Invitrogen特约代理商|a10256 Alexa F

【共享】常用抗体标记荧光染料的选择

SE 活性部分远低于50%（AlexaFluor488微量标记试剂盒产品信息，Invitrogen）。相反，所有Biotium 的CF染料具有相对稳定的胺活性的SE基团型，这比大部分AlexaFluor 染料的SE更耐水解。总体来说，CF染料SE产品一贯的给出更高的标记效率，提供给用户更好的使用价值。选择方案：蓝色（350-450nm处激发） CF 350、Alexa Fluor 350、AMCA等----亮蓝和紫外光激发CF350是类似于Alexa Fluor 350和传统荧光染料AMCA的蓝色

做了这么多的 WB，你知道化学发光和荧光可以一起检测吗？

，一组使用 NaHS 处理，一组则不作处理；然后用荧光马来酰亚胺染料 Alexa Fluor 488 C5 maleimide（下文简称MAL，Invitrogen，A10254）标记半胱氨酸上的硫醇基团，使正常的半胱氨酸通过 -S- 与 MAL 连接，而硫巯基化的半胱氨酸通过二硫键 -S-S- 与 MAL 连接，如下图： 图 1. 文献 Fig. 6G，硫巯基化分析步骤 接下来加入 DTT，硫巯基化蛋白上特有的二硫键就会被解开，导致荧光 MAL 分子脱落，荧光信号减弱。所以，荧光信号发生变化就验证

Site-Specific Labeling of Proteins for Single-Molecule FRET Measurements Using Genetically Encoded Ketone Functionalities

to the amber stop codon TAG. Proteins were purified with high yield and subsequently labeled with the hydroxylamine derivative of Alexa Fluor� 488 functioning as a fluorescent donor dye. The proteins were then labeled via maleimide coupling chemistry