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实验原理 If using the E.Z.N.A.™ Mag-Bind® Viral DNA/RNA Kit for the first time please read this booklet to become familiar with the procedure and its various modification. Samples are lysed in a speciall ...

实验步骤 1. 大肠杆菌质粒DNA的提取碱裂解法：此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下： 1) 接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基。 2) 37℃振荡培养过夜。 3) 取1.5ml菌体于Ep管，以4000rpm离心3min，弃上清液。 4) 加0.lml溶液I(1％葡萄糖，50mM/L EDTA pH8. ...

实验原理 ELISPOT has due to its high sensitivity and simplicity proven ­valuable for assessing antigen-specific T-cell responses both with regard to specificity and magnitude. One limitation of the regul ...

实验试剂 NaCl溶液(100mg/ml)。 实验设备 电导仪、天平、温箱、真空干燥器、抽气机、恒温水浴锅、注射器。 实验材料 小麦、韭菜叶片 实验步骤 1. 制作标准曲线：如需定量测定透性变化，可用纯NaCl配成0、10、20、40、60、80、100μg/ml的标准液，在20～25℃恒温下用电导仪测定，可读出电导度。2. 选取小麦或其他植物在一定部位上生长 ...

实验原理 叶绿体是植物进行光合作用的细胞器，分布在叶肉细胞内（组成气孔的保卫细胞也含有叶绿体）。叶绿体是由被膜、间质和类囊体三部分组成。依据分离所得叶绿体的结构完整程度，大致将叶绿体分成两类：一类为被膜已破碎的叶绿体，称之为破碎叶绿体，它具有光合电子传递、光合放氧和光合磷酸化的功能；另一类为被膜完整的叶绿体，它具有同化二氧化碳的完全的光合作用功能。分离和制备有活性的离题叶绿体是研究叶绿体的结构功 ...

实验原理 The E.Z.N.A. Total RNA Midiprep Kits use the reversible binding properties of HiBind® matrix a new silica-based material. This is combined with the speed of mini-column spin technology. A specif ...

实验原理 外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组，这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下，有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中，将分别经酶切的载体分子与外源DNA连接。DNA连接酶有两种：T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。DNA重组的方法主要有粘端连接法和平端连接法，为了防止载体本身的自连，可以通过（牛小肠碱性磷酸酶）CIP处理克服。连接 ...

实验原理 Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS)由质膜内侧翻向外侧。Annexin V与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。由于在发生凋亡时，磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的改变，因此，与DNA碎片检测比较，使用Ann ...

实验步骤 1. 交联和细胞收集1) 取 2 个 150 cm2培养皿的融合细胞（每皿细胞数约 1 X 107 - 5 X 107 个）。向培养基中滴加甲醛以使蛋白和 DNA 相交联，甲醛的终浓度为 0.75%（体积百分比），室温下轻轻摇动 10 分钟。2) 加入甘氨酸至终浓度为 125 mM，轻轻振荡孵育 5 分钟。3) 用 10 ml 冷 PBS 洗涤细胞 2 次。4) 用 ...

实验试剂 1. 福尔马林液：用于固定和保存标本。2. 0.5～0.8%氢氧化钠溶液：用于腐蚀标本上的残存肌肉。3. 汽油：用于脱掉标本上的脂肪。4. 3%过氧化氢：用于漂白标本。 实验设备 1. 解剖盘、标本瓶、注射器：用于盛放标本和向标本注射固定液。2. 解剖刀、解剖剪、镊子：用于剔除软组织。3. 玻璃水槽、解剖盘：用于制作过程中盛放标本。4. 卡片纸、大头针、胶水：用于对标本进行定 ...

实验步骤 1. 抗Fab片段抗体亲和层析纯化法 1) 偶联抗人或抗鼠Fab片段抗体到Protein G Sepharose，将纯化的抗人或鼠Fab片段抗体以2mg/ml的比例与Protein G Sepharose凝胶珠溶液混合，室温旋转孵育1h。用10倍量的0.2mol/L硼酸钠(pH值9.0)洗两次，4 000r/min离心5min，用10倍量的0.2mol/L pH值9.0硼酸钠溶液 ...

实验原理 以蛋白酶K 和SDS 裂解细胞释放DNA，而DNA 在浓度较高的氯化钠溶液中的溶解度很高，Na 与带负电的DNA 结合成DNA 钠盐，这时DNA 在溶液中呈溶解状态。以氯仿抽提DNA，去除溶液中蛋白杂质后以3M NaAc 沉淀DNA。 实验试剂 1. TE buffer（pH 8.0）2. 蛋白酶K3. SDS4. 饱和氯化钠5. 氯仿6. 3M NaAc（pH 5.2）7. ...

实验步骤 Growth of bacterial culture:1. Culture volume: Inoculate 30-50 ml LB/ampicillin (50 ug/ml) medium placed in a 200-400 milliliter culture flask with E.coli carrying desired plasmid and grow at 37 ...

实验试剂 PBS，0.5%Triton X-100(DPBS配)，3%H2O2，封闭血清 (5%正常二抗血清DPBS液)，一抗(PBS配，滴度1：200，湿盒)，二抗工作液(湿盒)，C液(湿盒)，DAB显色液，苏木素，树胶 实验设备 20mm盖玻片，90mm培养皿，电子显微镜 实验步骤 1. 将已消毒的20mm盖玻片置于90mm培养皿中，按2×104/ml的细胞密度将细胞 ...

实验步骤 Dissolving Agarose 1000 (NOTE: Chill Agarose 1000 gels for 30 minutes at 4°C before use to achieve best resolution.Method 1: Microwave (recommended for Into a flask holding 2-4 times the desire ...

实验步骤 1.Routine ProtocolThe following protocol is optimized for the control DNA and the primers provided with this kit. This protocol may serve as a starting point for any PCR amplification. Critical ...

实验原理 一定浓度的MW6 000～8 000的聚乙二醇(PEG)，能沉淀免疫复合物，但不能沉淀正常球蛋白，沉淀的免疫复合物可用放射免疫法或用分光光度计测定其含量。 实验试剂 1. 0.1mol/L硼酸盐缓冲液称取硼砂0.64g，硼酸0.51g溶解于100ml蒸馏水中，pH值8.4。2. 6%PEG取6gPEG(MW6 000)，溶于100ml硼酸盐缓冲液中。3. 氯化铯溶液称取CsC ...

实验试剂 KnockOut™ D-MEM/F-12Dulbecco’s Modified Eagle Medium (D-MEM)Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline (D-PBS)StemPro® NSC SFMN-2 SupplementB-27® Serum-Free SupplementNeurobasal® MediumAntibiotic-Anti ...

实验原理 SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。亲和素(Avidin)存在于鸡蛋中，分子量67000。是一种碱性蛋白质，具有对生物素近乎于共价键的结合力。链霉亲和素是一种从链霉菌(Streptomyces Avidinii)培养物中所提取的蛋白质，分子量47000，不含糖链，等电点IP=6.0-6.5。 ...

实验步骤 1. 交联1) 用刀片将冰冻或新鲜组织切成小块 (1-3 mm3)。2) 取一个空的 15 ml 锥形离心管，称重，放入组织后再次称重，计算组织重量。3) 在通风橱中配制交联所用溶液。每克组织加 10 ml PBS。加入终溶度 1.5% (v/v) 的甲醛，室温旋转 15 分钟。4) 加入甘氨酸至终浓度 0.125M，以终止交联反应。继续室温旋转 5 分钟。5) ...