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北京青莲百奥生物科技有限公司
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棕榈酰化蛋白组学
棕榈酰化修饰是一种最普遍且可逆的蛋白质翻译后脂质修饰的重要形式，是调控蛋白质的转运、稳定、定位和功能的重要机制，同时，棕榈酰化修饰还参与多种细胞生物学进程，与许多疾病的发生发展密切相关。
技术介绍
蛋白质棕榈酰化修饰有为两种类型：
（1）半胱氨酸的S端通过不稳定的硫酯键连接到Cys，较为常见且可逆；
（2）半胱氨酸额N端通过稳定的酰胺键连接到Cys和Gly，不可逆。所以棕榈酰化修饰通常指的是S-棕榈酰化。
依赖ABE方法（酰基-生物素基交换化学）从复杂蛋白中纯化鉴定棕榈酰化蛋白（即S-酰化蛋白）。先用N-乙基马来酰亚胺（NEM）封闭游离的硫醇，再用羟胺（HA）切断半胱氨酸-棕榈酰硫酯的键，最后用与巯基反应的生物素标记试剂标记由HA切割后新暴露的硫醇，从而鉴定出棕榈酰化修饰的蛋白。
实验流程图
应用方向
基础医学、临床诊断：生物标志物的筛选，发病机制，疾病治疗等生物医药：药物作用机理，药效评价，药物开发等
农业生产：植株定向筛选，植物抗逆，作物品种优化等
食品营养：食品组份及品质鉴定，功能性食品开发，食品安全检测等
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文献和实验重点解析： Ø 机制研究的常规套路以及升华的方式方法 Ø 机制研究由小变大升华的案例解析
觉得蛋白组学是未来科研的重要领域，所以关注了一下，请各位战友补充啊！！ :I:I:I:I:P:P:P:P 蛋白组学概述 http://www.dxy.cn/bbs/thread/840484 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=2168890&sty=3&keywords=%B5%B0%B0%D7%D6%CA%D7%E9 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=2051771&sty
胶上酶切方法 1． 用1.5mm3切胶笔切下胶点，置于96孔板或1.5ml Appendorf试管中。 2． 用50ul双蒸水洗2次，每次10分钟（如用1.5ml试管, 则用500ul）。 3． 加考染胶色液（50mM NH4HCO3/CH3CN(1:1)）50ul，超声脱色5分钟或37℃ 20分钟，吸干。（若为银染胶点，可以不脱色，也可以加15mM K3Fe(CN)6/50mM Na2S2O3轻摇至变为淡黄色透明，再用水反复洗至无色）。 4． 重复步骤３，至蓝色褪去。 5．
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