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细胞百科

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原代悬浮细胞吉姆萨染色法

PriCells: 原代悬浮细胞吉姆萨染色法涂片法:1. 用含有5%—10%血清的等渗液将培养的细胞调制成密度为106个/ml的细胞悬液;2. 将1滴细胞悬液滴于一张载玻片的一端,用另一块干净的载玻片,按照血液涂片法将细胞铺展于载玻片上;3. 载玻片在空气中干燥后,再用甲醇固定;4. 对涂有细胞的载玻片进行染色;5. 注意,为避免细胞皱缩应尽快使涂有细胞的载玻片干燥,可摇动载玻片或用吹风机的冷风 ...

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原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

PriCells: 原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法原理: 苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。配制试剂:1.苏丹红Ⅲ染色液:将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70 ...

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台盼蓝染色法

PriCells: 台盼蓝染色法材料:1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管;2. 试剂:0.4%台盼蓝染液;3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g;4. 生理盐水:100ml;操作步骤:1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液;2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁细 ...

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苏木精-伊红(HE)染色

PriCells: 苏木精-伊红(HE)染色染液制备:1. 苏木精染液(1) 称取0.5g苏木精、5.0g铵矾或钾矾和0.1g碘酸钠加温溶于70ml蒸馏水中;(2) 加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混匀后过滤即成母液;(3) 母液可长期保存。用蒸馏水以1:20稀释母液即成工作液。工作液也较长时间储存,但每次染色前宜过滤,去除氧化膜;2. 伊红染液伊红有醇溶 ...

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原代细胞骨架的染色方法

PriCells: 原代细胞骨架的染色方法微丝的显示方法步骤:1. 用PBS液漂洗盖片培养的原代细胞3次,每次30s;2. 用2%的甲醛/PBS液固定原代细胞3min;3. 用0.5%的三硝基甲苯/PBS处理3次,每次10min;4. PBS漂洗3次;5. 用罗丹明(rhodamine)标记的鬼笔环肽(phalloidin)(1:10)室温中反应15min;6. ...

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原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA

PriCells: 原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA基本原理:显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应生成紫红色产物。原理同PAS反应,使细胞核DNA显紫红色。在此过程中RNA不受影响,故染色具 ...

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原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法

原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观察原代细胞均可。吖啶橙对活原代细胞毒性小, ...

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原代细胞甲基绿-哌咯宁法显示DNA和RNA

PriCells: 原代细胞甲基绿-哌咯宁法显示DNA和RNA基本原理:甲基绿(methyl green)和哌咯宁(pyronin)均为碱性染料,因此可与带负电荷的磷酸根形成盐。甲基绿分子有2个正电荷,易与双链DNA分子结合使原代细胞核内的DNA呈蓝绿色。哌咯宁分子有一个正电荷,易与单链RNA分子结合使原代细胞质和核仁内的RNA显示红色。也有人认为染色原理与核酸分子的空间构型有关。配制试剂:1 ...

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FITC标记抗体-Chadwick氏法

PriCells: FITC标记抗体-Chadwick氏法 试剂:抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、pH8.0的0.01mol/L PBS、1%硫柳汞;材料:离心机及离心管、三角烧瓶(25ml)、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯(500ml)等;方法与步骤:1. 抗体的准备。用0—4℃ pH8.0的PBS将免疫球蛋白溶液浓度稀释 ...

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FITC标记抗体-Marsshall氏法

FITC标记抗体-Marsshall氏法材料:抗体球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶(25—50ml)、冰及冰槽(或1000ml烧杯)、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯(500ml)、pH7.2或8.0的0.01mol/L PBS等;方法与步骤:1. 抗体的准备。量取适量已知浓度的球蛋白溶液 ...

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FITC标记抗体-改良法

PriCells: FITC标记抗体-改良法 试剂:1.0.01mol/L pH7.2 PBS配方。将NaCl 18g、Na2HPO4 1.15g、KH2PO4 0.2g,2. 溶于2000ml三蒸水中,调整pH至7.2;3.0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液配法。量取0.5mol/L Na2CO3(5.3%)10ml 加入0.5mol/L NaHCO3(4.2%) ...

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谈谈生物行业的那些商家

生物行业的这些品牌,你听说过吗?

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分子生物学之“细胞分类”

本文主要介绍了细胞的分类,以及是如何一步步分化的

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造血干细胞技术之“造血干细胞库的管理和技术规范”

本文主要介绍了造血干细胞库的管理和技术规范

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基因操控制造人体胚胎干细胞将不再困难

据物理学家组织网6月9日(北京时间)报道,美国研究人员利用成人细胞和生长因子LIF,研发出了一种新的人体多功能干细胞,其与现在使用的干细胞相比,不再那么难以操控。

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细胞周期基础知识

细胞周期(cell cycle)是指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程,分为间期与分裂期两个阶段

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胚胎干细胞有何研究意义

胚胎干细胞是在人胚胎发育早期——囊胚(受精后约5—7天)中未分化的细胞。囊胚含有约140个细胞,外表是一层扁平细胞,称滋养层,可发育成胚胎的支持组织如胎盘等。中心的腔称囊胚腔,腔内一侧的细胞群,称内细胞群,这些未分化的细胞可进一步分裂、分化,发育成个体。内细胞群在形成内、中、外三个胚层时开始分化。每个胚层将分别分化形成人体的各种组织和器官。如外胚层将分化为皮肤、眼睛和神经系统等,中胚层将形成骨骼、血液和肌肉等组织,内胚层将分化为肝、肺和肠等。由于内细胞群可以发育成完整的个体,因而这些细胞被认为具有全能性。当内细胞群在培养皿中培养时,我们称之为胚胎干细胞。

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干细胞的分类

根据个体发育过程中出现的先后次序不同,干细胞又可分为胚胎干细胞和成体干细胞。 按分化潜能的大小,干细胞分成全能性干细胞、 多能性干细胞、单能干细胞。

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细胞凝集反应的实验原理和方法

凝集素(1ectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖等专一性结合的蛋白质,它具有凝集细胞刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成桥的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

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细胞计数及活力测试操作步骤

培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。

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