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        【求助】自噬抑制剂3MA该如何溶解?

        丁香园论坛

        8647
        小弟购买的是SIGMA的3MA,50mg/瓶,拟配制工作液浓度1.5mg/ml, 不知道该3MA的母液该如何配制?用什么溶解?该如何保存?请高手指点!万分感谢!!
        This product is soluble in DMF (10 mg/ml, may require gentle heating), yielding a clear, colorless solution. It is also soluble in water, 95% ethanol, or 1 N NaOH at 30 mg/ml with heating, but upon cooling, the product precipitates from solution. Solutions of 3-MA are best prepared fresh.
        chp_cn wrote:
        This product is soluble in DMF (10 mg/ml, may require gentle heating), yielding a clear, colorless solution. It is also soluble in water, 95% ethanol, or 1 N NaOH at 30 mg/ml with heating, but upon cooling, the product precipitates from solution. Solutions of 3-MA are best prepared fresh.

        非常感谢,这个看到过。查文献中有用PBS溶解的,觉得用PBS更方便一些,不知有没有试过的同道?用PBS溶解后,又该如何保存母液呢?期待回答,谢谢!!!
        用水溶解,贮存浓度200mM,加热到100度后溶解,冻存于-20度,使用时需加热溶解。
        swhxljq wrote:
        用水溶解,贮存浓度200mM,加热到100度后溶解,冻存于-20度,使用时需加热溶解。

        非常感谢!!还有一个问题,加热及多次冻融会不会影响3-MA的药效?还请高手赐教!
        没人知道?
        不会影响
        3-MA可以用来注入关节腔抑制软骨细胞发生自噬吗?谢谢大侠指点
        pbs就能溶解,非常好溶解
        非常好溶吗?我是用DMEM溶的,挺难溶的,50度加热10分钟促溶
        请问哪里能买得到3ma啊?小弟用来做大鼠自噬的,谁能告诉我具体用法用量,谢谢各位大侠!
        xiaomengjing001 wrote:
        请问哪里能买得到3ma啊?小弟用来做大鼠自噬的,谁能告诉我具体用法用量,谢谢各位大侠!
        sigma
        好贵的,你上官网查一下就知道了。
        wangkai0418 wrote:
        非常好溶吗?我是用DMEM溶的,挺难溶的,50度加热10分钟促溶
        用PBS可以溶解,但是放到负4度冰箱,容易产生沉淀,白色的絮状沉淀,显微镜下很好看。用的时候还要孵育才能溶解。
        3-MA大概是多少温度可以溶解
        guodanni wrote:
        sigma
        好贵的,你上官网查一下就知道了。
        谢谢你!我已经查到了,sigma的1500元左右100mg,已经发货了,到时候说明书上应该就有具体用法用量!
        wangkai0418 wrote:
        3-MA大概是多少温度可以溶解
        用PBS,50℃水浴;母液配好后放4℃冰箱保存,会析出白色沉淀,50℃水浴5分钟左右即可再次完全溶解,水浴过程中震荡会加速该溶解过程,最终呈无色透明溶液,可进一步稀释成各色工作液。

         

        楼上 您好!向您请教个问题,我用的sigma的3-MA,看文献说在抑制自噬过程中要先预处理,比如说六小时,然后才转染你的目的基因,有一点不明白的是:3-MA预处理后是不是还存在于培养液中和目的质粒一起在转染的过程中存在?还是3-MA就在预处理的过程中出现呢?盼回复 谢谢了
        请教高手:我的3-MA是按说明用DMF溶解的,大家都知道DMF是有毒性的,算出来对照组里面需要加150UL/ML 的DMF,请问这个量对细胞毒性大吗?
        请问各路大侠,3-MA用PBS配制的话,母液浓度是多少
        这样处理后,用着还好么?
        附件里面这个是SIGMA公司的3-MA的说明书。。。
        3-MA was dissolved in normal saline by heating solution to 60–70°C immediately before treatment(2012,Autophagy ,8(3), 1–16)
        水溶解后是否需要过滤除菌
        xiaomengjing001 wrote:
        请问哪里能买得到3ma啊?小弟用来做大鼠自噬的,谁能告诉我具体用法用量,谢谢各位大侠!
        你做完了 能告诉我具体方法吗
        最好就是直接陪在要用的培养基,这样影响最小了。反复冻融还是有影响的,要是尽量分装小体积,5次内用完。
        透射电镜观察细胞自噬, 交流扣扣 2441149844

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