• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        细胞培养-冷冻细胞活化

        互联网

        2461
        1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻,以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害,导致细胞之死亡。
        2. 细胞活化后,约需数日,或继代一至二代,其细胞生长或特性表现才会恢复正常 ( 例如产生单株抗体或是其它蛋白质 )
        3. 材料
        3.1 37 oC 恒温水槽
        3.2 新鲜培养基
        3.3 无菌吸管 / 离心管 / 培养瓶
        3.4 液氮或干冰容器
        4. 步骤:
        4.1 操作人员应戴防护面罩及手套,防止冷冻管可能爆裂之伤害。
        4.2 自液氮或干冰容器中取出冷冻管,检查盖子是否旋紧,由于热胀冷缩过程,此时盖子易松掉。
        4.3 将新鲜培养基置于 37 °C 水槽中回温,回温后喷以 70 % 酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。
        4.4 取出冷冻管,立即放入 37 °C 水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在 1 分钟内全部融化,以 70 % ethanol 擦拭保存管外部,移入无菌操作台内。
        4.5 取出 0.9 ml 解冻之细胞悬浮液,缓缓加入有培养基之培养容器内 ( 稀释比例为 1:10 1:15) ,混合均匀,放入 CO2 培养箱培养。另取 0.1 ml 解冻细胞悬浮液作存活测试。
        4.6 解冻后是否立即去除冷冻保护剂 ( 例如 DMSO glycerol) ,依细胞种类而异,一般而言,大都不需要立即去除冷冻保护剂。惟若要立即去除,则将解冻之细胞悬浮液加入含有 5-10 ml 培养基之离心管内,离心 1,000 rpm, 5 分钟,移去上清液,加入新鲜培养基,混合均匀,放入 CO2 培养箱培养。
        4.7 若不需立即去除冷冻保存剂,则在解冻培养后隔日更换培养基。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序