超灵敏ECL免疫印迹化学发光检测试剂盒说明书

【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：超灵敏ECL免疫印迹化学发光检测试剂盒说明书
英文名称：
产品规格：50ml/100ml/200ml
发货周期：1～3天
蛋白质或核酸电泳分离后转印到膜上，以一抗及HRP标记的二抗结合膜上的目的蛋白，或以HRP标记的探针直接或间接结合膜上的核酸。洗膜后，ECL作为HRP的底物，进行显色反应。
产品描述
ECLReagent是一种基于Luminol的高灵敏性、非放射性化学发光底物，用于检测免疫印迹中固定在膜上的标记有辣根过氧化物酶（HRP）的蛋白，可检测fg--pg级的抗原。Luminol在酶的催化作用下发生氧化降解，在增强剂的作用下发射波长为428nm的极强的光信号，持续时间长、稳定性高，检测方便。
产品优势
光信号支持重复曝光，以获得最佳的结果
也可洗膜脱抗体后可供再次检测
稳定性高，持续时间长
背景非常低
具有最高的性价比，性能优于国内外主流产品
保存条件4°一年。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
超灵敏ECL免疫印迹化学发光检测试剂盒说明书待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
Cobalt chloride hexahydrate六水合化钴250毫克AR，99.8%
Cobalt钴100克AR，99%
COA辅酶5克BR
COA4-羧100克IND
CNP-Afu2--4--α-L-岩藻糖苷100克标准溶，100ug/ml
CN-11-3183脲100克BR，
Cloxacillin sodium salt hydrate唑青5KU高，916ug/mg
Clove oil子香油100克BR，97%
Clostripain from Clostridium histolyticum梭菌蛋白酶100毫克BR
Clindamycin Hydrochloride克林盐盐1克BR，18%
Clarithromycin红500毫克USP级，930u/mg
Citrinin橘500毫克组织培养级，10KU/ml
Citric acid枸橼1克BR，99%
Citric acid2-羟羧5克BR，99%
Citrazinic acid2,6-二羟异烟5克CP，
超灵敏ECL免疫印迹化学发光检测试剂盒说明书D-天冬酰一水物Raddeanin AAdducin protein  内收蛋白抗体PC/CPG ELISA Kit   小鼠胆甘油酯大鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产D-谷酰Hedera saponin B特价供应phospho-c-Jun(Thr91+Thr93)  化原癌c-Jun抗体TGF Beta2(Human transforming growth factors Beta2) ELISA Kit  转化生长子β2鸡神经胶质纤维性蛋白(GFAP)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产L-脯酰SaikosaponinA现货促销Gibberellins  抗赤霉抗体BAX (Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein) ELISA Kit  兔Bcl-2相关X蛋白神经胶质纤维性蛋白(GFAP)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产BOC-L-醇SaikosaponinC特价促销phospho-AQP2(Ser264/261)  化水通道蛋白2抗体(NF-KapB)ELISA Kit  大鼠核子κB小鼠神经胶质纤维性蛋白(GFAP)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。