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北京青莲百奥生物科技有限公司
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胶点胶条鉴定
利用HPLC-MS/MS蛋白鉴定技术对胶条样本(即SDS-PAGE样本)、IP、co-IP、Pull-donw等复杂样本进行鉴定。
技术原理
HPLC-MS/MS高效液相色谱一质谱联用技术,以液相色谱作为分离技术,质谱作为检测系统。 蛋白样品西酶解的肽段在HPLC中分离后再进入质谱进行离子化然后经过质谱质量分析器将离子碎片按质量数分 开,经检测器得到谱图,液质联用体现了色谱和质谱的优势互补,将色谱对复杂样品的高分离能力,与Ms具有高选择性、高灵敏性及能够提供相对分子质量与结果信息的优点结合起来,在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域的到了广泛的应用。

HPLC-MS/MS流程图
技术优势
适合复杂样品的蛋白鉴定,如相互作用洗脱的蛋白混合液、胶条等周期短,通量高
应用范围
相互作用蛋白复合体或多肽的鉴定
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文献和实验蛋白质点的鉴定 以质谱技术为基础的蛋白质鉴定技术,由于其灵敏度高(可以达到皮摩尔)、速度快、易实现自动化已经成为蛋白质组研究中主要的蛋白质鉴定技术。将胶上蛋白质点进行蛋白酶切、回收酶切肽段后,采用MALDI―TOF―MS测定肽质量指纹谱(peptide mapping fingerprint,PMF),或采用电喷雾串联质谱(ESI―MS―MS)测定肽序列,分别进行数据库检索,实现蛋白质的鉴定。如果是蛋白质数据库中不存在的蛋白质,还可以通过特定的检索程序进行基因数据库的分析检索
基于质谱的蛋白质鉴定,第6节:MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
Velos质谱仪,以及AB SCIEX的6500 Q TRAP质谱仪,结合 Nano-LC高通量液相色谱技术,能够对SDS-PAGE蛋白条带、2D蛋白胶点等样品中的蛋白质进行高效精准鉴定。胶条、胶点蛋白质谱鉴定服务可保证100%的鉴定率,否则不收任何费用。 文献参考:Protein identification methods in proteomics. Electrophoresis, 2000.
的复杂性,采用激光捕获显微切割技术以更为精确的分离需要的组织和细胞,固相化 pH 胶条和窄范围的 pH 胶条的使用可以分离到更多的蛋白质点,荧光染料的使用使得蛋白质的分离更加准确可靠,切胶和酶解的自动化减少了样品操作过程中角蛋白的污染。技术方面,二维色谱(2D-LC),二维毛细管电泳(2D-CE),液相色谱-毛细管电泳(LC-CE)等新型分离技术都是目前发展的主要方向。另一种策略是以质谱技术为核心,直接鉴定全蛋白质组混合酶解产物。随着对大规模蛋白质组相互作用研究的重视,发展高通量和高精度的蛋白质相互
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