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- 2026年01月20日
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- 提供商：
上海达为科生物科技有限公司
- 服务名称：
细胞免疫荧光单标实验
| 品牌 | 其他品牌 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
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细胞免疫荧光单标实验是达为科生物细胞平台的基础服务项目之一，由专业的实验技术人员操作完成。
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光（黄绿色或桔红色），可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质、定位，以及利用定量技术测定含量。优点：特异性强，敏感性高；缺点：存在一定的非特异性染色。
常用的有：直接法和间接法。
上海达为科生物科技有限公司，公司位于上海长江软件园，实验室面积600多平方米。我们拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员（博士后）2人，助理研究员（博士）4人，核心研究员（硕士）15人，主要致力于基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学、生物化学、病理检测、基因检测等技术在科研中的应用与推广。公司目前具备较好的生物学、医学技术服务平台，能够为广大客户提供医学科研样本检测、合作研究、开发及生产服务。
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文献和实验免疫荧光实验步骤 脱蜡至水 二甲苯Ⅰ(8min) 二甲苯Ⅱ(8min) 无水乙醇和二甲苯1:1(5min) 无水乙醇(3min) 95%乙醇(3min) 85%乙醇(3min) 75%乙醇(3min) PBS洗3遍 二．抗原修复 柠檬酸钠抗原修复液修复。 抗原修复100℃ 20min ;自然冷却至室温。 三．PBST洗2遍，PBS洗1遍。每次5min。 四．用30%H2O2和甲醇配制3%的H2O2溶液。每张切片加1滴，室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧
。 抗体孵育 吸水纸吸掉封闭液，不洗，每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒，4 ℃ 孵育过夜。 加荧光二抗： PBST 浸洗爬片 3 次，每次 3 min，吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗，湿盒中 37℃ 孵育 1 h，PBST 浸洗爬片 3 次，每次 3 min。 注意：从加荧光二抗起，后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行。 固定拍照 复染核：滴加 DAPI 避光孵育 5 min，对标本进行染核，PBST 5 min×4 次洗去多余的 DAPI。 用吸水
zhuzhu007 请问在做细胞免疫荧光时，用Tween20打孔，也就是做细胞通透的时候，浓度是多少？ rongjiansu 这个要靠实验去摸索，一般用0.1% 的浓度处理5－10分钟不等。做微管最多可以用到10%。关于如何优化，Nature protocol上面有一篇文章，专门讲免疫荧光实验条件的优化 zhuzhu007 rongjiansu wrote:
