定量免疫荧光测定

激光扫描共聚焦显微镜可以对经过荧光标记的组织标本共聚焦荧光进行定量分析．并显示荧光沿Z轴的强度变化。

它除了可以对单、双或三重标记的细胞及组织标本的荧光进行定量、定位分析外，还可以借助显微CT功能在不损失分辨率的前提下对标本深层进行荧光分布的测量．获得组织形态结构信息。

我国学者为确定某些物质(如猪苓多糖)是否对培养的膀胱癌T!细胞抑癌基因p53和抑制细胞凋亡基因蛋白H-fas表达有调节作用，用激光扫描共聚焦显微镜对经免疫荧光细胞化学染色的细胞进行共聚焦荧光断层扫描成像，每个细胞扫32个切面，用三维和定量软件观察与测定细胞内荧光变化，细胞培养24小时，对照组p53主要在细胞核内表达，阳性信号呈黄绿色亮点，点状分布，呈现一核多点表达，荧光强度较弱，为119±43。

实验组细胞核内强荧光，为170±13，细胞质内也有强表达，呈弥散性分布。对于培养细胞的H-fas基因蛋白表达也作了同样的检测。通过对不同组培养细胞荧光强度的测定得出：猪苓多糖对膀胱癌T24 细胞p53基因蛋白表达有一定调节作用．对H-fas基因蛋白表达无明显影响(曾星等，2003)。

近年来，应用激光共聚焦扫描显微镜对肿瘤相关抗原等进行定性定量研究的报道颇多，由此可见，激光扫描共聚焦显微镜在这一领域的应用十分广泛。