微生物学技术

实验五十 动物病毒的鸡胚培养法 　　一、目的要求 　　1．了解动物病毒鸡胚培养的意义及用途。 　　2．初步掌握病毒鸡胚培养的基本方法。 　　二、基本原理 　　鸡胚培养法是用来培养某些对鸡胚敏感的动物病毒的一种培养方法，此方法可用以进行多种病毒的分离、培养，毒力的滴定，中和试验以及抗原和疫苗的制备等。 　　鸡胚培养的技术比组织培养容易成功，也比接种动物的动 ...

实验五十二 实验动物的注射方法 　　一、目的要求 　　练习对实验动物注射的操作方法。 　　二、基本原理 　　很多微生物学与免疫学实验均需利用动物，例如鼠疫杆菌等病原菌的毒力试验、菌苗与疫苗的安全试验、药物对免疫功能的影响等常在小白鼠体内进行；免疫血清的制备常将抗原注射于家兔体内，然后分离家兔的血清；豚鼠常用于被检材料的细菌分离，如从病人痰液内分离结核菌，其他也用于白喉杆菌 ...

实验五十三 吞噬作用 　　一、目的要求 　　观察动物的白细胞和巨噬细胞对细菌和异物的吞噬现象。 　　二、基本原理 　　人体和动物机体具有吞噬作用的细胞主要有多形核白细胞（小吞噬细胞）和巨噬细胞（大吞噬细胞），它们在机体的免疫反应中起着很重要的作用。本实验就是根据机体的这一基本免疫现象而设计的。 　　三、器材 　　豚鼠，白色葡萄球菌悬液（每毫升含 ...

实验五十四 抗原与免疫血清的制备 　　一、目的要求 　　1．学习抗原与抗体的一种制备方法。 　　2．为“凝集反应”实验准备材料。 　　二、基本原理 　　将抗原注射于动物体，使其产生相应的抗体，待动物血清中产生大量的抗体时，采出动物的血液，分离析出血清，此即含抗体的抗血清或称免疫血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定，疾病的诊断与治疗以及抗原的 ...

实验五十五 凝集反应 　　一、目的要求 　　1．了解血清学反应的基本原则。 　　2．学习玻片凝集与试管凝集的操作与观察结果的方法。 　　二、基本原理 　　凝集反应可说是经典的血清学反应，使用历史长并一直沿用至今。它分为玻片凝集法与试管凝集法两种。利用已知抗血清鉴定未知细菌常用玻片凝集法，其突出优点是极端快速，为诊断肠道传染病时鉴定病人标本中肠道细菌的重要手 ...

实验五十六 环状沉淀反应 　　一、目的要求 　　通过沉淀素的效价滴定，学习环状沉淀反应的操作方法及结果的观察。 　　二、基本原理 　　沉淀反应与凝集反应的原理基本相同，所不同的是使用的抗原是可溶性的，正因为是可溶性抗原，其单个抗原分子体积小，在单位体积的溶液内所含抗原量多，其总反应面积大，出现反应所需要的抗体量多，因此，试验时是稀释抗原，而不是稀释抗体。引起沉 ...

实验五十七 双向免疫扩散试验 　　一、目的要求 　　1．练习双向免疫扩散试验的操作方法。 　　2．观察抗原、抗体在琼脂中形成的沉淀线。 　　3．了解双向免疫扩散试验的用途。 　　二、基本原理 　　抗原、抗体在凝胶中扩散，并进行沉淀反应，叫做免疫扩散反应（immunodiffusion）。将抗原与其相应抗体放在凝胶（如琼脂）平板中的邻近孔内，使它们互相扩散 ...

实验五十八 免疫电泳 　　一、目的要求 　　学习免疫电泳的一般原理与方法。 　　二、基本原理 　　免疫电泳的基本原理是将电泳和琼脂免疫扩散结合起来应用，即先将蛋白质抗原在琼脂内进行电泳，使分离成不同的电泳区带，然后在一定距离的抗体槽内加入抗血清，使进行免疫扩散沉淀反应，这样，每一电泳区带又可能产生一个以上的沉淀线条。因而此法克服了单纯琼脂扩散方法中的沉淀线重叠 ...

XIV 水的细菌学检查 　　生活用水的水源常被生活污水或工业废水或人与动物的粪便所污染。粪便污物含有不同类型的微生物，有腐生性的和病原性的。腐生性微生物对人无害，而病原性微生物则能引起传染病的发生。水源水如湖水、池水和溪水，常含有很多腐生菌，但仍可安全地饮用。然而水源一旦被粪便污染，就可能也被肠道病原体污染而引起肠道传染病甚至流行病，如霍乱、伤寒、细菌性痢疾和阿米巴性痢疾以及脊髓灰质炎和传 ...

XV．食品微生物学 　　与水一样，食品污染了致病微生物也能引起传染病的发生；含菌数超过一定标准，同样也会影响人体健康。但另一方面，由于有益微生物的活动，会使食品发生人们所需要的变化，使食品更易于保存或使营养价值变得更高，或者产生人们更喜爱的风味，例如酸菜和酸牛乳等的发酵食品就是微生物活动的结果。食品微生物学的范围甚广，但其基本原理都是一致或相似的，例如蔬菜和牛乳的发酵都是利用微生物与环 ...

实验六十一 滤膜法测定水中大肠菌群 　　一、目的要求 　　学习使用滤膜法测定水中大肠菌群。 　　二、基本原理 　　滤膜法是采用滤膜过滤器过滤水样，使其中的细菌截留在滤膜上，然后将滤膜放在适当的培养基上进行培养，大肠菌群可直接在膜上生长，从而可直接计数。所用滤膜是一种多孔硝化纤维膜或乙酸纤维膜，其孔径约0．45μm。 　　三、器材 　　伊红美蓝琼脂平板或远 ...

实验五十九 水中细菌总数的测定 　　一、目的要求 　　1．学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。 　　2．了解水源水的平板菌落计数的原则。 　　二、基本原理 　　本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数。由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以一定的培养基平板 ...

附录I 染色液的配制 　　一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 (实验6，53) 　　A液：美蓝(methylene blue) 0．6g 　　95%酒精 30ml 　　B液：KOH 0．01g 　　蒸馏水 100ml 　　分别配制A液和B液，配好后混合即可。 　　二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 (实验6) 　　A液：碱性复红(bas ...

实验六十三 牛乳在自然发酵与酸败过程中细菌的生态学演变 　　一、目的要求 　　1．通过生牛乳的自然发酵了解牛乳酸败过程中细菌的生态学演变过程。 　　2．了解酸牛乳的制作原理。 　　二、基本原理 　　刚采集的生牛乳含有少量不同的细菌，而牛乳的成分对细菌来讲是一种很好的营养基质，因此，在温暖的条件下，细菌即开始很快地繁殖。然而也不是所有的细菌都能如此，由于当时 ...

实验六十二 牛乳中细菌的检查 　　一、目的要求 　　1．了解牛乳的细菌学检查方法——显微镜直接计数法和标准平板计数法。 　　2．学习牛乳的巴斯德消毒法。 　　二、基本原理 　　从健康母牛体内刚挤出的牛乳，含有少量的正常起始微生物。但将牛乳装入未消毒的器具和在分装、运输过程中，会被很多其他微生物甚至致病菌污染，而且牛乳含有丰富的营养物质（碳水化合物、蛋白质、 ...

实验六十 多管发酵法测定水中大肠菌群 　　一、目的要求 　　1．学习测定水中大肠菌群数量的多管发酵法。 　　2．了解大肠菌群的数量在饮水中的重要性。 　　二、基本原理 　　多管发酵法包括初（步）发酵试验、平板分离和复发酵试验三个部分。 　　1．初（步）发酵试验 　　发酵管内装有乳糖蛋白胨液体培养基，并倒置一德汉氏小套管。乳糖能起选择作用，因为很多 ...

附录Ⅲ 试剂和溶液的配制　　一、3%酸性酒精溶液 (实验15)　　浓盐酸 3ml　　95%酒精 97ml　　二、中性红指示剂 (实验40)　　中性红 0．04g　　95%乙醇 28ml　　蒸馏水 72ml　　中性红pH6．8—8，颜色由红变黄，常用浓度为0．04%。　　三、淀粉水解试验用碘液(卢戈氏碘液) (实验40)　　碘片 1g　　碘化钾 2g　　蒸馏水 300ml　　先将碘化钾溶解在少量水中 ...

附录Ⅱ 培养基的配制 　　一、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用) 　　牛肉膏 3g 　　蛋白胨 10g 　　NaCl 5g 　　琼脂 15—20g 　　水 1000ml 　　pH 7．0—7．2 　　1．05kg/cm2　，121．3℃灭菌20分钟。 　　二、淀粉琼脂培养基(高氏1号培养基，培养放线菌用) 　　可溶性淀粉 20g 　　KNO3　 1g 　　NaCl ...

工艺流程 原料→(解冻)→剥肉→漂洗→分级→蒸煮→冷却→装袋→冷冻→装箱→贮藏→检验 制作方法 1.原料选择：原料虾必须品质新鲜，无异味。 2.解冻∶剥肉∶冻熟虾仁的解冻、剥肉与冻生虾仁相同。 3.漂洗：将剥好的生虾仁验收后，倒入洗虾用带孔的塑料箩内(不超过箩1/3高度)，置于洗虾缸内清洗。用竹片顺时针沿底轻轻搅拌，使虾仁能浮起即可，提出沥水1～2分钟即可蒸煮。 4.蒸煮：调节蒸煮锅内盐水浓度在5 ...

鲈形目鲭亚目的1科。有9属21种。体锤形肥壮;尾柄细，平扁，具1中央隆起嵴；吻尖圆;上下颌各具小齿1列；犁骨、腭骨具绒毛齿；鳃孔大，鳃膜条骨7；背鳍2，第二背鳍及臀鳍形状相似，其后各有小鳍6～9个;胸鳍呈镰状；腹鳍短；腹鳍间突分离，较小，尾鳍大新月形。广布于印度洋、太平洋及大西洋热带和亚热带海区。为大洋性洄游鱼类。中国产有金枪鱼科 6属11种。习见种有黄鳍金枪鱼和大眼金枪鱼。黄鳍金枪鱼是最典型的热 ...