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- 2025年07月09日
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- 详细信息
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51
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详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
1包
操作步骤(仅供参考)：
1、PVDF膜(进口分装),0.20μm,13.5cm×10cm,10张/包哪家好贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：PVDF膜(进口分装),0.20μm,13.5cm×10cm,10张/包哪家好
英文名称：
产品规格：1
发货周期：1～3天
产品规格0.20μm13.5cm×10cm/张10张
产品保存室温干燥保存，一年有效。
产品简介该膜特别适用于凝胶电印迹后的膜上的蛋白质的测序和免疫检测，特别是对于分子量小于20KD的蛋白质。膜与湿式和半干式电印迹系统兼容。
注意事项
1.凝胶电泳后，将胶在转移缓冲液中平衡10分钟(对于厚度大于0.75mm的凝胶，20分钟)。
2.将平衡的凝胶与湿膜直接接触，去除凝胶和膜之间可能形成的气泡。
3.将膜/凝胶三明治放入电印迹装置中，根据您的具体应用进行印迹程序。
4.为了增强膜与低分子量蛋白质的结合(<20KD)，在转移缓冲液中加入20-30%的甲醇，降低外加电流。
5.膜转印完之后如需要染色剂染色，需要将膜用甲醇浸润15秒之后再染色。
需要材料
1.膜切割成凝胶的尺寸
2.甲醇润湿干膜
3.纯水
4.转移缓冲液用于湿转的25mMTris，192mM甘氨酸，pH8.3,10%甲醇或用于半干转移的48mMTris，39mM甘氨酸，pH9.2,10%甲醇
5.将滤纸片切割成凝胶的尺寸并浸泡在转印缓冲液中至少30秒
6.含有0.5-5%(w/v)(牛血清白蛋白，酪蛋白，脱脂奶粉)的封闭液
7.洗涤缓冲液含有0.05-0.1%Tween-20的PBS或TBS
PBS10mM磷酸钠，pH7.2，0.9%NaCl
TBS10mMTris，pH7.4，0.9%NaCl
8.在封闭缓冲液或洗涤缓冲液中稀释的一抗
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Dimeric mercapto propanone二聚巯55704784
DUROQUINONE四对醌527173
Pentaerythritol tris[3(1aziridinyl)propionate]季四三(3啶)57116457
2Tridecanone2十三593088
CALMAGITE钙镁试剂3147146
Tetraethylammonium hydroxide四铵77985
ZHUCENGCENGXIGUIJIAO柱层层析硅胶
(4Hydroxy2methyl)phenylboronic acid4羟2493035828
1,3,5Trimethylpyrazole1,3,5三唑1072919
ZVALOSUN苄羰L缬琥珀酰亚583238
ALUMINUM SULFIDE铝1302814
Trichlorosilane三硅10025782
2Aminodiphenylamine邻534850
glucosylvitexin牡荆素葡萄糖苷76135825
L(+)alloThreonineL别苏28954123
L半胱盐盐 含量：暂不提供 规格：1ml，3ml
LCysteine, Hydrochloride, Monohydrate 含量：暂不提供 规格：50次，200次
卵脂 含量：暂不提供 规格：50µl，250µl
Lecithin,from egg yolk 含量：暂不提供 规格：50µl，250µl
植物血凝素 含量：暂不提供 规格：20次，50次
Lectin, from Arachis Hypogaea (peanut) 含量：暂不提供 规格：20次，50次
植物血凝素 含量：暂不提供 规格：50次，100次
Lectin, from Triticum vulgaris 含量：暂不提供 规格：50次，100次
PVDF膜(进口分装),0.20μm,13.5cm×10cm,10张/包哪家好AlendronateSodium48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
Alitame48T/96T进口、国产1620ActeinHPLC≥98%
AlfuzosinHydrochloride48T/96T进口、国产1620AcyclovirHPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620HPLC≥97%
Allantoin48T/96T进口、国产1620AdenineHPLC≥98%
Alliin48T/96T进口、国产1620S-Adenosyl-L-HomocysteineHPLC≥98%
Allopurinol48T/96T进口、国产1620AdenosineHPLC≥98%
1、PVDF膜(进口分装),0.20μm,13.5cm×10cm,10张/包哪家好贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：PVDF膜(进口分装),0.20μm,13.5cm×10cm,10张/包哪家好
英文名称：
产品规格：1
发货周期：1～3天
产品规格0.20μm13.5cm×10cm/张10张
产品保存室温干燥保存，一年有效。
产品简介该膜特别适用于凝胶电印迹后的膜上的蛋白质的测序和免疫检测，特别是对于分子量小于20KD的蛋白质。膜与湿式和半干式电印迹系统兼容。
注意事项
1.凝胶电泳后，将胶在转移缓冲液中平衡10分钟(对于厚度大于0.75mm的凝胶，20分钟)。
2.将平衡的凝胶与湿膜直接接触，去除凝胶和膜之间可能形成的气泡。
3.将膜/凝胶三明治放入电印迹装置中，根据您的具体应用进行印迹程序。
4.为了增强膜与低分子量蛋白质的结合(<20KD)，在转移缓冲液中加入20-30%的甲醇，降低外加电流。
5.膜转印完之后如需要染色剂染色，需要将膜用甲醇浸润15秒之后再染色。
需要材料
1.膜切割成凝胶的尺寸
2.甲醇润湿干膜
3.纯水
4.转移缓冲液用于湿转的25mMTris，192mM甘氨酸，pH8.3,10%甲醇或用于半干转移的48mMTris，39mM甘氨酸，pH9.2,10%甲醇
5.将滤纸片切割成凝胶的尺寸并浸泡在转印缓冲液中至少30秒
6.含有0.5-5%(w/v)(牛血清白蛋白，酪蛋白，脱脂奶粉)的封闭液
7.洗涤缓冲液含有0.05-0.1%Tween-20的PBS或TBS
PBS10mM磷酸钠，pH7.2，0.9%NaCl
TBS10mMTris，pH7.4，0.9%NaCl
8.在封闭缓冲液或洗涤缓冲液中稀释的一抗
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Dimeric mercapto propanone二聚巯55704784
DUROQUINONE四对醌527173
Pentaerythritol tris[3(1aziridinyl)propionate]季四三(3啶)57116457
2Tridecanone2十三593088
CALMAGITE钙镁试剂3147146
Tetraethylammonium hydroxide四铵77985
ZHUCENGCENGXIGUIJIAO柱层层析硅胶
(4Hydroxy2methyl)phenylboronic acid4羟2493035828
1,3,5Trimethylpyrazole1,3,5三唑1072919
ZVALOSUN苄羰L缬琥珀酰亚583238
ALUMINUM SULFIDE铝1302814
Trichlorosilane三硅10025782
2Aminodiphenylamine邻534850
glucosylvitexin牡荆素葡萄糖苷76135825
L(+)alloThreonineL别苏28954123
L半胱盐盐 含量：暂不提供 规格：1ml，3ml
LCysteine, Hydrochloride, Monohydrate 含量：暂不提供 规格：50次，200次
卵脂 含量：暂不提供 规格：50µl，250µl
Lecithin,from egg yolk 含量：暂不提供 规格：50µl，250µl
植物血凝素 含量：暂不提供 规格：20次，50次
Lectin, from Arachis Hypogaea (peanut) 含量：暂不提供 规格：20次，50次
植物血凝素 含量：暂不提供 规格：50次，100次
Lectin, from Triticum vulgaris 含量：暂不提供 规格：50次，100次
PVDF膜(进口分装),0.20μm,13.5cm×10cm,10张/包哪家好AlendronateSodium48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
Alitame48T/96T进口、国产1620ActeinHPLC≥98%
AlfuzosinHydrochloride48T/96T进口、国产1620AcyclovirHPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620HPLC≥97%
Allantoin48T/96T进口、国产1620AdenineHPLC≥98%
Alliin48T/96T进口、国产1620S-Adenosyl-L-HomocysteineHPLC≥98%
Allopurinol48T/96T进口、国产1620AdenosineHPLC≥98%
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PVDF膜(进口分装),0.20μm,13.5cm×10cm,10张/包哪家好
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