免疫细胞与组织染色实验

荧光标记物的定位分析 激光扫描共聚焦显微镜可进行重复性极佳的活细胞或固定细胞的荧光定量分析。利用这一功能可对单个细胞或细胞群的溶酶体、线粒体、DNA、RNA和受体分子含量、成分及分布进行定性和定量测定。 激光扫描共聚焦显微镜可以自动将荧光图像与相差图像重叠，以显示荧光标记物在形态结构上的精确定位。在同一细胞或组织标本上需同时检查两种或两种以上抗原时要进行双(多)重荧光染色。可 ...

三维图像重建 对具有三维空间立体结构的组织细胞进行研究时，尤其是定量研究其结构形态时，往往需要显示空间构造上的三维数据，经计算机图像处理及三维重建软件将得到各光学切片的数据组合，形成一个真实的三维图像，并可从任意角度观察，也可以借助改变照明角度来突出特征性结构，产生更生动逼真的三维效果。一系列模拟荧光处理图像可被储存并以三维动画形式显示，这可谓是形态学研究方法的重大突破。激光共聚焦显微镜三 ...

定量免疫荧光测定 激光扫描共聚焦显微镜可以对经过荧光标记的组织标本共聚焦荧光进行定量分析．并显示荧光沿Z轴的强度变化。它除了可以对单、双或三重标记的细胞及组织标本的荧光进行定量、定位分析外，还可以借助显微CT功能在不损失分辨率的前提下对标本深层进行荧光分布的测量．获得组织形态结构信息。激光扫描共聚焦显微镜同样适用于高灵敏度的快速免疫荧光测定，从而准确检测抗原表达、荧光原位杂交斑点及组织细胞 ...

荧光定量图像分析 激光扫描共聚焦显微镜不仅可以对生物样本进行二维和三维图像分析，还可以与荧光探针相结合，在图像处理的同时，进行图像定量分析。例如细胞面积及周长的测定和细胞核面积的测定，从而可以将生物体的形态学特征进行量化，提高了研究结果的准确性。激光扫描共聚焦显微镜能对单标记或双标记生物样品的共聚焦荧光定量分析，并显示荧光沿Z轴的强度变化。根据实验要求设置好仪器测试的各种参数后，计算机便能 ...

激光扫描共聚焦显维镜定量分析的注意事项《一》制备高特异性和高效价的荧光抗体 标本只有在用荧光探针标记的前提下才能进行共聚焦显微镜检测．制备高特异性和高效价的荧光抗体是检测的关键。这就要求选用高质量的荧光素和高特异性与高效价的免疫血清。同时还要对荧光抗体进行质量鉴定，主要是进行特异性和敏感性鉴定。《二》标本制作要求 1．标本厚度 组织切片或其他标本不能太厚，否则激发光多数消耗在 ...

体视学的基本概念 对各种生物结构的形态学研究是医学各领域研究的重要方面，尤其是定量形态学研究。对器官的整体结构水平形态学研究相对比较容易，比如用排水法测量肝脏的体积则可以清楚地了解正常肝脏与患有肝硬化病人肝脏的体积差别。但是随着科学的发展，研究者越来越关心人体在微观结构上的形态特征。任何组织结构，如细胞、细胞间质、细胞器以及某种染色阳性结构等，均为具有一定形状和空间分布的几何物体。结构的形 ...

激光扫描共聚焦显维镜定量分析的优势 激光扫描共聚焦显微镜与图像半定量分析相比，具有以下优点： 1．更精细、精确度更高。激光扫描共聚焦显微镜对免疫荧光组织化学染色样品做定量分析时，利用激光聚焦和系统软件分析对组织进行深层扫描，不破坏组织细胞结构，可深层次准确定位并精确定量。而一般图像分析只是以荧光灰度的差别变化进行半定量分析。 2．激光扫描共聚焦显微镜一般有两个以上不同波长的 ...

体视学几何探针 在明确二维参数与三维参数之间的关系之后，欲得到三维数据首先要准确有效地获取二维参数。在体视学中这些问题非常容易解决，只要利用适合的几何探针(geometric probes)和恰当的计数方法便可以得到。体视学的测试探针包括零维的测试点(test point)、一维的测试线(testline)、二维的测试框(testframe)、三维的体视框(disector)。几何探针a. ...

PriCells: 正常角膜缘干细胞的免疫染色试剂和材料：1.一抗：（1）ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1：100（2）连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1：100（3）细胞角蛋白3（K3）-----小鼠单克隆AE5----------- 1：500（4）细胞角蛋白12（K12）---兔多克 ...

（一） 原理 免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。 （二）材料与试剂 1．马脾铁蛋白 2．硫酸铵 3．硫酸镉 4．双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante，XC)以0.30mol/L pH9.5硼酸盐缓冲液将XC配制成1%溶液。注意配制的水及容器必须特别清洁，配制后放置4 ...

免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物，是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。

1. 固定 最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 （1）BouinS固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好，结构完整，但因偏酸，对抗原有一定损害，且组织收缩明显，不适于组织标本的长期保存。 （2）PL ...

非特异性染色常出现在组织边缘、胶原纤维及血浆渗出处，坏死组织及固定不良的组织中心处。表现为弥漫性，均匀性的背景染色。也可以是随机分布的阳性反应产物点、团或块状。

酶与抗体交联的方法有许多种,根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备HRP结合物，可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。

组织在制作过程中，由于化学试剂的作用封闭了抗原，又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲，致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来，为了解决上述的问题，利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复。

Discovery推出：认识细菌。介绍地球最古老的独立生存生物-细菌。细菌有好有坏，且亦好亦坏，在波湾战争期间，海珊利用肉毒杆菌制造出威力惊人的生物武器，然而经过多年的研究，由于适量的毒菌能痲痹肌肉，故被使用于治疗痉挛性斜颈与整形除皱上。自古以来，病菌危害人类已久，包括著名的鼠疫、肺结核等，皆让当时的医师束手无策，于是一些对抗细菌的药物相继研发出，如盘尼西林与抗生素，并成功地拯救无数的生命。但细菌内存的基因信息，却能传送新DNA予其它细菌，演化成为抗药性细菌，抗菌药物因而失效，于是人类与细菌又将展开一场生死决斗。

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