【求助】关于GPCR 与PKA 信号通路
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大家好！我最近在做一种GPCR的信号通路的分析
目前能够确定的是我的这种受体在我所用的细胞系中是与Gαi相偶联，以前公认是与Gq相偶联，
然后我用H89处理细胞，确定PKA 参与其中的调控。
可是，我用环腺苷酸环化酶抑制剂SQ22536处理，却没有发现能够干预这条通路。
目前公认的PKA是cAMP依赖的一种激酶，可是现在的结果却是矛盾的。
我想问一下大家：是否存在不依赖cAMP的PKA的活化方式？
谢谢！
目前能够确定的是我的这种受体在我所用的细胞系中是与Gαi相偶联，以前公认是与Gq相偶联，
然后我用H89处理细胞，确定PKA 参与其中的调控。
可是，我用环腺苷酸环化酶抑制剂SQ22536处理，却没有发现能够干预这条通路。
目前公认的PKA是cAMP依赖的一种激酶，可是现在的结果却是矛盾的。
我想问一下大家：是否存在不依赖cAMP的PKA的活化方式？
谢谢！
没人帮忙吗？
求高人相助！
求高人相助！
有没有直接抑制PKA的方法呢？
如果有的话，直接抑制PKA试试！
如果有的话，直接抑制PKA试试！
H89就是PKA的抑制剂啊
请问有高手相助吗？
很多情况下H89能起到作用而其他PKA抑制剂如KT5720和上面的SQ22536都不起作用，这种现象很普遍，我们实验室就遇到几个受体都这样，具体什么原因还真不好说，需要再进一步探讨一下，不过H89是用的最多的PKA抑制剂。
其实H89特异性不强。除了抑制PKA，还能抑制PKB和PKC，抑制率是PKA的1/10
楼上的受体试验我看有点危险。
本帖子请求加分。
楼上的受体试验我看有点危险。
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除了H89，我还用了另一种PKA的抑制剂，RP-cAMP，结果也是一样的，可以抑制。
用咯利浦蓝处理下？？
我觉得你最好用forskolin或者rolipram处理下，看有没有协同上升？
这个帖子也请求加分。
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