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- 2026年01月23日
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北京青莲百奥生物科技有限公司
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胶点胶条鉴定
利用HPLC-MS/MS蛋白鉴定技术对胶条样本（即SDS-PAGE样本）、IP、co-IP、Pull-donw等复杂样本进行鉴定。
技术原理
HPLC-MS/MS高效液相色谱一质谱联用技术,以液相色谱作为分离技术,质谱作为检测系统。 蛋白样品西酶解的肽段在HPLC中分离后再进入质谱进行离子化然后经过质谱质量分析器将离子碎片按质量数分 开,经检测器得到谱图,液质联用体现了色谱和质谱的优势互补,将色谱对复杂样品的高分离能力,与Ms具有高选择性、高灵敏性及能够提供相对分子质量与结果信息的优点结合起来,在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域的到了广泛的应用。
HPLC-MS/MS流程图
技术优势
适合复杂样品的蛋白鉴定，如相互作用洗脱的蛋白混合液、胶条等周期短，通量高
应用范围
相互作用蛋白复合体或多肽的鉴定
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文献和实验蛋白质点的鉴定 以质谱技术为基础的蛋白质鉴定技术，由于其灵敏度高(可以达到皮摩尔)、速度快、易实现自动化已经成为蛋白质组研究中主要的蛋白质鉴定技术。将胶上蛋白质点进行蛋白酶切、回收酶切肽段后，采用MALDI―TOF―MS测定肽质量指纹谱(peptide mapping fingerprint，PMF)，或采用电喷雾串联质谱(ESI―MS―MS)测定肽序列，分别进行数据库检索，实现蛋白质的鉴定。如果是蛋白质数据库中不存在的蛋白质，还可以通过特定的检索程序进行基因数据库的分析检索
基于质谱的蛋白质鉴定，第6节：MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
Velos质谱仪，以及AB SCIEX的6500 Q TRAP质谱仪，结合 Nano-LC高通量液相色谱技术，能够对SDS-PAGE蛋白条带、2D蛋白胶点等样品中的蛋白质进行高效精准鉴定。胶条、胶点蛋白质谱鉴定服务可保证100%的鉴定率，否则不收任何费用。 文献参考：Protein identification methods in proteomics. Electrophoresis, 2000.
有些部位的聚合剂浓度过高，聚合相对较快造成胶不平。 4) 稍微注意手法，均匀加入。 5) 灌胶后应该用水或者正丁醇压胶面。 6) 边缘胶是不容易聚合完全的，灌完胶后要立即加无水正丁醇覆盖，浓度越低的胶越不要使用双蒸水压顶，另外还可以在压顶试剂如正丁醇中添加少许 AP 来增加边缘胶的凝聚强度。 7) 温度也是影响胶聚合的重要因素，可能为了让胶更快的凝固而把胶放到 50 度的温箱，由于受热不均匀，也会造成胶聚合不均匀。 2、胶为什么总是漏？ 1）每次电泳完后，洗净玻璃、胶条
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