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        银染法

        相关实验:蛋白质染色实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1.  将聚丙烯酰胺凝胶放在塑料容器并以5倍体积的固定液覆盖,在旋转摇床中缓慢摇动30 min 以上。
         
        2.  倾去固定液,加5倍凝胶体积的脱色液,缓慢摇动60 min 以上。
         
        3.  倾去脱色液,加5倍凝胶体积的10%戊二醛,在通风橱中缓慢摇动30 min。
         
        4.  倾去戊二醛溶液,用水洗凝胶4次以上,每次30 min 以上,最后一次洗涤以过夜为佳。缓慢摇动。
         
        5.  倾去水,将凝胶置于约5倍凝胶体积的硝酸银溶液中平衡(完全盖没凝胶),剧烈振荡 15 min。
         
        6.  将凝胶移至另一塑料盒,用去离子水洗5次,每次精确5 min,缓慢摇动。

        7.  用500 ml 水稀释25 ml 显影液,将凝胶移至另一塑料盒,加入足够的稀释显影液盖没凝胶,并剧烈摇动至条带达到需要的强度。如果显影液变成棕色,须换新鲜的显影液。
         
        8.  换快速定影液,定影5 min,必要时,用湿润了的棉花擦去凝胶表面沉积的残余银沉积物。顿去定影液,用水彻底冲洗凝胶。

        9.  凝胶拍照,干胶或在可密封的塑料袋中保存。

        注意事项

        1.  带手套并仅在通风橱中进行。

        2.  由于氨银溶液干燥后会发生爆炸,应马上用大量水冲去。

        来源:丁香实验

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