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        DNA扩增的时候,PCR条带拖尾?

        相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

        user-title

        嘎萌gm

        做DNA片段扩增,三个不同的片段,其他两个跑出来的条带很正常,但是最后一个拖尾了?

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        5 个回答

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        原因往往由于酶的量过大或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多引起。其对策有:①减少酶的量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2+浓 度。④增加模板量,减少循环次数。

        user-title

        dxywode

        有帮助

        拖尾在生物专业词汇叫做smear。造成此的原因有多种。一般来讲,有以下几点:
        1,引物设计不佳,造成了拖尾现象。
        2,PCR中DNA浓度加的太多,造成了拖尾。
        3,mg2+浓度加的太高,造成了拖尾。
        4,跑胶电压不合适,造成了拖尾。
        5,退火温度不合适,造成了拖尾。
        这些都可能造成拖尾,请认真分析之。谢谢。

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        模板提纯,Buffer配比不合适,退火温度高一点.循环次数不要太多

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        可能是上样量太多了或者是这个样品的引物有问题

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        可能你的产物不特异,所以出现了拖尾

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