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m1A-seq RNA甲基化测序

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  • 越来越多的研究发现,m1A不仅影响局部RNA结构、蛋白-RNA相互作用以及5’UTR的翻译,还存在于tRNA、rRNA、mRNA和线粒体转录本[3],在维持这些ncRNA的正确结构和功能上发挥重要的作用[4]。表观生物m1A-seq测序服务,绘制全转录组m1A甲基化修饰图谱,助力揭示m1A修饰的未知功能与机制。
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  • 2026年04月17日
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      表观生物

    • 服务名称

      m1A-seq RNA甲基化测序

    N1-methyladenosine(m1A)是一种重要的RNA转录后修饰,是RNA分子腺嘌呤第1位氮原子上的甲基化修饰,首次报道是在50多年前[1]。2016年,何川等人[2]发现m1A对甲基化mRNA的翻译具有促进作用,存在于多种不同的真核细胞基因转录本中,包括酵母菌到哺乳动物,使我们重新认识m1A。越来越多的研究发现,m1A不仅影响局部RNA结构、蛋白-RNA相互作用以及5’UTR的翻译,还存在于tRNA、rRNA、mRNA和线粒体转录本[3],在维持这些ncRNA的正确结构和功能上发挥重要的作用[4]。
    m1A修饰的相关研究初露峥嵘,提示我们这个新的RNA甲基化修饰有着巨大的研究意义。表观生物一直专注于表观遗传学研究领域,推出m1A-seq整体服务,绘制全转录组m1A甲基化修饰图谱,帮助客户揭示m1A修饰的未知功能与机制。

    技术原理
    产品细节图片1


    送样要求
    样本类型:
    1. 总RNA质量>100 μg/样本
    2. 细胞数量>3 X107个细胞/样本
    3. 组织质量>100 mg/样本
    样本物种:仅限人、大小鼠,其他物种需评估。 

    分析内容
    基本分析
    1. 原始数据过滤及质控
    2. 参考基因组比对
    3. Reads 在染色体上的分布
    4. Peak Calling 分析
    5. Peak 可视化
    6. Peak 统计分析
    7. Motif分析
    8. m1A 的基本特征
    • Peak 在基因元件的分布
    • Reads 在基因元件的分布
    • Peak 关联基因的特征
    9. 差异Peak 分析
    10. 差异Peak 关联基因GO,KEGG 分析

    高级分析
    1. RNA-seq 表达差异与m1A 修饰差异关联分析
    2. 翻译组RIBO-seq 翻译差异与m1A 修饰差异关联分析
    3. m1A修饰差异与GWAS数据库关联分析

     
     
    数据分析示例图
    产品细节图片2
    图1. Peaks结构百分比图[2]
     

    产品细节图片3
    图2. m1A修饰位点富集于AUG起始密码子附近[2]
     

    产品细节图片4
    图3. m1A修饰motif分析[2]
     

    产品细节图片5
    图4. 某特定基因的m1A修饰区域[2]
     
    案例分析
    Chuan He, et al. Nature, 2016. 真核生物mRNA的动态m1A甲基化图谱[2]
    研究者利用新研发的测序方法,发现m1A富集于起始密码子的第一个拼接位点的上游,优先修饰更多的结构区域和选择性翻译起始位点,对生理情况作出动态的应答,且与蛋白质产量正相关。m1A的这些特征在小鼠和人类细胞中高度保守,表明m1A对甲基化mRNA的翻译具有促进作用。

     
    产品细节图片6
    图5. m1A在mRNA中是一种动态修饰,对变化的生理和应激条件
    作出应答


    产品细节图片7
    图6. 在启动密码子附近的m1A与高蛋白水平相关


     
    客户文章

    PNAS:RNA 修饰通过ATP5D调控肿瘤细胞糖酵解[5]
    研究者通过测序和功能研究证实,ATP5D是ATP合成酶最重要的亚单位之一,参与m1A去甲基酶ALKBH3调节的癌症细胞糖酵解。m1A修饰的ATP5D外显子 通过增加与YTHDF1/eRF1复合物的结合来负调控其翻译延伸,从而促进核糖体复合物释放mRNA。m1A还调节E2F1的mRNA稳定性,E2F1直接与ATP5D启动子结合,启动它的转录。利用dm1 ACRISPR系统,靶向ATP5D m1A,去甲基化,显著提高了ATP5D的表达和癌症细胞的糖酵解。体内实验证明m1A/ATP5D在肿瘤生长和癌症进展中的作用。此研究揭示了mRNA m1A修饰和细胞代谢的联系,对这些相互作用的进一步理解,对癌症治疗至关重要。

    产品细节图片8 图5. m1A-seq 显示野生组和 ALKBH3-/-HeLa 细胞ATP5D 基因 CDS 区的 m1A 富集峰




    参考文献

    [1] DUNN DB. The oc currence of 1-me thyladenine in ribonucleic acid. Biochim Biophys Ac ta. 1961 Jan 1;46:198-200.
    [2] Dominissini D, e t al. The dynamic N(1)-me thyladenosine methylome in euk aryotic messenger RNA. Na ture. 2016 F eb 25;530(7591):441-6.
    [3] Zhang C, et al. Reversible RNA modification N(1)-methyladenosine(m(1)A) in mRNA and tRNA. Genomics Proteomics Bioinformatics. 2018. 16(3), 155‒161.
    [4] Roundtree IA, e t al.. Dynamic RNA modific ations in g ene expression regulation. Cell 2017:169(7), 1187‒1200.
    [5] Wu Y, Chen Z, Xie G, et al. RNA m1A methylation regulates glycolysis of cancer cells through modulating ATP5D. PNAS. 2022;119(28):e2119038119. doi:10.1073/pnas.2119038119  

     

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    该产品被引用文献

    [1] DUNN DB. The oc currence of 1-me thyladenine in ribonucleic acid. Biochim Biophys Ac ta. 1961 Jan 1;46:198-200.
    [2] Dominissini D, e t al. The dynamic N(1)-me thyladenosine methylome in euk aryotic messenger RNA. Na ture. 2016 F eb 25;530(7591):441-6.
    [3] Zhang C, et al. Reversible RNA modification N(1)-methyladenosine(m(1)A) in mRNA and tRNA. Genomics Proteomics Bioinformatics. 2018. 16(3), 155‒161.
    [4] Roundtree IA, e t al.. Dynamic RNA modific ations in g ene expression regulation. Cell 2017:169(7), 1187‒1200.
    [5] Wu Y, Chen Z, Xie G, et al. RNA m1A methylation regulates glycolysis of cancer cells through modulating ATP5D. PNAS. 2022;119(28):e2119038119. doi:10.1073/pnas.2119038119  

     

    相关实验
    • RNA测序简介

      NGS已成为生命科学领域中基因组学和转录组学研究的金标准。虽然它与桑格测序等方法有某些核心相似之处,但NGS所能实现的绝对的高通量水平使它与其他方法截然不同,并彻底改变了科学家的工作方式。 RNA测序(RNA-seq)尤其处于NGS功能应用的前言沿。RNA-seq最简单的形式允许我们在取样时确定样本中的RNAs的丰度。转录组是一个高度动态的细胞特征,并打开了一个巨大发掘潜力的世界。对药物、各种疾病状态、转录后修饰和选择性剪接转录本的反应变化只是 RNA-Seq 使其能够发现的一些例子

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    图标技术资料

    资料下载:

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    pnas.202119038.pdf 附 (下载 0 次)

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