. 将胶孵育在感光液中1分钟。
5. 用纯水洗涤胶，2×1 min。
6. 将胶孵育在染色液中25分钟。
7. 用纯水洗涤胶1 min。
8. 将胶在显影液中，摇床轻晃2~3分钟。
9. 在有条带出现后，加入终止液。
