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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
35
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
4°C保存
- 规格：
100T/盒
注意事项：
SNHG1 mRNA原位杂交试剂盒100T/盒由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。
产品名称 SNHG1 mRNA原位杂交试剂盒100T/盒
规格 100T/盒
特异性 人
标记方式 3’—尾段标记
保存条件 4°C保存一年
试剂盒内容 1.SNHG1 寡核苷酸探针杂交液 2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.胃蛋白酶（×10;Pepsin） 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
准备工作：
产品仅供科研固定液：4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加氯化钠17.6g，柠檬酸三钠(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加氯化钠30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
特点：
1. 安全、快速、重复性好；
2. 特异性100%，灵敏度超过90%；
3. 探针性能稳定，低温保存一年以上；
4. 荧光信号强，结果判定直观可靠；
5. 操作简单，定位精准，无实验污染。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
下列是公司正在热销的产品：
小鼠树突状细胞肉瘤细胞;DCS腺苷-5'-二1酸三锂盐ADP.Li3质量规格：>97%,BR
CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人细胞裂解液 (阳性对照) 赤藓醇;赤藓糖醇Erythritol质量规格：>99%,BR
SK-N-BE(2)人神经母细胞瘤细胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS5ˊ-二1酸腺苷钡盐ADP.Ba质量规格：>98%,BR
TG-905细胞，人脑胶质母细胞瘤细胞 荧光假单胞菌 人滋养层绒毛细胞总RNAHVT NA二1酸腺苷单钾盐ADP.K质量规格：>97%,BR
RM1(大鼠肌肉成纤维样细胞) 5×106cells/瓶×2肌苷-5'-二1酸二钠盐IDP.Na2质量规格：>98%,BR
人癌细胞;MDA-MB-231头孢克1Cefixime质量规格：>98%,BR
KLK3 Others Human 人 KLK3 / PSA / Kallikrein-3 人细胞裂解液 (阳性对照) NDSB 256(>98%,BR)NDSB 256质量规格：>98%,BR
MT-4 人急性母细胞白血病细胞NDSB-211NDSB-211质量规格：BR
A-673 人横纹肌瘤细胞 A-673 rhabdomyoma cells DMEM培养基+10%FBS中性红染色液Neutral red solution(1X)质量规格：Ind Grade
TDGF1 Protein Human 重组人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 标签)镍粉(>99.5%,SP)Nickel powder质量规格：>99.5%,SP
盘羊皮肤细胞;ASHS3 卵巢细胞，Lec1细胞 L7712细胞，615小鼠T细胞性白血病瘤株Fmoc-L-缬氨酸质量规格：>98%,BRFmoc-Val-OH
SV40T转化的人胚肾细胞;293TFmoc-N-三苯甲基-L-天冬酰胺质量规格：>98%,BRFmoc-Asn(Trt)-OH
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) N'-芴甲氧羰基-N-苄氧羰基-L-赖氨酸质量规格：≥98%,BRFmoc-Lys(Z)-OH
CL-03142V6.11(人胚肾细胞)5×106cells/瓶×2E-64d,蛋白酶抑制剂,阿洛司他丁质量规格：>98%,BRE64d,E-64d
HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/chicken/Netherlands/1/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2’-脱氧胞苷-5‘-1酸二钠盐质量规格：>98%，BRdCMP,2Na
SNHG1 mRNA原位杂交试剂盒100T/盒人胰腺腺泡上皮癌;HPAC1-溴-4-癸基苯(>88.0%(GC))质量规格：>88.0%(GC)1-Bromo-4-decylbenzene
IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-溴-4-十二烷基苯(>90.0%(GC))质量规格：>90.0%(GC)1-Bromo-4-dodecylbenzene
人细胞;Hela S3 [HeLaS3]1-溴-4-十二烷基苯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)1-Bromo-4-dodecylbenzene
TMED1 Others Human 人 TMED1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-溴-4-丁基苯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)1-Bromo-4-butylbenzene
人肝实质细胞完全培养基 100mL1-硝基芘(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)1-Nitropyrene
SNHG1 mRNA原位杂交试剂盒100T/盒由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。
| 产品名称 | SNHG1 mRNA原位杂交试剂盒100T/盒 |
| 规格 | 100T/盒 |
| 货号 | XG-Y7821 |
产品名称 SNHG1 mRNA原位杂交试剂盒100T/盒
规格 100T/盒
特异性 人
标记方式 3’—尾段标记
保存条件 4°C保存一年
试剂盒内容 1.SNHG1 寡核苷酸探针杂交液 2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.胃蛋白酶（×10;Pepsin） 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
准备工作：
产品仅供科研固定液：4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加氯化钠17.6g，柠檬酸三钠(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加氯化钠30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
特点：
1. 安全、快速、重复性好；
2. 特异性100%，灵敏度超过90%；
3. 探针性能稳定，低温保存一年以上；
4. 荧光信号强，结果判定直观可靠；
5. 操作简单，定位精准，无实验污染。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
下列是公司正在热销的产品：
小鼠树突状细胞肉瘤细胞;DCS腺苷-5'-二1酸三锂盐ADP.Li3质量规格：>97%,BR
CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人细胞裂解液 (阳性对照) 赤藓醇;赤藓糖醇Erythritol质量规格：>99%,BR
SK-N-BE(2)人神经母细胞瘤细胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS5ˊ-二1酸腺苷钡盐ADP.Ba质量规格：>98%,BR
TG-905细胞，人脑胶质母细胞瘤细胞 荧光假单胞菌 人滋养层绒毛细胞总RNAHVT NA二1酸腺苷单钾盐ADP.K质量规格：>97%,BR
RM1(大鼠肌肉成纤维样细胞) 5×106cells/瓶×2肌苷-5'-二1酸二钠盐IDP.Na2质量规格：>98%,BR
人癌细胞;MDA-MB-231头孢克1Cefixime质量规格：>98%,BR
KLK3 Others Human 人 KLK3 / PSA / Kallikrein-3 人细胞裂解液 (阳性对照) NDSB 256(>98%,BR)NDSB 256质量规格：>98%,BR
MT-4 人急性母细胞白血病细胞NDSB-211NDSB-211质量规格：BR
A-673 人横纹肌瘤细胞 A-673 rhabdomyoma cells DMEM培养基+10%FBS中性红染色液Neutral red solution(1X)质量规格：Ind Grade
TDGF1 Protein Human 重组人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 标签)镍粉(>99.5%,SP)Nickel powder质量规格：>99.5%,SP
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HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) N'-芴甲氧羰基-N-苄氧羰基-L-赖氨酸质量规格：≥98%,BRFmoc-Lys(Z)-OH
CL-03142V6.11(人胚肾细胞)5×106cells/瓶×2E-64d,蛋白酶抑制剂,阿洛司他丁质量规格：>98%,BRE64d,E-64d
HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/chicken/Netherlands/1/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2’-脱氧胞苷-5‘-1酸二钠盐质量规格：>98%，BRdCMP,2Na
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IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-溴-4-十二烷基苯(>90.0%(GC))质量规格：>90.0%(GC)1-Bromo-4-dodecylbenzene
人细胞;Hela S3 [HeLaS3]1-溴-4-十二烷基苯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)1-Bromo-4-dodecylbenzene
TMED1 Others Human 人 TMED1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-溴-4-丁基苯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)1-Bromo-4-butylbenzene
人肝实质细胞完全培养基 100mL1-硝基芘(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)1-Nitropyrene
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