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大量
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诺博莱德
配方(10ml):
4.0ml 10×MOPS 缓冲液
3.1ml 甲酰胺2.0ml 100%的甘油
720ul 37%的甲醛
80ul 0.5M EDTA(PH 8.0)
5mg 溴酚蓝
100ul DEPC水
混匀,样品管级吸头经过处理后分装。-20℃保存。常用时可2-8℃存放。
使用方法:取6ul RNA样品加入2ul上样缓冲液混匀上样。
如果只是进行普通的RNA快速电泳,可选用6×RNA loading buffer。常规的琼脂糖,高电压(250V),快速电泳。
| 货号 | 产品名称 | 品牌 | 规格 | 价格(元) |
| R0920 | 10×MOPS 缓冲液 | NobleRyder | 500ml | 240.00 |
| R0926 | 4×甲醛变性胶上样缓冲液 | NobleRyder | 1ml | 80.00 |
| D0031 | 40%丙烯酰胺/甲叉溶液(19:1) | NobleRyder | 100ml/500ml | 80.00/280.00 |
| D0020 | 5×TBE 缓冲液 | NobleRyder | 500ml | 120.00 |
| D0021 | 50×TAE 缓冲液 | NobleRyder | 500ml | 160.00 |
| D0032 | 6×DNA loading buffer | NobleRyder | 5ml | 42.00 |
| R0921 | 6×RNA loading buffer | NobleRyder | 1ml | 40.00 |
| D0025 | GoldView核酸染色剂(EB替代品) | NobleRyder | 1ml/100ml | 80.00/4000.00 |
| D0028 | SYBR Green I(10000×)电泳用 | NobleRyder | 100ul | 420.00 |
| P0350 | 剥离硅烷/疏水硅烷(Repel—Silane) | NobleRyder | 250ml | 200.00 |
| P0360 | 亲和硅烷bind-silane | NobleRyder | 100ml | 280.00 |
| D0102 | 快速电泳缓冲液(20×) | NobleRyder | 500ml | 100.00 |
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文献和实验即水饱和的溴酚蓝液。在15ml灭菌离心管中,依次加入以下各种成分:4.0ml 10 × FA buffer3.1ml 甲酰胺2.0ml 100%的甘油720ul 37%的甲醛80ul0.5M的 EDTA (PH 8.0)16ul 水饱和的溴酚蓝100ul DEPC水混匀,分装,-20℃保存,常用放4℃保存。5、1×甲醛变性胶电泳缓冲液(1×running buffer):20 ml 10×FA gel buffer,4.0 ml 37%的甲醛,176 ml水,放入电泳槽中使用,一般在3次电泳结束后需
钠,5mmol/L DETA(pH8.0)4)甲醛, 甲酰胺3 仪器: 电泳装置,紫外透射观测仪二、实验程序1 甲醛变性的琼脂糖(Agarose) 凝胶的配制在250mL的锥形瓶中准确称量2g Agarose (Sigama),再加20mL 10×TAE Buffer,144mLDEPC处理过的双蒸水,微波炉中化胶,待冷却至50-60℃加EB至终浓度≤0.5μg/mL。在通风橱中加入36 mL甲醛,放置一段时间以减少甲醛蒸汽。2 RNA的甲醛变性电泳1) 样品制备,RNA总量10μg,5×甲醛凝胶电泳缓冲液
抗体)。 (1) 用0.5XTBE作为电泳液。按照10V/厘米的电压预电泳10分钟。预电泳的时候如果有空余的上样孔,可以加入少量稀释好的1X 的EMSA上样缓冲液(蓝色),以观察电压是否正常进行。 (2) 把混合了上样缓冲液的样品加入到上样孔内。在多余的某个上样孔内加入10微升稀释好的1X的EMSA/Gel-Shift上样缓冲液 (蓝色),用于观察电泳进行的情况。 (3) 按照10V/厘米的电压电泳。确保胶的温度不超过30℃,如果温度升高,需要适当降低电压。电泳至EMSA/Gel-Shift上样缓 冲液中的蓝色染料溴酚
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