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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
55
- 英文名：
BeyoECL UT Kit For Western Blot
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100mL|500mL
1．极超灵敏ECL化学发光试剂盒哪家好用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称：极超灵敏ECL化学发光试剂盒哪家好英文名称：BeyoECL UT Kit For Western Blot
产品规格：100mL|500mL
发货周期：1～3天
本试剂盒是用作Western萤光检测试剂的一种极超敏的以luminol为基础的ECL化学发光试剂盒，发光效果显著优于BalbECLStar，可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样品。
的Western萤光检测试剂目前共有三种，分别是YT060BalbECLPlus、YT061BalbECLStar和YTB061BalbECLUT。常规的Western检测，优先推荐使用BalbECLStar。对于丰度比较高的目的蛋白的检测，例如内参蛋白等的检测，推荐使用性价比更高的BalbECLPlus。对于低丰度较难检测的目的蛋白，优先推荐使用检测灵敏度最高的BalbECLUT。但对于丰度适中的目的蛋白的检测，不太推荐使用BalbECLUT，因为使用BalbECLUT时由于检测灵敏度特别高，容易产生过曝的现象。
保存条件
4℃避光保存，一年有效。37℃避光保存，一个月内有效。如果长期不用，可以-20℃避光保存，这样可以保存更长时间。
注意事项
1．BalbECLUTA液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。
2．各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。特别是B液，含有氧化剂，比较容易被还原而失效。
3．BalbECLUT的萤光持续时间很长，但开始反应后的20-30分钟内萤光更强一些，随后萤光会逐渐减弱，因此请注意充分利用这萤光较强的30分钟进行压片或成像。
5．当发现BalbECLUT的检测灵敏度过高而影响检测效果时，可以选择检测灵敏度较低一些的BalbECLStar(YT061)或BalbECLPlus(YT060)，或者减少样品、一抗或二抗的用量。
6．BalbECLUTA液和B液均对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
7．本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
8．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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激发态的Ru(byp)2+3。Ru(byp)3+3在衰减的同时发射一个波长为620NM的光子，重新回到基态Ru(byp)2+3。这一过程在电极表面反复进行，产生高效、稳定的连续发光，并不断增强。 ECL的突出优点是：①标记分子小，可实现多标记，标记物非常稳定；②发光时间长，灵敏度高；③光信号线性好，动力学范围宽，超过6个数量级；④可重复测量，重现性好；⑤可实现多元检测和均相免疫分析；⑥快速，完成一个样品的分析通常只需18 min；⑦可实现全自动化。由于电化学发光免疫分析具有优越性，是一种
【摘要】目的 利用时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）技术，建立人血清CK-MB的快速定量检测方法。 方法 采用双抗体夹心法（1株抗CK-MB的单抗用于包被微孔板，另1株抗CK-MB的单抗用于铕标记）建立CK-MB TRFIA。 结果 CK-MB TRFIA的线性测量范围为5~400ug/L，分析的灵敏度为0.24 ug/L，批内和批间的变异系数分别为4.9%~7.3%和8.4%~11.7%。与CK-MM 和CK-BB 均无交叉反应。将82份血清标本用本法与化学发光试剂盒同时检测，其相关
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