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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
35
- 英文名:
BeyoECL Star Kit For Western Blot
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100mL|500mL
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称:特超灵敏ECL化学发光试剂盒哪家好
英文名称:BeyoECL Star Kit For Western Blot
产品规格:100mL|500mL
发货周期:1~3天
本试剂盒是一种用作Western萤光检测试剂的特超敏ECL化学发光试剂盒,发光效果显著优于BalbECLPlus,可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(HRP)发生化学反应,发出萤光,从而可以通过用X光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样品。
的BalbECL系列Western萤光检测试剂目前共有三种,分别是YT060BalbECLPlus、YT061BalbECLStar和YTB061BalbECLUT。常规的Western检测,优先推荐使用BalbECLStar。对于丰度比较高的目的蛋白的检测,例如内参蛋白等的检测,推荐使用性价比更高的BalbECLPlus。对于低丰度较难检测的目的蛋白,优先推荐使用检测灵敏度最高的BalbECLUT。但对于丰度适中的目的蛋白的检测,不太推荐使用BalbECLUT,因为使用BalbECLUT时由于检测灵敏度特别高,容易产生过曝的现象。
BalbECLStar灵敏度极高,比DAB显色的灵敏度至少高1000倍,比Amersham公司的ECL或以前的BalbECL的灵敏度高100-500倍左右,比我公司的BalbECLPlus的灵敏度高约5-10倍(参考图1),比原Pierce公司(现Thermo公司)的SuperSignalWestPicoSubstrate的灵敏度高10倍以上,实际检测效果与原Pierce公司的SuperSignalWestDura和SuperSignalWestFemto的检测灵敏度相近。对于辣根过氧化物酶的最低检测灵敏度可以达到飞克级,500fg辣根过氧化物酶用BalbECLStar检测并用化学发光仪进行发光强度的定量检测时,信噪比大于5。
保存条件
4℃避光保存,一年有效。37℃避光保存,一个月有效。如果长期不用,可以-20℃避光保存。-20℃可以保存更长时间。
注意事项
1.BalbECLStarA液和B液在吸取过程中必须要更换枪头,A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效,影响后续的使用效果。
2.各溶液使用后,请盖紧瓶盖,以防失效。特别是B液,含有氧化剂,比较容易被还原而失效。
3.BalbECLStar的萤光持续时间很长,但开始反应后的20-30分钟内萤光更强一些,随后萤光会逐渐减弱,因此请注意充分利用这萤光较强的30分钟进行压片。
4.当发现BalbECLStar的检测灵敏度过高而影响检测效果时,可以选择检测灵敏度较低一些的BalbECLPlus(YT060),或者减少样品、一抗或二抗的用量。如果BalbECLStar的检测灵敏度仍然不够时,可以选择检测灵敏度更高的BalbECLUT(YTB061)。
5.BalbECLStarA液和B液均对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
6.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
7.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
特超灵敏ECL化学发光试剂盒哪家好待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
Ethyl tiglate惕各5837785
L(+)LeucinolL亮7533406
Bismuth subcarbonate次碳铋1458327
7CHLOROISATIN7靛红7477636
Allyl methacrylate35194
PHOSPHOROUS ACID TRIISODECYL ESTER亚三异脂25448253
4Morpholineethanesulfonic acid啉4432319
1CHLORO6PHENYLHEXANE1671434689
AZELANITRILE壬二1675690
Methyl 3methoxyacrylate334846907
3Methoxydiphenylamine3101166
2Acrylamide2methylpropanesulfonic acid2酰215214898
1PYRROLIDINEDITHIOCARBONIC ACID SODIUM SALT二代872719
NA学耗量(COD)法标准溶
Collagenase胶原酶Ⅰ2593923
Formamide 含量:≥98% 规格:10mg/支
去离子酰 含量:≥98% 规格:10mg/支
Formamide, Deionized 含量:≥98% 规格:10mg/支
弗氏不完全佐剂 含量:≥98% 规格:20mg/支
Freund’s Adjuvant Incomplete 含量:≥98% 规格:20mg/支
弗氏完全佐剂 含量:≥98% 规格:20mg/支
Freund's Adjuvant Complete 含量: 规格:5mg/支
性品红(复红) 含量:≥98% 规格:10mg/支
特超灵敏ECL化学发光试剂盒哪家好PRDX2/PeroxiredoxinSO3还蛋白过化物酶2大鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA试剂盒3313266
NDUFA9NDUFA9蛋白抗体大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒3313277
GLT8D2糖转移酶GLT8D2抗体大鼠补体子H(CFH)ELISA试剂盒553082
LGI4含亮神经胶质瘤失活蛋白4抗体大鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)ELISA试剂盒68559604
MTGR1髓易位相关蛋白1抗体大鼠血小板衍生生长子BB(PDGFBB)ELISA试剂盒68559557
LYL1淋巴细胞性白血病相关序列1抗体大鼠胃蛋白酶(PP)ELISA试剂盒72195
ProperdinP子/备解素抗体大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)ELISA试剂盒89838
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验100pg 显色法 推荐产品: SuperECL Plus Western Blotting 超敏发光液 采用独特的发光底物系统,是世界上最灵敏的ECL Western Blot 化学发光试剂。用于Western Blotting 条带的荧光发光,检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP 的抗体及其关联的抗原。由两种溶液组成,使用前混合
激发态的Ru(byp)2+3。Ru(byp)3+3在衰减的同时发射一个波长为620NM的光子,重新回到基态Ru(byp)2+3。这一过程在电极表面反复进行,产生高效、稳定的连续发光,并不断增强。 ECL的突出优点是:①标记分子小,可实现多标记,标记物非常稳定;②发光时间长,灵敏度高;③光信号线性好,动力学范围宽,超过6个数量级;④可重复测量,重现性好;⑤可实现多元检测和均相免疫分析;⑥快速,完成一个样品的分析通常只需18 min;⑦可实现全自动化。由于电化学发光免疫分析具有优越性,是一种
【摘要】目的 利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术,建立人血清CK-MB的快速定量检测方法。 方法 采用双抗体夹心法(1株抗CK-MB的单抗用于包被微孔板,另1株抗CK-MB的单抗用于铕标记)建立CK-MB TRFIA。 结果 CK-MB TRFIA的线性测量范围为5~400ug/L,分析的灵敏度为0.24 ug/L,批内和批间的变异系数分别为4.9%~7.3%和8.4%~11.7%。与CK-MM 和CK-BB 均无交叉反应。将82份血清标本用本法与化学发光试剂盒同时检测,其相关
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