PCR-SSO扩增DNA固定于尼龙膜上
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PCR-SSO 扩增DNA固定于尼龙膜上
【试剂和材料 】
(1)上述DNA扩增产物
(2)尼龙膜
(3)变性液:0.4 M NaOH, 25 mM EDTA
(4)中和液:20 X SSC:3 M NaCl, 0.3 M 柠檬酸钠
【操作步骤】
(1) 取大小适当的尼龙膜,注意正反面,在点样面做好标记,以区分不同的样本。通常PCR-SSO分型需要多张尼龙膜,而每张尼龙膜上可以点多个样本的扩增DNA;
(2) 将2ulPCR产物用加样器点在尼龙膜相应的位置,室温干燥;
(3) 用变性液变性10分钟;
(4) 用中和液中和10分钟;
(5) 在紫外灯下照射10分钟,使DNA共价连接于尼龙膜上,室温干燥。