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- 2025年12月23日
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- 服务名称：
细胞实验技术服务
- 提供商：
上海达为科生物科技有限公司
细胞划痕实验技术服务
一、细胞划痕实验技术服务 实验原理
肿瘤细胞在体外仍具有迁移的能力。细胞划痕法是测定了肿瘤细胞的运动特性的方法之一。其借鉴体外细胞致伤愈合实验模型，在体外培养的单层细胞上，划痕致伤，然后比较不同实验组中肿瘤细胞迁移的能力。
二、细胞划痕实验技术服务 实验目的
用质粒Oct-4-EGFP转染后的A549细胞与正常细胞组、阴性对照组进行比较分析，考察质粒Oct-4-EGFP对A549细胞的迁移能力产生的影响。
三、实验步骤
实验共分以下4个主要步骤：
1. 质粒转染细胞：
准备A549细胞，转染前一天按照70-80%密度铺在6cm培养皿中。16h后，按照转染试剂说明书转染细胞（8μg质粒，20μL lipofectamine 2000转染试剂） 。转染24h后，重新铺盘，密度为30-40%。
2. 划线；
待细胞完全贴壁后，用200μL tip轻轻划线，垂直90度，用力均匀，确保划线处无细胞。
3. 细胞培养及拍照；
每隔3天换一次新鲜培养基。连续几天倒置显微镜下100X下拍照，记录细胞的迁移情况，直到细胞填满划痕处。
4. 统计分析。
划线两侧间距为average gaps（AGs），使用Image-Pro Plus软件分析各组细胞的AGs。
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文献和实验细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法，实验成本低，可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。划痕实验大家会做，那么如何将这一大批的图片进行实验距离的测定呢？Image J 又要派上用场了，它不仅可以用于分析 DNA 电泳 WB 条带的灰度值、细胞计数、细胞共定位，就连细胞划痕面积一样可以计算！一、划痕实验的实验原理和步骤先简单的回顾下划痕实验的实验原理和实验步骤。1. 实验原理细胞划痕法是测定肿瘤细胞的运动特性的方法之一，是在体外培养的单层细胞上划痕致伤，观察肿瘤细胞的迁移
材料： 6孔板 marker笔 直尺 20微升枪头（灭菌） 无血清培养基 PBS 准备： 所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内） 流程： 1、先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀地划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。 2、在空中加入约5X105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。 3、第二天用枪头比着直尺，尽量垂直于背后的横线划痕，枪头
细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法，实验成本低，可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。 1 实验步骤实验材料：细胞样品实验仪器与耗材：6 孔板、marker 笔、直尺、枪头实验试剂：无血清培养基、PBS 2 实验操作准备：所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和 marker 笔在操作前紫外照射 30 min（超净台内）。先用 marker 笔在 6 孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔 0.5～1 cm 一道，横穿过孔。每孔至少穿过 5 条线。在空中加入约 5X105
