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组织包埋实验
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上海达为科生物科技有限公司
取材固定:离体的组织不及时固定,组织就会自溶,抗原就会扩散。固定就是加入一些可以让蛋白质变性的物质(比如说甲醛),使得蛋白质的结构被固定住,不再发生变化,同时也不会再发生-一些活性反应,这样才好做后续的染色步骤。常见固定液是4%的多聚jia醛。根据不同目的、组织特征代表性取材。取的材料应该小而薄。便于固定剂迅速渗入内部,一般厚度不超过2mm,大小不超过5X5mm。每个组织多切几块。新鲜组织固定(组织块不宜太大太厚,这样固定液很难进入里面,可能会导致在较短的时间内脱水不完全,引起一系列的问题,比如浸蜡不彻底,切片不好完成,切不完整。导致后来切片染色的脱落,造成染色的失败。组织块也不能太小,否则不能保证切片数量,且透明时间和浸蜡时间不能很好的把握。)固定时间因固定剂种类而异,大多6-12小时,一般不超过12 小时。视组织固定的难易程度而定。后续如果做免疫组化,不应超过12 小时;后续如果做HE染色,不应超过24小时。固定完之后用水洗(目的:洗去渗入组织的固定液,终止固定以免影响对组织的内结构的观察,分析。换液两次,一次半小时。)之后可直接脱水包埋或放入75%的乙醇4度可长期保存。
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