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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
52
- 英文名:
Antigen Retrieval Solution for Floating Sections
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ml
一、漂片抗原修复液(10X)哪家好分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:漂片抗原修复液(10X)哪家好英文名称:Antigen Retrieval Solution for Floating Sections
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
本品是一种特别适合用于漂片的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。
本抗原修复液含有了广泛使用的柠檬酸钠等抗原修复试剂等,pH值约为8.5,可以有效降低漂片破碎的风险并去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
本产品特别适合用于漂片的免疫染色,也可用于常规的石蜡切片和冰冻切片等其它样品的检测。
一个包装的本产品可以配制成1000毫升抗原修复液(1X)。按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算,一个包装的本产品可以用于100个样品。
注意事项
1.抗原修复过程可以使用的染色缸和染色架或邮寄夹进行操作。塑料染色缸、染色架和邮寄夹可以很好地耐受沸水浴,而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。
2.本抗原修复液使用前必须用重蒸水或Milli-Q水稀释10倍,配制成抗原修复液(1X)。
储存条件4℃,有效期一年。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品:
2,1,3并噻二唑 Dextran0 质量规格:M.W:10000
3,6二溴9 Ammomium ferric citrate 质量规格:AR
4溴咪唑 Choline chloride 质量规格:>98%,适用于细胞培养
5溴噻唑 DGluconolactone 质量规格:>99%
2溴噻唑 Forchlorfenuron,4CPPU,CPPU,KT0 质量规格:>98%,BR
2噻唑... Magnesium acetate, tetrahydrate 质量规格:>99%,分子生物学级
噻唑 Sodium phosphate, monobasic, monohydrate 质量规格:ACS级,>98.5%
漂片抗原修复液(10X)哪家好CCDC93卷曲螺旋结构域蛋白93抗体小鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒3211765
CCDC96卷曲螺旋结构域蛋白96抗体小鼠血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒517431
CHCHD5卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD5抗体小鼠酰胆(ACH)ELISA试剂盒81276
CHCHD6卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD6抗体小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒128574
CHCHD8卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD8抗体小鼠白血病抑制子受体(LIFR)ELISA试剂盒8008740
Slc22a5溶质载体家族蛋白22成员5抗体大鼠活化素A受体抗体(ACVRAb)ELISA试剂盒2190218
NPFF/FMRFamide痛觉调节肽NPFF抗体大鼠脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒64550341
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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文献和实验免疫组化方法(石蜡切片)*重要提示:参考抗体说明书选用合适的抗体稀释液和抗原修复处理方法。IHC 方法:抗原修复缓冲液/抗体稀释液A. 所需溶液和试剂1. 二甲苯2. 无水乙醇(100% 和 95%,变性无水乙醇,组织学级)3. 去离子水(dH2O)4. 苏木精(可选)5. 漂洗(缓冲)液:1X TBS/0.1% Tween-20 (1X TBST):配制时,取 100 ml 10X TBS 加 900 ml 水稀释至 1 升。加入 1 ml Tween-20,混匀。10X Tris
本文重点讲述 IHC 操作流程中的关键步骤,并提供数据以支持及解释 CST 在实验过程中所提的建议。最后,本指南列出了 CST 科学家内部常用且最适用于与抗体配套使用的 IHC 试剂。抗原修复—热诱导的抗原表位修复 (HIER)缓冲液适用于 HIER 的缓冲液有多种。而 CST 常推荐的两种缓冲液是:pH6, 10 mM 柠檬酸盐缓冲液和 pH 8, 1 mM EDTA 缓冲液。缓冲液是否适用于您的实验取决于您所使用的一抗。请查阅产品说明书中所推荐的用于特异性抗体的修复缓冲液。一般而言
ml 20 *-需要各类大包装的以上溶液可致电 :8008208292. 同时可按客户要求配制不同 PH 值、摩尔浓度的缓冲液 . >>>抗原修复液
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









