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        卵母细胞冷冻保存技术快速冷冻法

        相关实验:卵母细胞冷冻保存技术

        最新修订时间:

        简介

        卵母细胞冷冻保存技术快速冷冻法,是卵母细胞冷冻保存技术慢速冷冻法的改进。

        材料与仪器

        器材:

        0.25 mL 细管、冷冻仪、液氮罐。

        试剂:

        ① 甘油 ;
        ② PBS ;
        ③ PBSS(含 20% NCS 的 PBS)。

        步骤

        卵母细胞冷冻保存技术快速冷冻法的基本过程可分为如下几步:

        A. 冷冻保护剂平衡处理卵母细胞后开始以 1 ℃/min 的速度降温;

        B. - 5~- 7 ℃ 植冰;

        C. 以 0.1~1.0 ℃/min 的速度降温到 - 80 ℃ 或 - 30~- 40 ℃,投入液氮。

        注意事项

        降温到 - 30~- 40 ℃ 时投入液氮在牛、人和小鼠的卵母细胞应用较多、效果较好。而降温至 - 80 ℃ 投入液氮的报道很少、效果也不理想,现已基本不用。

        解冻一般在室温或 37 ℃ 进行。

        来源:丁香实验

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