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合适的小鼠胚胎干细胞胞质分裂阻断微核试验(CBMn)分析

实验试剂 2-巯基乙醇(Sigma;M-7522)原液的浓度为14.3 M(纯液体),准备β -巯基乙醇溶液的工作液,加入70μl 2-巯基乙醇原液(14.3M)溶于10 ml PBS ,过滤消毒和储存在阴凉的地方。Bisbenzimide H 33258,(Calbiochem,382061,100 mg)杜尔贝科的磷酸盐缓冲生理盐水无 Mg2和Ca2 (D - PBS)(Si ...

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All-in-One Kit for Immunohistochemical Staining for Tissues with Antibodies

实验试剂 BioModuleTMPBS Ethanol 详细信息: 95%-100%XyleneDAB 实验设备 Light Microscope 实验材料 Coplin jars or staining containers frozen and formalin--xed paraffin embedded tissues 实验步骤 1. Obtain or ...

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大鼠血清、血浆及相关液体样本中皮质醇(Cortisol)含量的检测

实验试剂 1. 大鼠皮质醇(Cortisol)定量检测试剂盒(ELISA)2. 蒸馏水 实验设备 1. 37℃恒温箱2. 标准规格酶标仪3. 精密移液器及一次性吸头4. 一次性试管5. 吸水纸 实验步骤 1. 准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2. 配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3. 加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架 ...

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DNA Purification from Blood or Body Fluids

实验材料 blood 实验步骤 Protocol: DNA Purification from Blood or Body Fluids(Spin Protocol)This protocol is for purification of total (genomic mitochondrial and viral) DNA fromwhole blood plasma serum b ...

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碱性磷酸酶的染色检测

实验原理 本试验是一个酶组织化学试验,酶组织化学是在不破坏组织细胞的条件下,检测酶的存在,定位与活性的学科,即在酶的存在,分布及其用在显微镜下变成可见的。生命是有序的,包括时间的有序及其空间的有序。其中美的空间有序性在于其细胞组织结构的精确位置,各种酶的自己的位置保证了化学活动的有效进行。酶的定位方法必须准确,其显示方法必须具有高度的特异性,使酶本身具有可见性,这是一种直接的方法,目前主要有免疫 ...

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Human DC Enrichment Kit

实验原理 Add a mixture of biotinylated monoclonal antibodies against non-DC cells to your starting sample. Add Depletion MyOne™ SA Dynabeads® and allow them to bind to the non-DCs during a short incubati ...

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使用 Platinum® Taq DNA 聚合酶 (Platinum® Taq DNA Polymerase),对靶序列进行定性验证

实验步骤 The procedure on the following page is suggested as a guideline and starting point when using Platinum® Taq DNA Polymerase in any PCR amplification. Optimal reaction conditions (incubation tim ...

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BrdU Labeling Protocol

实验材料 Materials Required But Not Provided1. BrdU reagent (Invitrogen Cat. No. 00-0103)2. Cytospin Tubes3. Phosphate-Buffered Saline 4. 0.22 micron filter 实验步骤 1. Labeling with BrdU In Vivo 1 ...

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免疫复合物的纯化

实验试剂 裂解缓冲液抗体蛋白A或蛋白G微球(用含0.02%叠氮钠裂解缓冲液配成10%(V/V)的混悬液,4℃保存)不含DTT的Laemmli样品缓冲液(2%SDS、10%甘油、60mmol/LTris,pH6.8和0.02%溴酚蓝) 1mol/LDTT(保存于-20℃) 实验设备 摇床、抽吸装置(大多是通过导管与负压瓶一室内真空器连接) 实验步骤 1.准备工作蛋白A或蛋白 ...

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膜表面免疫球蛋白(SmIg)检测法

实验原理 膜表面免疫球蛋白(SmIg),是B细胞特有的表面标志,它既是B细胞识别抗原的受体,与相应抗原特异性结合;又是表面抗原,能与相应的抗Ig的抗体结合,故可用荧光标记的抗Ig抗体作免疫荧光镜检,以查出B淋巴细胞。由于B淋巴细胞在分化过程中最先出现SmIg,所以该法可以检出全部B淋巴细胞。B淋巴细胞表面最先出现IgM,以后相继出现IgG、IgD、IgA等表面免疫球蛋白。而金黄色葡萄球菌A蛋白( ...

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噬菌体抗体库的菌落筛选法

实验步骤 1. 将每轮筛选洗脱的噬菌体用来感染新鲜的XLIBlu菌,以10μl、20μl等不同量菌液涂于LB氨苄青霉素平皿,37℃ 4~5h。2. 事先将硝酸纤维素膜在5mmol/L的IPTG溶液中浸泡10min,在超净台中晾干后,铺在上述涂有细菌的平皿中,注意膜面与平皿中培养基界面应无气泡。3. 置30℃过夜培养,一般约15~16h。4. 作好标记,轻轻地将硝酸纤维素膜揭开,用氯仿 ...

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共生菌对黑豆蚜体内总蛋白和游离氨基酸代谢的影响

实验材料 黑豆蚜用盆栽蚕豆(Vicia faba L.)苗饲养,温度23-25℃,光周期16:8。 实验步骤 1. 脱共生蚜虫的培养将3周大的蚕豆苗根部冲洗干净后浸在200ug/ml的利福平溶液中,24小时后,接上成蚜使之产子,10小时后移去成蚜有,再过48小时后移入正常植株饲养。经过这种处理所获得的蚜虫即是脱共生蚜虫。未经抗生素处理的正常蚜虫称为共生蚜虫。2. 脱共生蚜虫发育和生殖观 ...

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RACE System for Rapid Amplification of cDNA Ends

实验原理 The 5' RACE System is a set of prequalified reagents intended for synthesis of first strand cDNA purification of first strand products homopolymeric tailing and preparation of target cDNA for su ...

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胶体金免疫层析法对抗幽门螺杆菌相关蛋白A抗体的检测

实验原理 胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大 ...

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Platinum® Taq Antibody

实验步骤 1. Measure out the amount of Taq DNA polymerase needed. When using a reaction cocktail determine the total number of units in the mix.2. Add an amount of “equivalent units” of Plat ...

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Dynabeads® Co-Immunoprecipitation Kit

实验原理 Antibodies (Ab) of your choice are covalently coupled to Dynabeads. Once antibodies have been coupled to the Dynabeads the bead-bound antibody may then be used for co-immunoprecipitation experim ...

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BACs, PACs, P1s and Plasmid Isolation Protocol (For low copy number)

实验试剂 1. Sterile Deionized Water (or TE Buffer)2. 70% Ethanol 3. 96%-100% Isopropanol 实验设备 1. Microcentrifuge capable of at least 18000 x g2. Sterile 1.5 ml Centrifuge Tubes 3. 10-15 ml Culture T ...

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General Stem Cell Protocols

实验试剂 1. Complete Culture Media Formulation for ES (Embryonic Stem) For 500 ml of ES complete media: • 100 ml fetal bovine serum (F2442) • 5 ml 100x non-essential amino acids NEAA (M7145) &b ...

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Agarose Gel Electrophoresis for the Separation of DNA Fragments

实验材料 NameCompanyCatalog NumberCommentsAgarose IAmresco0710Boric acidSigmaB7901Bromophenol blueSigmaB8026EDTASigmaE9884Ethidium bromideSigmaE7637Carcinogenic—needs to be disposed of as hazardous ...

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大肠杆菌重组蛋白复性

实验步骤 1. 制备包涵体1) 取上述含目的蛋白菌液,4℃,6500 rpm 离心 15 min,弃上清;2) 将沉淀完全重悬于 0.1 倍菌液体积的 1 × IB 洗涤液,反复混匀;3) 在细胞裂解的过程中将重悬的溶液置于冰上以防止蛋白受热裂解,可选择超声波裂解或 French Press 法裂解细胞。其中超声波裂解细胞是更广泛应 ...

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