细胞技术

馃芝 求高人指点一些关于细胞凋亡的文献，最好是研究进展方面的，谢谢belovedf 细胞凋亡，好广的范围，最近我也在关注这方面，因为我的导师的方向之一也是细胞凋亡。问到我具体的研究方向就把我问倒了。昨天听了丁树哲教授有关运动适应的信号传导研究进展，其中有涉及一些细胞凋亡信号途径http://news.dxy.cn/bbs/topic/18108752?tpg=1&age=0抗凋亡诱导抗肿瘤请问您是体外培养细胞，研究细胞凋亡，还 ...

liufengxi 我用PEI（sigma 25kDa）作为转染试剂，但是发现，同样的细胞，同样的N/P 条件下。转染效果一次比一次要差，难道是PEI容易在水性条件下降解？我们的这个PEI买的时间比较久了，不知道是不是该买新的了。一直找不出原因，很是郁闷，请大虾帮忙解答，dafang0212 PEI粉末放置久了后，是会出现转染效率变差的状况的。另外不知道你的PEI用做转染前有进行加热处理吗？PEI在4度或者-20中放置一段时间后会 ...

大鱼1044 本人是新手，想请教一下各位老师或者高手关于用DMSO溶解sp600125的相关问题。一、sp600125是固体，无法准确称取想要的剂量，如何用DMSO配置一定浓度的母液呢二、sp600125的保存温度为-20°，而且它属于MAPK抑制剂，而DMSO在常温下才呈现液体状，我将-20°保存的sp600125 加入在室温的DMSO中sp600125 会不会就已经完全变性了呢，整个过程是否需要低温操作呢？如果低温操作， ...

coldwar911 原代细胞先用无血清DMEM孵育了24小时然后，然后实验组按不同的干预时间加入药物，理论上该药物应该能激活ERK通路，但WB结果竟然显示空白对照组的p-ERK 含量最高，比实验组还高，请问有没有大侠能解释？coldwar911 Thanks, I'll try.sadieshen 我也有相同困难，饥饿时间是不是不能太久本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好 ...

cpuyao 请教大家一个问题，我在药物处理后测定细胞的周期，随着药物浓度的增加，G2/M期比例增加（明显，浓度依赖），S期几乎没有变化，而G1期比例减少。是不是说明细胞阻滞在G2/M期？但是G1期和S期的现象怎么解释呢？随后我们测了凋亡，证明药物可以促进细胞凋亡，这些需要怎么联系到一起呢，第一次做，有好多不明白的地方，希望研究周期和凋亡的战友们帮忙分析一下，有没有哪些相关的文献？谢谢大家~xiaohuilang 细胞周期被 ...

bin1986 最近在做凋亡，在用凯基的caspase-3分光光度法试剂盒检测细胞经过与药物孵育24小时后检测用酶标仪检测，OD值在0.1-0.3之间，有一定浓度依赖，高浓度下caspase-3的活化程度有差不多4问题在于，我用BCA蛋白定量得到的蛋白浓度时30多ug/ul，我加了有250ug，如果按照说明书的话，这个OD值应该在1左右，而我的最高才0.3.另外我的control孔（没加药）与我最低浓度的值差不多。问题 1. 我 ...

小嘴鱼 问了几家现在都不做MLPA，不知哪家公司现在还做MLPA探针和检测，费用大概多少biolinkphilic 我帮你咨询一下佰而林生物做不做吧tianjia19851985 多重连接探针扩增（MLPA）技术服务:厦门基科生物科技有限公司竭诚为您提供MLPA探针设计、高纯度MLPA探针合成等服务。厦门基科生物科技有限公司可以按照您的实验需求个性定制MLPA实验方案。为您建立自己的一套MLPA体系。可联系0592-2 ...

ez815 各位战友，请问gastrin怎么溶解？我买了想加在细胞培养液中，但不知道粉末怎么溶解？急呀！紧急求助！在此谢过！zhujoker http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=gastrin看看人家是怎么做的？kuailecaoyang 请问一下问问题的战友已经知道怎么溶解了吗，gastrin？我也想做，但是也不知道如何溶解。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷 ...

yesezhizhong 小弟购买的是SIGMA的3MA，50mg/瓶，拟配制工作液浓度1.5mg/ml, 不知道该3MA的母液该如何配制？用什么溶解？该如何保存？请高手指点！万分感谢！！chp_cn This product is soluble in DMF (10 mg/ml, may require gentle heating), yielding a clear, colorless solution. It is also soluble in water, 95% ethanol, or 1 N NaOH at 30 mg/ml with he ...

hhx111 我在做转录因子的入核情况，可是从IFA结果来看，有部分入核，可是还有没有入核的，那么有什么方法可以计算入核的比例吗？在一篇文献中看到有用“散点分析软件”来分析比例的。求助高人指点？ronaldo_zj 个人觉得所谓的“散点分析软件”不是很靠谱，因为毕竟免疫荧光只能做到定性，用免疫荧光来定量是有争议的，现在很多杂志都不是很承认单一的免疫荧光来定量。我建议楼主可以这样：1. 分别提取总蛋白，核蛋白和细胞质蛋白来分析转 ...

einsteininchina 军事医学科学院-微生物流行研究所-分析微生物实验室 招收联合培养研究生实验室：军事医学科学院-微生物流行研究所-分析微生物实验室，是“病原微生物生物安全国家重点实验室”的组成部分。地址：北京丰台东大街。招收形式：联合培养硕士或博士生，签署官方的联合培养协议；学生本人必须与母校导师事先协调好。要求专业背景：生物、医学、农业相关专业研究课题：课题在我们实验室做，做我们的课题。回原学校毕业。主要研究内 ...

dentist昭安 买的信号通路抑制剂（PDTC，LY294002，SB203580），用之前是不是一般都需要做个细胞活力检测的？如台盼蓝或MTT？做MTT的话，一般是设几个不同的浓度组，作用一定时间（24h?）后检测？是这样设计的吗？那不同的抑制剂浓度分组一般选择哪几个浓度呢？是按说明书规定的作用范围在其中选择几个组，还是参考文献？但这方面类似文献看到的好像不是很多，感觉别人一般都不做或者不把其作为结果放上去，所以也 ...

dentist昭安 我刚买了几个信号通路的特异性抑制剂，分别是NF-кB(PDTC)、PI3K/Akt (LY294002）、 p38 MAPK (SB203580) ；看说明书，PDTC的分子量是164.29，PDTC可溶于水(1mg/ml)，在DMSO中的溶解度可达到100mM； LY294002 的分子量是307.3，1mg用DMSO配制，浓度为10mg/ml，共0.1ml ；SB203580 的分子量是377.43，1mg用DMSO配制，浓度为20mg/ ...

海晏清雨 我做了PD98059的MTT实验，细胞是间充质干细胞C3H10T1/2，可是结果很奇怪，居然是促增殖的，加药组明显比对照组OD值大，药物浓度是10uM，50uM，100uM，150uM，怎么会这样呢，请教各位！海晏清雨 PD98059处理细胞一般多久，48h可以吗，有人说几个小时就行了，48h的话药物已经失效了，可是我看了很多文献有处理48h的，但不清楚为什么会促增殖，求教各位了！chp_cn PD98059可以抑制M ...

beebeeliang 大家好！最近我在做EMT 方面的研究，遇到一些问题，请大家给点意见。在TGFb诱导细胞EMT的试验中，有的文章是在无血清培养基中进行的，有的则是在10％FBS培养基中进行的。相信大家看文章都会发现这一点。不知两者有何利弊？请高手分析一下！万分感激。zfv2007 其实大多数TGFb诱导EMT实验中，所谓的无血清培养基都是包含0.5%FBS的培养基。严格的EMT要排除细胞增殖对实验的影响，往往需要细胞生 ...

chengyi1228 各位前辈，我准备做内质网应激通路eIF2a、P-eIF2a两个蛋白的 Western blot。请问谁有这方面经验可以交流一下么？对细胞处理后多久提P-eIF2a蛋白比较合适呢？谢谢~batiwangna 内质网应激比较急，具体时间自己摸索，不过建议不要超过24h辉辉8916 请问你们还做内质网应激的其他通路吗？像ATF6的检测，是用全蛋白还是核蛋白？冒泡的快快 我也需要做这个，我导师让我做一个时间梯度，15分钟 ...

紫色云龙 本人初做细胞，想各位大虾多多指教。不胜感激。目前的课题做wista大鼠肾上腺细胞原代培养，（也可以做人肾上腺细胞，可以买的到，考虑到没有经验，加上大鼠肾上腺提取也可以做）。试 剂：hank‘s缓冲液（漂洗用），培养基【DMEM/F12，gibco胎牛血清（用10%），双抗（青链）（用1%）】，胰酶（用大概0.1%），胶原酶1型（用0.1%），透明质酸酶（未到货）主要仪器:常规东西（枪头，酒精灯，打火机等），3套取材器械，400目不锈钢网筛，5 ...

七叶禾0916 想要将细胞培养板重复利用，要怎样处理呢，有人说用酸泡过夜，再用自来水和蒸馏水冲，再用酒精浸泡过夜，再紫外灭菌2h，不知应该用什么酸泡，这样处理效果怎样？求高手指教！！！wendywan 可以用酸泡一夜，然后单蒸水冲掉酸，后双蒸水冲至少三遍以上，这是最少的。然后紫外灭菌，时间可以长一些，放在超净台里照着就好了。酸一般可以用浓硫酸加重铬酸钾，比例在网上查一下就可以了！完了之后，可以在用之前重新包被板子，这样的话，效 ...

minlei219 如题：经过构建的稳定转染细胞株，含有GFP的，但是荧光并不是100%有，怀疑荧光是稳定表达的吗？会丢失吗？如果丢失的话，原理是什么啊？谢谢谢谢。minlei219 说明一下，细胞是购买的，应该是筛选过的slytjiaofei 稳定转染GFP细胞株只能保证GFP整合入了细胞基因组，但是整合的位置可能并不完全相同，由于转基因往往存在位置效应，所以有的细胞可以表达GFP，但有的细胞虽然也整合了GFP基因，但并不 ...

chengyang2872 各位师兄师姐好！我是一名刚刚开始做实验不久的研究生，只知道做PCR。我的导师说他的课题想测β-catenin（WNT通路）在肝癌细胞中表达的量，要用流式细胞术测，交给我做。可是我没有接触过这类的东西，所以想请教一下师兄师姐，β-catenin这个蛋白是存在于细胞核内，还是在细胞质中，还是分泌到细胞外？ 另外我用流式细胞术应该怎么测试这个蛋白？或者有没有哪位师兄师姐有这方面的资料，可以传给我的，感 ...