PCR技术

分子生物学在医学领域中的应用越来越广泛，基因突变在肿瘤和遗传病的发生过程中的作用也日益受到重视，因此检测与遗传病及恶 性肿瘤发生有关的突变基因(mutant gene)也成为了分子生物学，医学遗传学以及肿瘤学研究 中的热点。基因突变（(gene mutation)是癌基因激活，抗癌基因失活以及遗传病发生的原因，从广义上讲，基因突变包括点突变，染色体突变和基因组突变等三种形式，后两种基因突变涉及的基因较多，可以通过光学显微镜分析 ...

PCR Primer Design (Methods in Molecular Biology)By Anton YuryevPublisher: Humana PressNumber Of Pages: 431Publication Date: 2007-08-02ISBN-10 / ASIN: 158829725XISBN-13 / EAN: 9781588297259Binding: HardcoverIn the past decade, molecular biology has been transformed from ...

希望各位大侠帮忙设计下CASPASE-3的REAL TIME PCR引物。以下是序列：1 atggacaaca acgaaacctc cgtggattca aaatccatta ataattttga aacaaagact61 atccatggaa gcaagtcgat ggactctgga atatatctgg acagcagtta caaaatggat121 taccctgaaa tgggcttgtg tataataatt aataataaga acttccataa aagc ...

（转贴自生物谷,http://www.bioon.com/Article_Show.asp?ArticleID=9947）科学家利用磁力来分离微量的DNA，且其准确度及速度都可以媲美PCR。自从1985年PCR诞生以来，就在众多检测DNA含量的方法（放射性标记法、荧光标记法等等）中，一跃而位居龙头的地位。不过PCR这个实验却是相当的复杂而且旷日废时，同时因为用到昂贵的酵素也使得它的价格昂贵了许多。虽然有着种种缺点，但P ...

设计的引物TM在60度左右，最重要是扩增片段要在340-355bp,谢了先FEATURES Location/Qualifierssource 1..939/organism="Mus musculus"/mol_type="mRNA"/db_xref="taxon:10090"/chromosome="3"/map="3 19.2 cM"gene 1..939/gene="Il2"/note="synonym: Il-2"/db_xref="GeneID:16183"/ ...

PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA，然后才进行自动热循环，最后进行产物鉴定与分析。引物设计与合成目前只能在少数技术力量较强的研究院、所进行，临床应用只需购买PCR检测试剂盒就可开展工作，PCR自动热循环中影响因素很多，对不同的DNA样品，PCR反应中各种成份加入量和温度循环参数均不一致。现将几种主要影响因素介绍如下。　　一、温度循环参数　　在PCR自动热循环中，最关键的因素是变性与退火的温度。如操作范例 ...

绝版分子生物学实用技术分享:I: 20 种用于各种DNA marker 制备的PLASMID:P1: 2k+1.5k+1k+800+700+600+500+400+300+200X2+100X4 (100BP ladder)P2: 3k+1.5k+1k+900+700+500+300X2 (200BP ladder 奇数)P3: 3k+2k+1.4k+1k+800+600+4X2 (200BP ladder 偶数) (P3\P4\P5 组合, 可拓展为1KB ladder)P4: 4k+2k+1.4k+1k+800+6 ...

请大家帮忙，初次接触PCR,可能问题很菜。文献提供的TF的引物为：forward, 5-CACTCATCATTGTGGGAGCAGTG-3reverse,5-CGCGACGGGGTGTTCTT-3请问１：我如何知道这对引物所对应的位点？用何方法或软件？请详细告知？我自己试了试，对不上号:(　　２．这对引物在多篇英文文献中做Real-Time RT-PCR时使用，如果我做半定量RT-PCR,可以使用吗？需要做何修改？TF的mRNA在G ...

MDR1基因C3435T多态性对重症肌无力患者环孢素血药浓度的影响Effect of MDR1 gene C3435T polymorphism on pharmacokinetics of cyclosporine A in摘要：目的 研究MDR1基因C3435T多态性与重症肌无力患者环孢素药物动力学的关系。方法 采用荧光PCR的方法对96名重症肌无力(MG)患者检测MDR1 C3435T基因型，对其中73名临床资料较全者的环孢素用药及血药检测结果与基因 ...

1 ccgcttagac aatgccccgg agccgccaga ccgtcgcgcc cctgccccat cgtagtatat61 gagctcgcct acacaaggac ccccgctaaa agccagagct cccagtcccc gaggcttgaa121 gacggggact cccttctcca ccaactctgt cctcgggggg tggggcccca gccgagatca181 cagcgcgaca ggagtggggg tggccgctgg aga ...

我是临床医生，作试验是新手，在普通PCR时就一直扩不出目的片段，很苦恼，向高手请教，以下是相关内容目标基因：NM_181755.1 GI:32455238ORIGIN：1 ggaggaggga gagagagaga agagaagaaa aagaaaaaag aacatcaata aaaagaagtc61 agatttgttc gaaatcttga ggagtcttca ggccagctcc ctgtcggatg gcttttatga121 aaaaatatct c ...

PCR--------------------------------------------------------------------------------Optimal Annealing Temperature: 54.0° (Max: 70.9°)--------------------------------------------------------------------Position Length Tm GC P.E.#--------------------------------------------------------------------Product ----- 261 83.8 44.8 44.8Upper Primer 708 21 67.9 47.6 6 ...

长非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）是一类长度大于200个核苷酸但缺乏蛋白质编码潜力的调控性RNA，其数量多，种类复杂，是近年来非编码RNA研究热点。lncRNA在真核生物基因组中广泛转录，能够与染色质修饰复合物及转录因子等多种蛋白质以及DNA或RNA相互作用，目前有功能注释的lncRNA仅有200多个，但lncRNA行使功能的方式多种多样，在生命过程的转录、调控等阶段发挥了重要的生 ...

我搜集了几个植物RT-PCR的内标,与各位共享1． 物种：拟南芥（arabidopsis）或maize2． 基因名称：18S rRNA3． 模板：cDNA4． PCR类型及目的：RT-PCR5． Forward primer (5’-3’): CCATAAACGATGCCGGAReverse primer (5’-3’): CACCACCCATAGAATCAAGAProbe: 无6． 产物长度（bp）：3507． 引物浓度：50 pmol/ul8． 退火温度：54.19． 所用仪器：PE-960010． 提交 ...

刚准备作RT-RCR， 自己设计了一个引物，烦劳各位专家指点评价mmp-2 rat基因编码1 cgggtggacc ccagggcact gccacgacct cagggtgaca cgcggagccc gggagcgcaa61 ggatggaggc acgattggtc tggggagtgc tcgtcggacc tctcagggtt ctctgcgtcc121 tgtgctgcct gctgggccag gtggacccca gggcactgcc acgacctcag ggt ...

我们试验使用的是ISOGEN 于是我就贴上来了 希望有人能看懂吧没办法啊 在日本也只能找到日文的说明ISOGEN法の原理　ISOGEN及びISOGEN-LSは、ヒト、動物、植物及び細菌からのRNA抽出用試薬である。液相分離による方法を用いており、同一試料からDNA、タンパク質も単離することが可能である。一連の操作で、RNA、DNA、タンパク質を単離できるので、貴重な試料に有効であり、また、操作が簡単なので、試料数が多い場合にも ...

【求助】operon公司引物编号为OAM08和OAN05的序列？http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=6115494&sty=1&tpg=25&age=0【求助】请问有关NAATshttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=6118459&sty=1&tpg=25&age=0【求助】real－time PCR试剂盒http://www.dxy.cn/bbs/post ...

微孔板夹心杂交法颜色互补分析法PCR-ELISA法PCR-OLA法PCR-打点杂交法微孔板夹心杂交法：　　该法是通过一固定于微孔板的捕获探针与PCR产物的某一区域特 异杂交使产物的间接地固定于微孔板上，然后，再用一生物素 等非放射性标记物标记的检测探针与产物的另一特异性较一次 杂交，漂洗后显色即可判断结果。该法需要两个杂交过程来检测 一个产物，因此，其特异性较一次杂交的检测法高。该法已用于HBV 的检测，其敏感度可达5个HBVDNA分 ...

引物设计时3’端末位碱基的问题，有多种版本：1、《PCR Cloning protocols》P20： Primers should end (3') in a G or C, or CG or GC，this prevents “breathing” of ends and increases efficiency of priming。2、《分子克隆》第3版P608：如果可能的话，每个引物的3‘端碱基应为C或G，但不推荐使用――NNGC或NNCG，引物末端碱基GC高的自由能可促进发夹结构的形成，还可产生引物二聚 ...

基康生物TaqMan-MGB双标记荧光探针合成TaqMan-MGB 探针与传统的TaqMan-TAMRA探针比较具有以下优势：1. 提高TM值— 平均15bases可提高18℃，这样可以使探针的长度缩短，尤其对AT含量高的序列设计有很大的帮助，并且提高配对与非配对模板间的TM值差异。2.提高信噪比— 由于在探针的3’端的淬灭基团为不发光的荧光基团，并且与报告基因在空间的位置更接近，实验结果更精确，分辨率更高。3. 更简化实验— MGB探针实 ...