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        【求助】关于GPCR 与PKA 信号通路

        丁香园论坛

        3757
        大家好!我最近在做一种GPCR的信号通路的分析
        目前能够确定的是我的这种受体在我所用的细胞系中是与Gαi相偶联,以前公认是与Gq相偶联,
        然后我用H89处理细胞,确定PKA 参与其中的调控。
        可是,我用环腺苷酸环化酶抑制剂SQ22536处理,却没有发现能够干预这条通路。
        目前公认的PKA是cAMP依赖的一种激酶,可是现在的结果却是矛盾的。
        我想问一下大家:是否存在不依赖cAMP的PKA的活化方式?
        谢谢!
        没人帮忙吗?
        求高人相助!
        有没有直接抑制PKA的方法呢?
        如果有的话,直接抑制PKA试试!
        H89就是PKA的抑制剂啊
        请问有高手相助吗?
        很多情况下H89能起到作用而其他PKA抑制剂如KT5720和上面的SQ22536都不起作用,这种现象很普遍,我们实验室就遇到几个受体都这样,具体什么原因还真不好说,需要再进一步探讨一下,不过H89是用的最多的PKA抑制剂。
        其实H89特异性不强。除了抑制PKA,还能抑制PKB和PKC,抑制率是PKA的1/10

        楼上的受体试验我看有点危险。

        本帖子请求加分。
        除了H89,我还用了另一种PKA的抑制剂,RP-cAMP,结果也是一样的,可以抑制。
        用咯利浦蓝处理下??
        我觉得你最好用forskolin或者rolipram处理下,看有没有协同上升?

        这个帖子也请求加分。

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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