自噬通量检测使用自噬抑制剂，是持续干预还是检测前干预？

阿卓咩咩

2023-04-21

我想使用Baf或者CQ阻断晚期自噬以后检测LC3II。但是有的文献体内给小鼠每日腹腔注射baf至取材，有的是处死前30min注射；而体外实验里有的是共培养72h，有的是检测前干预1小时。请问干预的时间该如何选择？

4 个回答

loveliufudan

2023-04-22

有帮助

对于体内实验，由于Baf和CQ都具有毒性，因此应尽可能缩短给药时间，以避免不必要的副作用。一些文献报道将Baf或CQ腹腔注射于小鼠体内，并在处死前30分钟进行检测。这种方法可以提高细胞内药物浓度并减少不必要的细胞死亡。但是，如果您的实验需要更长的时间来观察效应，可以根据您的具体实验条件和药物的性质选择合适的时间。

对于体外实验，建议在细胞培养期间添加Baf或CQ，并允许药物与细胞进行足够的交互时间。这通常需要根据您的细胞类型和药物的性质进行优化。一般而言，72小时的培养期应该足够观察到细胞自噬的效应。至于干预时间的选择，也应该根据您的实验需要进行优化。如果您需要检测药物的即时效应，建议在添加药物1小时后进行检测。如果您需要检测长期的效应，建议在培养72小时后进行检测。