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        比PCR更快、更准(文章转载)

        丁香园论坛

        1090

        (转贴自生物谷,http://www.bioon.com/Article_Show.asp?ArticleID=9947)

        科学家利用磁力来分离微量的DNA,且其准确度及速度都可以媲美PCR。

        自从1985年PCR诞生以来,就在众多检测DNA含量的方法(放射性标记法、荧光标记法等等)中,一跃而位居龙头的地位。不过PCR这个实验却是相当的复杂而且旷日废时,同时因为用到昂贵的酵素也使得它的价格昂贵了许多。虽然有着种种缺点,但PCR灵敏度之高是其它方法所不能企及的。

        美国西北大学的化学家Chad Mirkin 及其同事发展出一个可以侦测微量DNA的方法。他们制造了两种微球,一种是以黄金为核心,称为NPs;另一种则是氧化铁为核心,称为MMPs。NPs上附有特定的条形码DNA以及能与目标DNA
        相配对的配对DNA。MMPs上也附有一段配对DNA,不过它所能辨识的部分与NPs上的并不相同。 将样品与这两种微球混合之后,NPs会和MMPs协力抓住目标DNA的两端,接着再以磁力将没有与目标DNA反应的NPs与其它珠子分开,最后收集条形码DNA进行检测。因为条形码DNA的数量比配对DNA要来得多,所以在这个部分就等同于PCR中以酵素来增加目标DNA数量,不过因为这个方法不需要用到酵素,所以可以避免酵素在工作过程中难免会犯的错误。

        这个方法的灵敏度高达10的负21次方摩尔浓度,即是在30μL(μ=10的负六次方)的样品中,仅含有10条DNA在里面。另外,这个方法还可以用来侦测单个碱基的不同,而且也容许在同一个样品中同时检测不同的DNA。Chad Mirkin表示这个方法不管样品的浓度多少都可以在3~4个小时以内完成,并且耗费比PCR便宜许多,也很容易上手。 Chad Mirkin等人已在去年的 Science上发表过使用这个方法来测量蛋白质的数量,也许哪一天就会像Emory University的化学家Shyming Nie 所认为的,可以利用这个方法取代传统用来检测DNA、RNA、蛋白质那复杂昂贵又费时的手续呢。
        原文:
        Jwa-Min Nam, Savka I. Stoeva, and Chad A. Mirkin.
        Bio-Bar-Code-Based DNA Detection with PCR-like Sensitivity.
        Journal of the American Chemical Society,Web Release Date:
        27-Apr-2004; (Communication) DOI: 10.1021/ja049384+

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