细胞技术

cdduanshui 谢谢斑竹和各位老师一直以来的帮助，在你们的帮助下我少走了很多弯路，还是提一个可能内行人会觉得很傻的问题：ras通路激活后最终是作用在哪里?就如这张图片上，如果是激活抑凋亡，那细胞是通过什么方法来抑制凋亡的？书上只讲了细胞质机构的改变，不是很明白。就比如说会不会最终作用于微丝或是微管等细胞骨架的?或者还有那些所谓的细胞质机构？麻烦老师讲一下，谢谢吴佰霖 的确，目前很多信号通路图能把一个完整的关键分 ...

zcx7792 哪些人和小鼠的肿瘤细胞系表达TLR4,MYD88,TBK1？哪位高手知道？不甚感激。zcx7792 自己顶一下lagopsis SKOV3livelyding 胰腺癌细胞株zcx7792 非常感谢二位本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

zoufly 初步实验知道了药物对细胞的增殖有抑制作用，接下来如何知道药物对细胞的这种作用是通过信号转导的哪一条通路发生作用的？是不是先用通路的信号转导的工具药先实验的？然后再做磷酸化蛋白的表达？如何是这样的话，哪里可以找到比较全的工具药名字？（是不是要激动剂和拮抗剂一起使用）。zoufly 怎么没有人回复，指点我一下？ronaldo_zj 楼主您好，我也是做药物对肿瘤细胞的增殖抑制作用的，对于您的问题，我有以下理解：1.既 ...

manlyboy 各位战友，由于实验需要；急需人甲状腺癌细胞株：我查到的国内的细胞库里面有的就SW579（人甲状腺鳞癌细胞株）和TT细胞（人甲状腺髓样癌细胞），有点儿贵，还没买。不知道各位战友有没有养人甲状腺癌细胞株的？其他的人甲状腺癌细胞株也行，越多越好。因为实验中还要对细胞筛选，看哪株细胞能够符合下面实验的要求。如果有，可以联系我，最好是北京地区，方便快捷，非常感谢。无论是购买或是合作都可以，我们这里也有我们实验室主 ...

zhanghai123 大家好！我最近在做一种GPCR的信号通路的分析目前能够确定的是我的这种受体在我所用的细胞系中是与Gαi相偶联，以前公认是与Gq相偶联，然后我用H89处理细胞，确定PKA 参与其中的调控。可是，我用环腺苷酸环化酶抑制剂SQ22536处理，却没有发现能够干预这条通路。目前公认的PKA是cAMP依赖的一种激酶，可是现在的结果却是矛盾的。我想问一下大家：是否存在不依赖cAMP的PKA的活化方式？谢谢！ ...

baibai17 今天开题，导师问了个问题：ki67为什么叫ki67？当场傻住······恳请各位老师指教！谢谢。keavin521 The Ki-67 protein was originally defined by the prototype monoclonal antibody Ki-67 (Gerdes et al., 1983),which was generated by immunizing mice with nucleiof the Hodgkin lymphoma cell line L428. The name is de ...

两只小密封 不好意思，刚开始新的研究方向，涉及到要用基因敲除小鼠模型。有若干不懂的名词求助：除题目上的问题外，还有类似Egr2 f/f CD4 -/- (右上角的f和-分别代表什么意思呀？有时候还是+/-)。不知道我得问题大家看懂了没有。。。。。实在是汗。在线等答案。谢谢啦！！laddcat123 Egr2 f/f CD4 -/-:f代表是条件性沉默，利用Cre蛋白可以使其沉默-当然就是不表达woxingwosu 补充一下，cre-loxp是目前比较常用的基因敲除的办 ...

hp26695 转录因子只结合在DNA正链上，不结合在互补链上吗？谢谢我做启动子区多态性分析，发现T-C碱基转换后用软件预测发现在正链上无转录因子结合位点，对应的互补链上有woxingwosu 有这么一说吗？转录因子识别的位点应该可以是双链DNA吧?主要还是结合在有比较大的凹槽部位使得蛋白有空间进入结合区域就可以了。吴佰霖 与基因的转录方向一致但是记得双链是互补的，本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资 ...

fengbozhang 各位大侠：最近投了一个paper，是关于一个细胞因子激活STAT1通路，抑制ERK1/2通路而抑制肿瘤细胞生长的。老外的回修意见中，要求我做一个简单的小示意图，来说明作用信号传导通路。本人检索众多文献，发现无论STAT1还是ERK1/2，都很复杂，设计到很多的分子、染色体等，这个图该怎么简单说明一下呢？本人是搞临床的，弄这个东西实在很挠头啊！**高招！kern6549 审稿人的意思应该是让你做一个你 ...

cdduanshui 请教各位老师，myosin 2 和 nonmuscle myosin2有何区别？有没有人做这个的，能否提供一些资料，谢谢。cdduanshui 自己顶一下，希望各位老师帮忙zhujoker Myosin II (also known as conventional myosin) is the best-studied example of these properties.Myosin II contains two heavy chains, each about 2000 amino acids in l ...

miaoduan 刚刚开始做信号通路，激活和阻断后测相关分子1、阻断剂配成需要浓度，加入六孔板，一小时后把所需激动剂贮存液直接加到六孔板中（感觉这样会浓度不均），24小时后检测2、阻断剂配成需要浓度，加入六孔板，一小时后去除，配好同时含有阻断剂和激动剂的工作液，加入各孔，24小时后检测3、阻断剂配成需要浓度，加入六孔板，一小时后去除，加入配好的所需浓度的激动剂工作液（不含阻断剂），24小时后检测不知说清楚了没，这三种方法 ...

jyy6223405 kern6549 你想问什么？jyy6223405 怎样用流式细胞仪测定p-ERK1/2jyy6223405 具体的操作步骤kern6549 1、制备样品的单细胞悬液。2、4%多聚甲醛固定细胞。3、打孔剂处理细胞在细胞膜上打孔。4、标记荧光素偶联的抗p-ERK1/2抗体。5、流式上样分析。yaojun2006whu 可参考下面http://signal.dxy.cn/bbs/topic/18528145?tpg=1&age=0 ...

霍一刀hxs 有没有一种基因数据库，输入癌症类别，即可以预测或查询出与此癌症相关的基因？多谢。吴佰霖 可能要多看综述了霍一刀hxs 吴佰霖 wrote:可能要多看综述了希望以后研究比较深了，可以有人建立这么一个数据库。suiyi223 可以参考美国NCCN指南，或者国内一些癌症相关的基因检测公司的说明书，不是很科研，但是还是可以一读的。例如广州益善公司霍一刀hxs suiyi223 wrote:可以参考美国NCCN指南，或者国内一些癌症 ...

yangjing87 小妹真心求教：我用尼日利亚菌素配测细胞内pHi的标准溶液，想请教如何配制母液？我查了说明书也问了公司，nigericin溶于乙醇甲醇，完全不溶于水，没有测试过溶不溶于DMSO。因为我做的是活细胞，乙醇甲醇什么的对细胞有影响，都不能用啊。我真心请教这个可以用什么溶啊？多谢各位了everywhere 同问。我也打算用这东西，请高人帮忙。young名 可以溶于DMSO。soluble in chloroform , Alc ...

yongliangwang102 心肌组织中cAMP含量测定，请问哪位同学或老师做过？如何提取心肌组织cAMP？注意事项有哪些？谢谢！meiying3061 我要测细胞培养基内的CAMP，我也不会呢，你知道了，可不可以告诉我啊圆圆痴 楼主有没有找到好方法呀，分享一下拉！！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

谁似我醉扬州 我做的是与wnt信号通路有关的，想了解某种药物诱导成骨是否和wnt信号通路有关，如果加药后β-catenin，LEF、CyclinD增加可否说明wnt信号通路被激活？β-catenin用的是western blot方法测定核内的，LEF、CyclinD用的是PCR的方法，这样设计实验合理吗？各位高手请帮帮忙，谢谢！谁似我醉扬州 怎么没人回答呢？丁香园不是很多高手吗？自己顶！ghy0601 现在所谓的核蛋白提取试剂盒 ...

hexi1985 各位战友，我想请教下PD98059使用问题。本人准备做大鼠动物实验，使用PD98059干预，但是参照文献都说1mg/kg溶解于DMSO中，分装保存，用时再用PBS稀释。可是文献里又提到DMSO浓度不超过0.1%容积比率。如果我按照文献以1mgPD溶解于1ml纯DMSO中，再稀释稀释1000倍来达到DMSO的0.1%浓度，就根本达不到我想要的50微mol/l的终浓度了，而且总的液体量达到1升，每只大鼠我 ...

zhaozhuozhao 各位老师，MAPK抑制剂如何使用，是在刺激因子之前预孵育一段时间后弃去再加刺激or在刺激因子之前预孵育一段时间不弃去直接加刺激orS直接与刺激共孵育？感谢您的解答，谢谢！kern6549 同时加就可以。zhaozhuozhao 请问一下哪种效果更好呢？因为我的刺激要持续24h，我怕先用抑制剂孵育完后弃去再加刺激24h，抑制剂的作用早就没了，您说呢？kern6549 不是说了同时加吗？zhaozhuo ...

tianjiaoya PJ694α (MATa trp1-901 leu2-3,112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2 ∷GAL1-HIS3, GAL2-ADE2, met2∷GAL7-lacZ).gingivalis Check here:http://www.yeastgenome.org/alleletable.shtml%22dnazyme 对，分段查看就懂了，例如，MATa是结合型， Δ意味着缺失突变。本文由丁香园论坛提供，想了解更多 ...

whiteswan 本人按文章要求，将1mg SP600125溶于125ul DMSO成透明溶液，然后将上述125ul溶液添加于1375ul PBS,有絮状沉淀析出，请高手帮忙指点解决该沉淀析出问题，谢谢！whiteswan 似乎应该xiemengxipan 请问楼主的实验做完了没，能否传授点经验给我呀，我也在做这个实验，方便的话留个QQ交流下。不安分得土壤 xiemengxipan wrote:请问楼主的实验做完了没，能否传授点经验给我呀 ...