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        酪蛋白激酶

        相关实验:用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物:

        5X 酪蛋白激酶分析缓冲液                            4 μl  

        β-酪蛋白                                                     1 μl

        [γ-32P] ATP(终浓度 5 μCi/5 μmol/L ATP)   1 μl

        水(取决于下一步所加的激酶样品的量)       0~14 μl

        10 mg/ml β-酪蛋白储存液

        5X 酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ分析缓冲液:

        100 mmol/L Tris-HCl,30℃ 时(pH 7.5)

        25 mmol/L MgCl2

        2.5 mmol/L DTT

        750 mmol/L KCl

        2. 加入 1~14 μl 激酶样品开始反应。

        3. 于 30℃ 继续反应一定时间。

        4. 分析反应产物。

        来源:丁香实验

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