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红细胞脆性的测定

实验原理 正常红细悬浮于等渗的血浆中,若置于高渗溶液内,则红细胞会因失水而皱缩;反之,置于低渗溶液内,则水进入红细胞,使红细胞膨胀。如环境渗透压继续下降,红细胞会因继续膨胀而破裂,释放血红蛋白,称之为溶血。红细胞膜对低渗溶液具有一定的抵抗力,这一特征称为红细胞的渗透脆性。红细胞膜对低渗溶液的抵抗力越大,红细胞在低渗溶液中越不容易发生溶血,即红细胞渗透脆性越小。将血液滴入不同的低渗溶液中,可检查红 ...

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多酚氧化酶的提取、纯化和活力测定

实验原理 很多植物受到机械损伤时在空气中会逐渐变成褐色,这是损伤时植物细胞破碎,原来彼此分开的多酚氧化酶和多酚类物质接触反应的结果。反应如下:+H2O多酚氧化酶+1/2O2多酚氧化酶(po1yphenoloxidase,PP0)是一种含铜酶,它能够催化酚类物质转变成醌。近几十年来,国内外对植物组织褐变的研究表明,组织的褐变主要是PP0作用于天然底物酚类物质所致。 实验试剂 1. 0.0 ...

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哮喘动物模型的制作及治疗药物疗效观察

实验原理 不少药物当以气雾法给予豚鼠时可以引起支气管痉挛、窒息,从而导致抽搐而跌倒。这种动物模型可用于观察药物的支气管平滑肌松弛作用。目前最常用的引喘药物是组胺和乙酰胆碱。 实验试剂 引喘药物: 组胺和乙酰胆碱实验药物: 氨茶碱或特布他林 实验设备 药物气雾引喘装置 实验材料 动物:豚鼠4只 实验步骤 1. 取豚鼠6只备用。2. 取豚鼠1只,放入玻璃罩内( ...

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Parallel-plate Flow Chamber and Continuous Flow Circuit to Evaluate Endothelial Progenitor Cells under Laminar Flow Shea

实验材料 NameCompanyCatalog NumberComments10 ml SyringeCole Parmer Instrument Co.07940-121-Way StopcoksCole Parmer Instrument Co.30600-0030 ml SyringeBD Medical3096504 -Way StopcocksCole Parmer Instr ...

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DNA沉淀法提取C1q

实验试剂 1. pH值8.6、0.025mol/L巴比妥EDTA缓冲液(含0.01mol/L EDTA);2. 小牛胸腺DNA;3. pH值6.9、0.05mol/L PB;4. DNA酶溶液,每毫升pH值6.9、0.05mol/L PB中含MgCl2 0.003mol/L、1mg DNase;5. pH值5.3、0.3mol/L PB;6. pH值5.1、0.02mol/L PB(含0.01m ...

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SDS-page minigel

实验试剂 1.1X SDS gel-loading buffer50 mM Tris-Cl (pH 6.8)100 mM dithiothreitol2% SDS0.1% bromophenol blue10% glycerol1% SDS gel-loading buffer lacking dithiothreitol can be stored at room temperature. ...

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E.Z.N.A.® Endo-free Plasmid Mini Kit I Spin Protocol

实验步骤 1. Inoculate 5ml LB/ampicillin (50 ug/ml) medium placed in a 10-20 ml culture tube with E.coli carrying desired plasmid and grow at 37°C with agitation for 12-16 h. It is strongly recommended th ...

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细菌膜蛋白的分离

实验试剂 1. Tris-Mg 缓冲液 10mM Tris-Cl 5mM MgCl2 pH 7.3,4℃保存 2. 2%(w/v)十二烷基肌氨酸钠 (SLS) 实验步骤 1. 于20ml 营养肉汤中过夜培养细菌,37℃,200rpm。 2. 10000g、20min、4℃离心,去上清。 3. 20ml预冷的Tris-Mg缓冲液重悬,同样条件离心,再重悬于预冷的 ...

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TIL细胞的制备

实验试剂 1. RPMI-16402.Ⅰ、Ⅳ型胶原酶、DNA酶3. 0.001%的透明质酸酶和DNA酶 4. IL-2 实验设备 80目和200目不锈钢网 实验材料 肿瘤组织 实验步骤 1. 无菌切取肿瘤组织或肿瘤浸润的局部淋巴结,置于含抗生素的RPMI-1640培养液中;2. 将瘤体机械法剪碎,用RPMI-1640调整体积为10~20ml,同时加入0.05%的Ⅰ、 ...

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E.Z.N.A.TM DNA Fast Protocol For FFPE Tissue

实验原理 E.Z.N.A.TM FFPE DNA Kit uses the reversible binding properties of HiBind® matrix a new silica-based material combined with the speed of mini-column spin technology. A specifically formulated buf ...

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Vybrant® DyeCycle Green and Orange Stains

实验材料 Contents and storage information. MaterialAmountConcentration StoragundefinedStabilityVybrant® DyeCycle™ Green stain Vybrant® DyeCycle™ Orange stain400 μL5 mM solution in dimethyl sulfoxide (D ...

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流式细胞术常用样品的制备方法

实验试剂 0.25%胰蛋白酶,无钙离子和镁离子的PBS液,70%乙醇,l%胃蛋白酶溶液 实验设备 倒置显微镜,培养瓶,吸管,离心管,4℃冰箱,剪刀,匀浆器,不锈钢网,流式细胞仪 实验步骤 1. 单层培养细胞单细胞悬液的制备 1) 弃去培养细胞(对数生长期)中的旧培养液,加入1~2ml 0.25%胰蛋白酶,倒置显微镜下观察,见细胞稍变圆时,停止胰蛋白酶作用。也可直接观 ...

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H33342释放法检测单核-巨噬细胞的胞毒作用

实验试剂 H33342 实验设备 1. 微量荧光"W"测量板(德国Dynatech公司产品) 2. 用自动微量荧光分析仪(Micro-FluoDynatech) 实验材料 靶细胞(L929细胞株,对单核细胞的杀伤活性敏感) 实验步骤 1. 从单个核细胞中采用粘附法分离的单核细胞,经非特异性酯酶(ANAE)和台盼蓝染色,细胞纯度应90%,细胞活力应95%;2. 收获靶 ...

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从外周血淋巴细胞中提取RNA

实验试剂 1. Ficoll(Amersham Biosciences)2.冰冷磷酸盐缓冲液(PBS),pH 7.43. 裂解缓冲液:5mol/L单巯基氰酸胍,10mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA),50mmol/L Tris—HCl,1mmol/L二硫苏糖醇(DTT),用0.45微孔滤膜过滤4. 4mol/L和3mol/L氯化锂,高压灭菌5.RNA溶解缓冲液:0.1%SDS,lmmol/ ...

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Isolation of Untouched Human B Cells by Depletion of Non-B Cells

实验原理 Add a mixture of biotinylated monoclonal antibodies (Antibody Mix) against the non-B cells to the starting sample. Add Depletion MyOne SA Dynabeads® to bind the non-B cells during a short incuba ...

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细胞膜蛋白的分离

实验试剂 1. 方法一缓冲液A:1mM KCl,5mM NaCl,3mM MgCl2,50mM Hepes,1mM DTT,0.5ug/ml Leupeptin,20uM PMSF(PH=7.4) 缓冲液B:1mM KCl,5mM NaCl,3mM MgCl2,50mM Hepes,1mM DTT,0.5ug/ml Leupeptin,20uM PMSF(PH=7.4),1mM EGTA 缓冲液 ...

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E.Z.N.A. Plant RNA Midi Protocol II (for difficult samples)

实验步骤 1. Grind plant sample. Collect frozen ground plant tissue (up to 500 mg) in a microfuge tube and immediately add 3.5ml Buffer RPL/2-mercaptoethanol. We recommend starting with 250 mg tissue at f ...

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免疫组化的操作规程

实验试剂 1. PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。 2. 0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠 3g,柠檬酸 0.4g。 3. 0.5mol/L EDTA缓冲液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O ...

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无菌感染期线虫的诱导培养

实验试剂 1. 琼脂糖(Agarose),进口分装,上海Yito公司;2. 胰蛋白胨(bacto-tryptone)、酵母浸出粉(bacto-yeast extract),英国OXOID公司;3. 琼脂粉,广东环凯微生物科技公司;4. DEPC,Bio Basic inc公司;5. LB培养基Tryptone 10 gYeast Extract ...

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Modified protocol for Isolating RNA from Grape Leaves

实验步骤 1. Ground sample with liquid nitrogen.2. Weight 10-50 mg ground sample into a tube contains 400 ul CPL Buffer. Mix the sample throughly by vortexing the tube 20 seconds.3. Add 400 ul chloroform ...

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