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- 2025年12月29日
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上海达为科生物科技有限公司
- 服务名称：
大鼠脑组织冰冻切片实验服务
| 品牌 | 其他品牌 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
|---|
大鼠脑组织冰冻切片实验服务是达为科生物的基础服务项目之一，由经验丰富的实验人员操作完成。
冰冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。其制作过程较石蜡切片快捷、简便，多应用于手术中的快速病理诊断。取下的新鲜组织应立即放入超低温冰箱或者液氮中，用干冰运输；
优点：
1．简便，可以不需要对组织固定、脱水、透明、包埋等手续即可进行切片，减少了一些中间环节。
2．快速，用时短。
3．组织变化不大。
4．能很好保存脂肪，类脂等成分。
5．能够比较完好地保存各种抗原活性及酶类，特别是对于那些对有机溶剂或热的温度耐受能力较差的细胞膜表面抗原和水解酶保存较好。
缺点：
1．不容易做连续切片。
2．切取的组织不能过大，组织过大不容易冻结或者组织冻结不均，影响切片及染色效果。
3．不容易制作较薄的切片。
4．组织块在冻结过程中容易产生水的结晶而影响细胞的形态结构及抗原物质的定位，并且组织结构也不如石蜡切片清晰。
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文献和实验冰冻切片免疫组织化学染色 1．新鲜组织或在-80℃保存的组织用恒冷箱冰冻切片机切片，厚度为10～40gm； 2．将切片裱于载玻片上，立即用电吹风吹干或室温放置30分钟，如不能及时染色，密封后一20℃保存； 3．染色前组织切片用冷丙酮4℃固定10―20分钟，PBS洗2次，每次5分钟； 4。必要时应用0．1％枸橼酸钠与0．1％Triton X―100的混合液将细胞膜打孔。 其余步骤同石蜡切片。SABC法染色，DAB显色大鼠小肠腺细胞核呈棕色为BrdU免疫
组织块的准备 1.调整好组织与刀片的方向 这是冰冻切片准备中极为重要的方面，使用一些包埋物可以使这项工作变得简单，在我的工作中我总结出一些经验可供参考。 a.脂肪放在最后切。脂肪由于硬度不够，对绝大多数组织均合适的温度却切不好脂肪组织，如果一刀下去，组织中的脂肪先接触刀片，就会破碎并使整个片子损坏。如果脂肪最后接触刀片，则切片过程不受干扰。最糟糕的情况是脂肪部分先接触刀片而没有包埋物的保护，包埋物可以给片子提供一个起始的缓冲，如果没有包埋，脂肪就会切碎并把整个片子破坏。当切片
用钩镊再眼眶处固定大鼠颅骨，用组织剪再颅骨和颈椎连接处剪断。 组织剪头部伸入枕骨大孔，尽量贴着骨头。 组织剪从枕骨大孔处伸入，朝向同侧眼眶方向，贴着骨头剪，剪到眼眶。 右侧同上 从大鼠眼眶之间剪断 左手持钩镊插入大鼠的眼眶固定颅骨（有点残忍），用弯钳直接夹住枕骨大孔处的骨头，直接就掀起来了，完整的脑组织就显现出来了，下图为灌注后的脑组织。 从小脑处将脑组织向上推起，用小剪刀
