PCR-SSO洗膜
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PCR-SSO 洗膜
【仪器和试剂 】
（1） 洗膜液I：2XSSPE，0.5%SDS。
（2） 洗膜液II： 0.1XSSPE，0.5%SDS。
（3） 恒温水浴摇床（80rpm，有盖，温度可调至65℃）
（4） 精确温度计（精度为±0.1℃）
（5） 放射检测仪
【操作步骤 】
（1） 杂交完成后，取出尼龙膜，并放入装有洗膜液I的容器中，室温洗涤5分钟；
（2） 将尼龙膜转入另一装有新鲜洗膜液I的容器中，继续室温洗涤15分钟；
（3） 将尼龙膜转入另一装有洗膜液II的容器中，37℃洗涤30分钟；
（4） 将洗涤液换为新鲜配制的洗膜液II，根据SSO探针的Tm值决定洗涤温度，通常在51℃～60℃之间，洗涤10分钟左右。用放射检测仪监测洗膜的过程，并调整洗涤的时间
【注意事项 】
（1） 洗膜条件对于SSO分型结果的判断十分重要，不同的探针洗涤条件差异较大，影响因素包括洗涤液的离子强度、洗涤温度、摇动速度等，通常需要反复摸索才能掌握。
（2） 放射性物质的操作应严格遵守有关规定和采取适当的防护措施。
