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- 2026年11月12日
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上海达为科生物科技有限公司
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油红O染色
一、油红o染色实验步骤
1.标本 人或动物的肝组织等,甲醛—钙液固定,冰冻切片,厚10μm。
2. 改良的油红O染色液 油红O 0. 5g, 50%乙醇100ml。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。
3. 染色步骤 ①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自来水终止分化;④苏木素复染核,自来水返蓝,甘油明胶封片.
二、注意事项
1. 由于脂肪易溶于有机溶剂，所以一般用冰冻切片染色来显示
2. 做脂肪染色的冰冻切片不能太薄，过薄的切片常会使脂质丢失
3. 苏木素复染时间不能过长
4. 染色结果不能长期保存，应尽快观察及照相。
上海达为科生物科技有限公司，公司位于上海长江软件园，实验室面积600多平方米。我们拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。公司目前具备较好的生物学、医学技术服务平台，能够为广大客户提供医学科研样本检测、合作研究、开发及生产服务。
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文献和实验油红 O属于偶氮染料，是很强的脂溶剂和染脂剂，与甘油三酯结合呈小脂滴状。脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类，它在脂类中的溶解度比在溶剂中大。当组织切片置人染液时，染料则离开染液而溶于组织内的脂质(如脂滴)中，使组织内的脂滴呈橘红色。 一、油红O染液的配制 1．油红O 1g 异丙醇 100ml 2．油红O 足量 异丙醇 100ml 配成油红O饱和溶液，使用时以油红O饱和液一份加蒸馏水两份，过滤后使用。 二、染色程序 1．切片用甲醛―钙
； 2、汇合后必须静置48h，增殖状态细胞无法启动分化； 3、IBMX避光保存，诱导液尽量现配。 图3：3T3-L1细胞（正常）和成脂分化后（对照）[5] 五、分化结果评估 1.形态学定性观察（明场显微镜） ·未分化：梭形成纤维细胞，无脂滴 ·分化成功：细胞由梭形变圆形，胞内大量透亮圆形脂滴； ·粗略判定标准：模型组脂滴阳性细胞比例≥70%认为分化合格。 2.油红O染色（最常用，中性脂染色）[6] 1、PBS洗细胞→4%多聚甲醛固定30min；PBS洗涤 2、60%异丙醇润洗 3、油红O工作液室温避光
光强度。这一技术能够提供高分辨率的胆固醇分布图像，帮助研究人员定位胆固醇在细胞内的具体位置。 04 技术比较：菲律平与其他脂质染料有何不同？ 为了更好地理解菲律平的特性，将其与其他常用脂质染料进行比较十分必要。 特性 菲律平 油红O 尼罗红 染色对象 游离胆固醇（特异性） 甘油三酯（脂滴） 脂滴（环境敏感） 原理 与胆固醇疏水部分形成复合物 脂溶性染料，在脂质中溶解度更高 在脂质环境中荧光增强 检测方式 荧光显微镜（激发360nm/发射480nm） 光学显微镜（橙红色） 荧光显微镜/流式
