免疫学技术

IFN-γ（干扰素-γ）主要产生于激活的T细胞和NK细胞。TH1型响应的特点是通过辅助T细胞和细胞毒T细胞产生IFN-γ，所以高水平IFN-γ的产生是由于寄主应对细胞内的病原体产生了有效的防御。酶联免疫斑点法通常用于评估抗原特异的T细胞的功效，即检测IFN-γ的释放。酶联免疫斑点法是一种非常灵敏的免疫检测方法，它可以在单细胞水平检测细胞 ...

一、材料与试剂 1. 第一抗体 2. 第二抗体（Invitrogen） 3. 100%冰冷丙酮 4. 马血清（SantaCruz;sc-2483） 5. Hoechst 33342荧光染料（Invitrogen;H1399） 6. ProLong Gold抗褪色试剂（Invitrogen;P36934） 7. & ...

一、材料和试剂 1. 抗体 （1）Ratanti-mouseCXCR5-biotin（BP Pharmingen 551960） （2）Goatanti-ratIgG-biotin（BP Pharmingen 554014） （3）Straptavidin-PECy7（B PPharmingen 557598） （4）Ratanti-mous ...

一、材料与试剂 1. 抗体 （1）鼠抗人CD56FITC（BD340410） （2）鼠抗人CD2FITC（BD555326） （3）鼠抗人CD19FITC（555412） （4）鼠抗人CD14PerCP（InvitrogenMHCD1431） （5）鼠抗人CD16PacBlue（BD558122） （ ...

一、材料与试剂 1. 小鼠 2. 抗CD3与抗CD28抗体（Biolegend，100302，102102） 3. 白细胞介素-2（IL-2）（R&Dsystems402-ML-020） 4. 聚凝胺（Polybrene）（hexadimethrinebromide，SIGMAH9268） 5. RPMI-1640培养基 ...

1. Q：要做胃粘膜组织的DNA含量及倍体检查，但取材后要等几个星期才会做流式细胞术检查，请问：胃组织要怎样保存好呢？用低温保存，还是用乙醇固定？或者固定后再低温下保存？ A：我做过乳腺细胞的DNA含量测定，取得组织以后，先处理成单细胞悬液，然后再加70%冰乙醇固定，要保证冰乙醇的最终浓度为50%，这样固定的细胞悬液可以至少保存12小时，最多可保存一个月，上机检测前再加PI综合染液 ...

一、资料与方法 1. 检测对象：研究对象来自武汉协和医院2003年3月-2004年10月的住院患者或门诊体检人群。恶性肿瘤组：经临床手术和病理检査确诊为肺癌、肝癌、前列腺癌、乳腺癌、消化道肿瘤和妇科肿瘤等患者121例，其中男74例，女47例，平均年龄56.5岁；疾病对照组：临床确诊为胆囊炎、胰腺炎、前列腺炎（增生或肥大）、肝炎或肝硬化等良性疾病患者的血清样本作为良性疾病 ...

一、材料和方法 1. 标本来源：156份临床病理确诊的消化系统肿瘤患者（男92例，女64例，年龄12~85岁，平均年龄53岁）血清标本来自北京天坛医院和中国医学科学院肿瘤医院，其中，肝癌50份、胰腺癌33份、肠癌32份、胃癌41份。健康体检者（男70名，女57名，年龄16~68岁，平均年龄46岁）血清标本127份。消化系统炎症患者（男47例，女48例，年龄18~70岁， ...

一、仪器和试剂 Luminex200流式荧光检测仪(美国Luminex公司）；流式荧光多肿瘤标志物联合检测试剂（上海透景生命科技有限公司）； E170电化学发光分析仪及配套肿瘤标志物检测试剂（罗氏公司）。 二、标本来源 2007年5月~6月，200名患者空腹静脉血，每人采集4 ml，血样分别置于美国BD公司分离胶试管中，-20℃下保存待检。 三、操作与评价方法 试剂盒测定参数设置和仪器操作严 ...

ELISA实验步骤 ELISA实验步骤 ...

1. 家兔心脏穿刺采血法 （1）一个人固定兔子用两腿夹住兔子的两条后腿，两手握住两前腿，使家兔前胸尽量向前突。 （2）用剪刀去左前胸的毛，以碘酒消毒，再用酒精棉球擦去碘酒。 （3）先用手指按摸心脏搏动最强部位（约在左侧胸骨的第三肋间）将针头刺入，如已刺入心脏则可见针头随心脏搏动而上下跳动，此时轻轻抽动注射器，可见血液涌出。 （4）一般家兔抽取30~50毫升仍可生存，如不需保存动 ...

简介 免疫细胞是一组不均一的细胞群体。各种特定的细胞群其细胞表面表达有各自特异的表面标志分子，利用这些特异的表面标志，可以鉴定、分离和纯化相应的细胞群。随着单克隆抗体技术的诞生和免疫标记技术（特别是荧光标记技术）的发展，以及计算机科学的应用，使利用仪器的方法检测特异的细胞膜表面分子成为可能。本章介绍的荧光激活细胞分类技术就是采用单克隆抗体技术和免疫荧光标记技术，并结合光学检测和计算机分析技术而产 ...

无论是保存还是运输，请避免反复冻融。反复冻融，冰晶会破坏抗体和重组蛋白的空间结构，导致蛋白变性形成多聚体和重组蛋白构象改变，从而降低抗体的结合能力，也加快了抗体球蛋白和重组蛋白的降解速度。抗体和重组蛋白保存得当与否，直接决定了抗体和重组蛋白的活性使用效果，如果保存得当，Immune tech的抗体和重组蛋白活性大部分都可以维持数年。 1. 收到抗体和重组蛋白后的操作 & ...

一、免疫层析技术原理 免疫层析法 (Immunochromatography)是九十年代兴起的一种基于免疫胶体金技术的快速诊断技术，实质上是蛋白质等高分子被吸附到纳米金颗粒表面的包被过程。 吸附机理可能是纳米金颗粒表面负电荷，与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而 形成牢固结合，而且吸附后不会使生物分子变性，由于金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相 ...

1、载玻片的处理： 抗原修复过程中，由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响，极易造成脱片。为保证试验的正常进行，可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂，对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下： 1.1 APES：现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中，停留20 ...

1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交瘤细胞既可产生抗体，又可无性繁殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体，由于每种抗原都有几个抗原决定簇，用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体，即多 ...

有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。 （一）用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应 ...

杂交瘤克隆化一般是指将抗体阳性孔进行克隆化。因为经过HAT筛选后的杂交瘤克隆不能保证一个孔内只有一个克隆。在实际工作中，可能会有数个甚至更多的克隆，可能包括抗体分泌细胞、抗体非分泌细胞、所需要的抗体（特异性抗体）分泌细胞和其它无关抗体的分泌细胞。要想将这些细胞彼此分开就需要克隆化。克隆化的原则是，对于检测抗体阳性的杂交克隆尽早进行克隆化，否则抗体分泌的细胞会被抗体非分泌的细胞所抑制 ...

杂交瘤克隆化一般是指将抗体阳性孔进行克隆化。因为经过HAT筛选后的杂交瘤克隆不能保证一个孔内只有一个克隆。在实际工作中，可能会有数个甚至更多的克隆，可能包括抗体分泌细胞、抗体非分泌细胞、所需要的抗体（特异性抗体）分泌细胞和其它无关抗体的分泌细胞。要想将这些细胞彼此分开就需要克隆化。克隆化的原则是，对于检测抗体阳性的杂交克隆尽早进行克隆化，否则抗体分泌的细胞会被抗体非分泌的细胞所抑制，因为抗体非分 ...

前言 免疫印迹法是一种对生物样本中的特异性蛋白进行检测分析的技术，是检测蛋白特异性、表达与分布的最常用方法。但是传统操作难以满足实验室高通量，规范化的检测要求。因此为适应临床诊断的需求，新的印迹法技术被不断的探索和发展。欧蒙作为全球血清学诊断领域的领导者，经过多年的探索和完善，提出了一套完整的免疫印迹法检测自动化解决方案，这大大提高了免疫印迹法检测的效率，实现了免疫印迹法检测结果的标准化判读和评 ...