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        【求助】促进自噬和抑制自噬均导致细胞死亡,怎么解释?

        丁香园论坛

        4132
        我的药物本来是可以促进细胞凋亡的,后来想研究一下自噬和药物促进凋亡之间的关系。所以分别用自噬抑制剂3MA和促进剂Rapamycin与药物共同作用细胞。结果发现,无论是促进自噬还是抑制自噬,均导致细胞的死亡率比原来药物单独作用还要高,这应该怎么解释呢?
        为什么促进自噬和抑制自噬均增加了细胞的死亡?

        组别 存活率
        (1)正常细胞 100%
        (2)药物处理 57%
        (3)药物+3MA 36%
        (4)药物+Rapamycin 38%
        没人知道吗
        抑制自噬,启动了其他凋亡通路,促进了细胞的死亡。
        促进自噬,自是作为一种死亡方式,增加了细胞的死亡
        在下结论之前,首先应该证明一下在你的实验体系中,加入3MA后自噬是不是真的减少了,同样rapa 是否真的刺激了自噬。比较方便的办法就是用MDA染色上一下流式;

        另外,存活率也不是凋亡比率,应该定量凋亡比率;

        还有最重要的,药物和抑制剂联用以后,有可能产生更复杂的作用,抑制剂的选择性还得具体问题具体分析。
        请问楼主检测细胞死亡率的指标是什么?
        请问楼主你的实验具体操作,比如凋亡率是如何观察计算的能否告诉我一下呢?谢谢
        有一种可能就是,该药物引起的凋亡在晚期与autophagy 无关,

        但至少在早期或中期,可以检查 time course,LC3 的cleavage, compared with the controls. 荧光也可。

        我们也在做autophagy,不过不做药物,做通路。
        欢迎交流。
        这也是研究的热点呀
        本人也在研究自噬,对于激动和抑制自噬都会均会增加细胞死亡率的问题我也遇到了!这种情况与给药前还是给药后激动或者抑制自噬有关系!
        自噬本来就是双刃剑,自噬促进剂和抑制剂对于具体肿瘤中具体的治疗药物要具体对待,促进剂促进自噬,细胞死亡,抑制剂抑制自噬,导致肿瘤细胞无法利用自身物质来度过应激,同时肿瘤细胞无法利用自噬来清除抗癌药造成的细胞毒反应,导致死亡。
        syd123zmm wrote:
        本人也在研究自噬,对于激动和抑制自噬都会均会增加细胞死亡率的问题我也遇到了!这种情况与给药前还是给药后激动或者抑制自噬有关系!
        给药先后对于自噬抑制或促进有什么区别吗?
        透射电镜观察细胞自噬, 扣扣 2441149844

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

        【求助】促进自噬和抑制自噬均导致细胞死亡,怎么解释?

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