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        四膜虫的冷冻

        相关实验:四膜虫的保存实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1. 在培养基中将细胞培养至对数生长中期。如需要,可使用抗生素和/或杀真菌剂。

        2. 在 pH 7.4 的 10 mmol/L Tris 中低速离心轻洗细胞 1 次,弃上清,低速离心重悬细胞,弃上清。

        3. 用 10 mmol/L Tris 重悬细胞至初始体积。

        4. 30℃ 孵育细胞 3 天,不振摇,使细胞饥饿。

        5. 低速离心浓缩细胞,弃上清,获得细胞浓度约 4X106 细胞/ml。

        6. 在 3 ml 高质量的 13.3% DMSO 中重悬 2 ml 细胞。

        7. 少量体积分装入 2 ml 的冷冻管中。

        8. -70℃ 或 -80℃ 贮存 24 小时。

        来源:丁香实验

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