细胞分离纯化

Ficoll：一种已灭菌的，特定密度的密度梯度离心介质。被广泛用作从外周血、骨髓及脐带血中分离高活性的单个核细胞。Ficoll-Paque溶液包含：Ficoll PM400：由高分子量蔗糖（Mr 400K）聚合物与表氯醇聚合合成(凝集红细胞)泛影酸钠：使溶液在低粘度下具有高密度EDTA二钠钙Ficoll的保存：开盖前保存在4℃~30℃（避光），开盖后保存在 4℃~8℃（避光）Ficoll 产品细分如下：使用Ficoll (1.077g/ml) 分离 ...

肿瘤干细胞对肿瘤的存活、增殖、转移及复发有着重要作用。从本质上讲，肿瘤干细胞通过自我更新和无限增殖维持着肿瘤细胞群的生命力。一、肿瘤干细胞的特性1、具有无限增殖和分化潜能肿瘤的发生是一个长期的突变积累过程，在皮肤及肠黏膜上皮等肿瘤的高发部位，衰老细胞不断地死去并脱离机体，只有干细胞是唯一可以长期存在的细胞，有可能积累多次突变而生成肿瘤干细胞，进而最终形成肿瘤。。2、比例小肿瘤干细胞主要通过两种方式分裂：一种是对称 ...

Fab-TACS® Gravity column 细胞分选重力柱应用实例Fab-TACS 技术简介Fabs-TACS 无痕亲和细胞分选技术 (traceless affinity cell selection, Fab-TACS), 以 Fab 片段为基础，基于 IBA Lifesciences 独家的 Strep-tag®/Strep-Tactin®蛋白纯化系统，进一步发展而来。Fab-TACS 运用免疫亲和层析的原理，使用细胞表面抗原分子 CD marker 中的 Fab 片段，进行捕捉及释放目标细胞。 ...

BioLegend MojoSort™ 磁珠分选实验分享：一、免疫磁珠分选简介免疫磁珠分选是一种从复杂的细胞混合物中分离出高纯度细胞的方法。基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中，不带有该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性，不在磁场中停留，从而使细胞得以分离。有两种分选方式，阴性分选及阳性分选。BioLegend 公司的 Moj ...

以自建细胞系 (laryngeal squamous carcinoma-1, LSC-1) 第 12 代的某一被细菌污染的细胞株采取救治, 比较效果并分析细胞生物学特性。1.方法 1) 抗生素法: 细菌培养: 用无抗生素完全培养液培养细胞 3 d, 收集上清离心后将沉淀物接种于血琼脂培养基, 35e 培养。所采用的抗生素包括临床常用的 15 种抗生素抗生素最适抑菌浓度筛选: 根据细菌药敏实验结果选出敏感抗生素, 每种抗生素从最低抑菌浓度 MIC 到最高耐药浓度分别配制 6 个浓度梯度。将 LSC-1 细胞按 undefined104/孔种 ...

【嘉美实验】流式细胞分选技术原理：利用流式细胞分选仪，以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒，测量其产生的散射光和发射荧光的强度，从而对细胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术，它可根据发射光的荧光强度和波长将发光颗粒亚群分开并可实现单克隆分选，能复杂样本中的细胞进行鉴定、分类、定量和分离，单次可同时对其中一种到四种特定细 ...

原代细胞培养服务：原代肝细胞定制服务原代细胞培养服务：原代细胞定制服务原代细胞培养服务：原代细胞分离培养鉴定以及检测等整体课题服务Case：新生SD大鼠原代心房肌细胞分离与药物刺激培养冰检测相关蛋白与基因实验设计一、细胞：分离大鼠原代心房肌细胞二、细胞培养分组：a)对照组：正常大鼠原代心房肌细胞72h培养b)高糖72h培养 c)高糖+氧化应激抑制因子72h培养d)正常培养48h+氧化应激刺激因子再培养24h e)高糖培养 ...

准备：无菌手术器械，75%乙醇，0.25%胰酶，0.2% dispase酶，0.2% 胶原酶，胎鼠或初生小鼠步骤：1、将小鼠浸于75%乙醇中消毒5min；2、转移至超净工作台中，背部朝上固定四肢；3、用剪刀剪下背部皮肤（注意：不要剪到皮下肌肉组织）；4、刮除皮下多余组织（注意：不要刮得太厉害）；5、将皮肤剪成宽约3mm的条状，表皮朝上平铺于平皿中；6、加入0.2%的dispase（加入的量以使皮肤漂浮起为宜）；7、将上述皮肤组织于37℃中处理1. ...

1. 实验动物产蛋期母鸡（动物实验中心购买），普通饲料喂养，自由进食进饮；实验前禁食12h2.主要试剂及仪器EDTA-2Na购自国药集团化学试剂有限公司；双抗购自Hyclone公司；M199培养基、胎牛血清及Ⅱ型胶原酶均购自美国Gibico公司；CO2恒温培养箱购自美国Thermo公司3.实验步骤A. 翅下静脉注射2mL EDTA-2Na（W/V，2%）溶液处死母鸡，新洁尔灭消毒液浸泡消毒5min，打开腹腔，剪取整个卵巢，小心剥离卵泡 ...

一、实验试剂 1. PBS（Dulbecco）： 0.10 g/L 无水CaCl2 0.20 g/L KCl 0.20 g/L KHPO4 0.10 g/L MgCl2.6H2O 8.00 g/L NaCl 2.16 g/L NaH2PO4.7H2O 调pH至7.4 2. 生长培养基： 不含谷氨酰胺的RPMI 1640培养基 10% FBS 庆大霉素（可不用）（10 μg/m ...

一、实验原理 Dynabeads are mixed with the cell sample in a tube. The Dynabeads will bind to the target cells during a short incubation and then the bead-bound cells are separated by a magnet. Positi ...

1. 从原代组织中分离细胞 将组织块分离（散）成细胞悬液的方法有多种，最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。 从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短，以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织，获得较高产量的有活性细胞。 （1）胰蛋白酶 (Trypsin) ●在去除不需要的组织后，使用无菌的解 ...

内皮细胞分布于整个循环系统，从心脏到最小的毛细血管。在这个步骤中，气管的活力很非常重要。取出器官和开始消化之间的时间越短将提高细胞更有活力的产出及不在含氧量低的条件下太久。小鼠的数量需要：小鼠应该是5~6周大小。年龄大的小鼠内皮细胞的产出会少些。最少5个小鼠可以得到很好的产出。 一、材料和试剂 1. 内皮细胞生长添加剂（ECGS）（Sigma，catalognumber ...

PriCells: AUTOMACS系统自动分选体系分选小鼠CD4+ CD25+抑制性细胞由此方法得到的阴性细胞（CD4+ CD25-）可用作反应细胞或对照细胞实验材料：1. 小鼠2. HBSS洗涤缓冲液3. MACS缓冲液4. CD8a（Ly-2）磁珠5. 结合缓冲液6. biotin-抗CD25（7D4）7. Streptavidin-PE8. ...

实验材料：1. 胶原酶消化的脾脏细胞悬液2. 高密度牛血清白蛋白（BSA）溶液3. RPMI 1640培养基（如Life Technologies），4℃和37℃4. RPMI-5完全培养基，4℃和37℃5. 抗体偶联的绵羊红细胞（EA）6. 用于流式细胞分析的一抗7. 用于流式细胞分析的二抗（荧光结合的小鼠抗大鼠IgG和IgM；如Boehringer M ...

辅助方案：胶原酶消化制备脾脏细胞悬液实验材料：1. 4000U/ml胶原酶D，融化后置于冰上2. HBSS，已灭菌，含Ca+、Mg2+（购置于Life Technologies）3. 小鼠脾脏4. 皮下注射针，22G×11/2in内径（Becton Dickinson）5. 10ml、5ml一次性注射器（如Becton Dickinson）6. 100mm直径 ...

PriCells:动物淋巴管内皮细胞的分离基本方案1：灌注消化法实验材料：1.哺乳动物胸导管淋巴管2.1×PBS，含青霉素100u/ml和链霉素100μg/ml，pH7.43.0.2%Ⅰ型胶原酶4.眼科剪，眼科镊5.慕丝线（7号线）、细铁丝6.离心管（15ml、50ml）实验方法：1.处死动物后，打开胸腔，分离胸导管，在胸导管上端结扎，切取10-15cm的一段。将胸导管放入预冷PB ...