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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
22
- 英文名:
Diamine oxidase (DAO) assay kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
详见说明书
1.二胺氧化酶测定试剂盒(紫外比色法)(全自动生化)规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称:二胺氧化酶测定试剂盒(紫外比色法)(全自动生化)规格英文名称:Diamine oxidase (DAO) assay kit
产品规格:25ml/80T
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天
检测指标:二胺氧化酶;DAO
本试剂盒可测各种动物血清、血浆等样本中DAO活性;主要用于监测孕妇的胎盘功能:孕妇临产前逐渐增高,若突然下降,是流产的先兆,提示采取预防措施。文献报导:胃肠道疾病、小肠炎血清DAO增高,结肠癌、腹水DAO增高。二胺氧化酶是人类和哺乳动物小肠粘膜上层绒毛中具有高度活性的细胞内酶,在组胺和多种多胺代谢中起作用,其活性与粘膜细胞的核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。
产品优点:
1、准确度:不准确度≤10%;
2、精密度:批间精密度<10%
3、灵敏度:线性范围0~100U/L。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验标本处理 ● 最大标本容量140个,可随时连续装载 ● 使用灵巧直线型样品架,并以不同颜色标识规格,一目了然 ●各种样品管和杯可混合使用,具标准化的条码功能 ●最先进的凝块检测功能,有效地避免因吸样量不准而导致检验结果的偏差 ● 血清样本外观检测功能,可提示所检样品受溶血、脂血、黄疸影响的程度 检测系统 ● 测试速度1440个/小时 ● 光源采用长寿闪烁式氙灯,无需保养和更换 ●多波长检测,最大可致10个波长
,其结果假性增高。因为此两项测定试剂中均用甘油作为酶的稳定剂,因此,严重干扰TG测定。 排除方法:对于一步法测定TG,将其与上述两种项目分开进行测定可消除干扰,或将每天TG标本集中在一起做也可消除干扰。在日常工作中常用前一种方法。 四、体会 引进全自动生化分析仪,在投入使用前,应对试剂间的交叉污染进行考虑,对有些项目进行组合,避免交又污染的出现。一般,将所有测定项目进行排序,将易发生交叉污染的项目隔开,使仪器报出准确、可靠的检验结果。
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
,我公司的生化试剂盒采用的原理为:可见区的显色反应和紫外区的某一物质变化量。某物质与显色剂反应后,形成区别于自身的颜色反应,在某一波长下,吸光度的强弱与物质的含量呈正比关系,其显色反应的示意图如下: 生化测定结果的表现形式: ① 物质浓度:单位主要是mg/L、mmol/L、μmol/mgprot等 ② 某种能力和活力:世界上没有真实物质存在,以另一真实存在的物质变化量来表示其能力大小;其单位为U/L、U/gprot等。例如酶活的单位:在特定条件下,每分钟内转化1 μmol底物的酶量为一个单位(U
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