DNA含量测定

相关专题 (辽宁省刑事科学技术研究所　沈阳　110032)摘　要　DNA 多态性分析技术是当前法医生物物证鉴定中最主要的技术手段并由此诞生法医分子遗传学这一新生学科。本文对法医DNA 多态性分析技术的诞生、技术种类、科研进展、重大应用进行综述报道。关键词　DNA 多态性分析　法庭科学　进展与应用1 　法医DNA 分析技术的诞生和发展DNA 是 ...

相关专题 一．实验目的及背景在生物技术实验中，PCR反应获得的目的片段，酶切后所得特定的DNA序列， 分子杂交中所制备的探针等，经过琼脂糖凝胶电泳后，目的片段与其它DNA分开， 这就需要有一套方法将目的DNA从凝胶中分离出来，通过处理后得到纯化的目的DNA， 以用于以后分子杂交，重组子构建，序列分析等.从凝胶中分离回收DNA的方法现在常用的技 ...

相关专题 实验目的 从上个实验中转化成功的军中提取出已经到克隆的质粒，为下一步双酶切做好准备。我们重点是要保证治理的序列、产率和纯度，去除Dnase、机械、物理、化学因素的影响。并且学习和掌握碱裂解法提取质粒的基本原理和实验技术方法。实验原理及过程 实验步骤 实验原理 1将含pETBlue－2的单菌落接入3mL LBAmp+液体培养基 ...

相关专题 实验目的 从新鲜的小鼠肝脏中提取基因组DNA，为southern杂交或DNA文库的构建做好准备。我们重点是要保证DNA的序列、产率和纯度，去除Dnase、机械剪切（对于如此之大的基因组，防止机械剪切是很重要的）、物理、化学因素的影响。实验原理及过程实验步骤实验原理1将饥饿一天的小鼠用脊髓脱臼法处死。饥饿一天是为了减少肝中的糖原， ...

相关专题 回收率低或为零 1. 漂洗缓冲液中没加入乙醇.在使用前应确保乙醇已加入漂洗液PW中。 2. 吸附材料上有乙醇残留.洗脱时硅胶膜或硅胶树脂上有漂洗缓冲液残留，因含乙醇会降低洗脱效率。在洗脱前可通过再次离心或置于50℃烤箱中5-10分钟，彻底去除漂洗缓冲液。 3. 洗脱缓冲液pH值偏低.DNA只在低盐bu ...

相关专题 一、实验目的 掌握植物总DNA的抽提方法和基本原理。学习根据不同的植物和实验要求设计和改良植物总DNA抽提方法。 二、实验原理 通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞，由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响，在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨 ...

相关专题 5.1实验原理 5.1.1聚合酶链式反应（PCR）的基本构成 PCR指在引物指导下由酶催化的对特定模板（克隆或基因组DNA）的扩增反应，是模拟体内DNA复制过程，在体外特异性扩增DNA片段的一种技术，在分子生物学中有广泛的应用，包括用于DNA作图、DNA测序、分子系统遗传学等。 PCR基本原理是以单链DNA为模板，4种dNTP为底物 ...

相关专题 6.1实验原理 DNA片段的分离与回收是基因工程操作中一项重要的技术，如可收集特定酶切片段用于基因克隆或是制备探针，回收PCR产物用于再次鉴定等。理想的DNA片段回收方法应满足以下几个要求： （1）回收片段应有非常高的纯度 如从普通凝胶中分离出来的片段不可带有即使是微量的凝胶――凝胶会抑制大部分的酶活力，对于后续DNA片段用于再酶切 ...

相关专题 4.1 实验原理 4.1.1 DNA的连接策略 质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段(＜10kb)且结构简单，质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆，从原理上说是很简单的，先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段，然后体外使两者相连接，再用所得到重组质粒转化细菌，即可完成。 外源DNA片段和质 ...

相关专题 1. 操作步骤: 取鲜猪脾去脂、血称取10g用预冷的1×SSC溶液洗2次，剪碎。 按睥：1×SSC=1; 5W/V 加入50ml预冷的1×SSC，用高速组织捣碎机破碎8次每次5秒中间间隔30秒。 将匀浆液放在烧杯中， 于冰盐浴中冷却30分钟。4000转/分钟离心10分钟。充掉上清。沉淀物 ...

相关专题 一．实验目的：学习并了解叶盘法转基因烟草的技术流程。二. 实验原理：土壤中的农杆菌是一种革兰氏阴性菌，能够感染植物的受伤部位。农杆菌中有一种环形的Ti质粒，Ti质粒最重要的两个区域为T-DNA区和毒性区，T-DNA是Ti质粒上唯一能够整合到植物染色体上的序列，而毒性区上一系列则帮助T-DNA区整合到植物的染色体上。土壤农杆菌转化植物 ...

相关专题 【原理】 在构建重组DNA分子时，为了提高重组效率，载体DNA的酶切片段，特别是两种酶切的载体DNA片段、目的基因酶切的DNA片段等，都需要在酶切后进一步分离、纯化与回收。另外在检测重组DNA的分子杂交技术中，要制备DNA探针，也往往涉及要先分离回收DNA片段。 【操作】 1.酶切之后进行琼脂糖凝胶电泳泳毕后在紫外灯下检查目的片段 ...

相关专题 多聚集链反应（polymerase chain reactionPCR）技术发明至今已近20年了，在这期间技术得到了不断的发展，近年来出现的实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR）技术实现了PCR从定性到定量的飞跃，它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为了分子生物 ...

相关专题 一、目的掌握DNA 体外重组技术中限制性核酸内切酶的酶切与连接方法。了解酶解反应与连接反应的条件及原理。二、原理（一）酶切反应原理1.核酸限制性内切酶能够专一识别DNA双链上某碱基顺序，如EcoRI酶的识别顺序为：若用EcoRI 酶切只有一个切点的环状双链DNA 分子，就能产生两个带有AATT 碱基顺序的粘性末端的线状DNA分子：若 ...

相关专题 一．实验目的通过本实验的学习，了解和掌握植物转基因技术的原理和方法，以及转基因植物的筛选和鉴定的基本过程。二．实验原理植物转基因技术(plant trasgenetic technology)是指把从动物、植物或微生物中分离到的目的基因，通过各种方法转移到植物基因组中，使之稳定遗传并赋予植物新的性状，如抗虫、抗病、抗逆、高产、优质等 ...

相关专题 【实验原理】 琼脂糖凝胶电泳与醋酸纤维素薄膜电泳原理基本相同，但兼有分子筛效应，从而使不同分子量大小的DNA片段分离。琼脂糖是从琼脂中提取出来的含有较多的酸根和羟基多糖。回收DNA的方法很多，主要包括DEAE纤维素纸插片电泳法、透析袋电泳洗脱法、槽沟电泳洗脱法、v形槽电泳洗脱法以及低熔点琼脂糖凝胶挖块回收法。本实验采用琼脂糖凝胶DN ...

相关专题 【基本原理】 利用DNA连接酶把目的DNA片段和载体DNA连接在一起，成为一个新的重组分子。目的DNA片段被限制酶消化后其末端只可能有3种形式： （1）带有相同的粘性末端：用同一种酶或同尾酶处理可得这样的末端。由于质粒载体也必须用同样的酶消化，亦得两个相同的粘性末端，因此在连接反应中，外源目的基因片段和质粒载体DNA均可能发生自身环 ...

相关专题 实验原理质粒（Plasmid）是一种双链的共价闭环状的DNA分子，它是染色体外能够稳定遗传的因子。质粒具有复制和控制机构，能够在细胞质中独立自主的进行自身复制，并使子代细胞保持它们恒定的拷贝数。目前，质粒已广泛的用作基因工程中目的基因地运载工具—载体。从大肠杆菌中提取质粒DNA，是一种分子生物学最基本的方法。质粒DNA分离纯化方法有 ...

相关专题 自1985年英国遗传学家Alec Jeffreys建立DNA指纹技术以来，经过近20年的发展，法医DNA分析先后已建立了DNA指纹技术，PCR扩增片段长度多态性分析技术、线粒体DNA测序和DNA蕊片等主要技术，结合其它一些新的技术方法，如MVR-PCR，PCR-SSO，SSP-PCR、DHLPC、TOMEF等，共同形成了现代法医DN ...

相关专题 PCR扩增反应完成之后，必须通过严格的鉴定，才能确定是否真正得到了准确可靠的预期特定扩增产物。凝胶电泳是检测PCR产物常用和最简便的方法，能判断产物的大小，有助于产物的鉴定。凝胶电泳常用的有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳，前者主要用于DNA片段大于100bp者，后者主要用来检测小片段DNA。 1．琼脂糖凝胶电泳 这是实验室最常用 ...